吴小刚
- 作品数：16 被引量：30H指数：4
- 供职机构：中国农业大学农学与生物技术学院植物病理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生艺术更多>>
- 荧光假单胞菌2P24中RpoZ对抗生素合成基因的调控作用
- ＜正＞Pseudomonas fluorescens 2P24是从小麦全蚀病的自然衰退土壤中分离出来的,产生抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚（2,4-diacetylphloroglucinol;2,4-DA PG）是其主...
- 魏亚蕊吴小刚张力群周洪友
- 文献传递
- 荧光假单胞菌2P24中retS对抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚合成的影响被引量：4
- 2013年
- 假单胞菌中RetS是一个位于膜上的感应激酶,对多种基因的表达都有调控作用。在铜绿假单胞菌中,RetS可以与另一个感应激酶GacS直接互作,并抑制GacS的磷酸化。【目的】本文利用遗传学方法研究了荧光假单胞菌2P24中RetS对抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-DAPG)合成的影响,并对其可能的调控机制进行了初步探索。【方法】利用高压液相色谱法(HPLC)检测2P24及其衍生菌株中2,4-DAPG的产量。将Gac/Rsm信号途径中小RNA及调控蛋白的转录报告质粒转入到菌株2P24及其retS突变菌株中,检查RetS对以上基因转录表达的影响。【结果】菌株2P24中缺失retS后未知红色素和抗生素2,4-DAPG的产量较野生型均明显升高。进一步试验表明,RetS转录水平负调控小RNA RsmX和RsmZ的表达,这说明RetS可在转录后水平影响2,4-DAPG的合成。然而,同时缺失retS和gacS或同时缺失retS和gacA之后,由retS单基因缺失所造成的未知红色素和2,4-DAPG合成量升高、小RNA转录表达增强等性状消失,而与gacS或gacA单基因缺失突变体的表型一致。【结论】以上结果说明菌株2P24中RetS是2,4-DAPG及未知红色素合成的负调控因子,并且RetS对2,4-DAPG及未知红色素合成的调控依赖于Gac/Rsm信号传递路径。
- 刘九成张伟吴小刚张力群
- 关键词：GAC
- 荧光假单胞菌2P24调控基因突变体定殖能力和生防效果分析被引量：12
- 2008年
- 在温室盆栽条件下,研究了分离自小麦全蚀病自然衰退土壤、可防治多种土传病害的荧光假单胞杆菌2P24菌株的2,4-二乙酰基间苯三酚合成基因突变体、GacS/GacA双因子调控系统突变体,以及PcoR-PcoI群体感应系统的突变体菌株在植物根围定殖能力和防病效果。结果表明,2,4-二乙酰基间苯三酚生物合成突变体不影响菌株在植物根部的定殖;GacS/GacA双因子调控系统中任一因子的突变菌株和pcoI-突变菌株显著降低了菌株在植物根部的定殖能力。温室病害防治试验结果表明,与野生菌2P24相比,phlD-,gacS-,gacA-,pcoI-突变体对小麦全蚀病和番茄青枯病生防效果均显著降低;而相应的互补菌株生防效果恢复到野生型的水平。结合前期工作结果,我们推测GacS/GacA双因子调控系统和QS系统在2P24菌株定殖和防病过程的信号传递上形成级联途径。
- 张清霞吴小刚张力群唐文华
- 关键词：荧光假单胞菌生物防治群体感应系统
- 生防假单胞菌2P24中hfq基因对抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚和PcoI-PcoR群体感应系统的影响
- 荧光假单胞菌2P24分离自小麦全蚀病自然衰退土壤,对多种植物病原细菌和真菌具有明显的拮抗作用,能长期定殖于小麦等作物根围。前期研究表明抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-DAPG)是菌株2P24的主要生防功能因子,而...
- 吴小刚张力群
- 荧光假单胞杆菌2P24中gacA、dsbA和phoP/phoQ基因对小RNA因子RsmZ的转录调控被引量：2
- 2008年
- Pseudomonas fluorescens 2P24是分离自麦田的植物病害生物防治菌株,产生抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-diacetylphloroglucinol;2,4-DAPG)是其主要防病机制。菌株2P24中小RNA基因rsmZ正调控抗生素2,4-DAPG的产量。【目的】本文研究上游调控因子对RsmZ转录表达的影响,以进一步理解抗生素产生机制。【方法】构建了rsmZ::lacZ的转录融合结构,将含有该结构的报告载体转入2P24的多个调控基因缺失突变体中,检测相应的缺失基因对rsmZ转录水平的调控作用。【结果】结果表明,反应调控因子GacA对rsmZ基因的转录具有正调控作用,二硫键合成蛋白DsbA对其负调控;双因子调控系统PhoP/PhoQ突变后,rsmZ基因的转录明显滞后。【结论】小RNA基因rsmZ在菌株2P24中受到多个基因的调控,并在信号传递网络中起到重要作用。
- 姜维芳吴小刚闫庆张力群
- 关键词：假单胞杆菌小RNA
- 荧光假单胞菌2P24调控基因突变体定殖能力和生防效果分析
- ＜正＞荧光假单胞杆菌2P24对多种植物病原细菌和真菌具有明显的拮抗作用,对多种土传植物病害有较好的生物防治效果。本文在温室盆栽条件下研究了菌株2P24的抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚合成基因突变体,GacS/GacA 双...
- 张清霞吴小刚张力群唐文华
- 文献传递
- 荧光假单胞菌2P24中phlF基因对抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚产生的影响被引量：3
- 2010年
- Pseudomonas fluorescens2P24是分离自山东小麦全蚀病自然衰退土的1株生物防治菌株,产生抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-diacetylphloroglucinol;2,4-DAPG)是其主要防病机制。2,4-DAPG是由phlACBD基因簇合成,受多种调控因子调控。本研究用Tn5转座子插入技术,获得1株phlA基因转录增强的突变体,其突变基因为抗生素合成的负调控基因phlF。与野生菌相比,phlF基因的缺失突变体中phlA的转录增强约100倍,抗生素产量提高492倍。同时,菌株2P24的phlF缺失突变体对病原真菌的拮抗作用明显增强。但2,4-DAPG过量表达菌株对多种作物种子根生长有抑制作用。
- 周宇平吴小刚周洪友何月秋张力群
- 关键词：假单胞菌生物防治
- 荧光假单胞菌2P24中gidA基因对PcoI/PcoR群体感应系统的影响被引量：1
- 2014年
- 【目的】荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)2P24中PcoI/PcoR群体感应系统是调控生物膜形成与植物根部定殖能力的重要元件,同时该系统也受到多种上游因子的调控。利用遗传学方法研究P.fluorescens 2P24中gidA基因对群体感应系统的调控作用。【方法】将群体感应信号合成基因pcoI的转录报告质粒p970km-pcoIp转入菌株2P24和gidA基因突变体中以检测gidA对pcoI基因表达的影响,并利用报告菌Agrobacterium tumefaciens NTL4(pZLR4)测定菌株2P24及其衍生菌的信号N-乙酰高丝氨酸内酯(AHL)产量。【结果】gidA基因突变后pcoI基因的转录表达和AHL产量与野生型2P24相比显著降低。gidA基因突变体的游动能力没有受到明显的影响,但生物膜的形成显著低于野生型和互补菌株。小麦根部定殖实验表明,温室条件下gidA突变菌株在灭菌土和自然土中对小麦根尖和根围的定殖量较野生型和互补菌显著减少。此外,突变gidA基因并不影响菌株在LB培养基中的生长,但以葡萄糖、蔗糖、果糖、甘油、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、木糖或山梨醇为唯一碳源时,gidA突变体的生长受到明显的抑制。【结论】GidA对假单胞菌2P24中的PcoI/PcoR群体感应系统、生物膜形成、定殖和碳源利用具有显著的正调控作用。
- 张伟张博吴小刚张力群
- 关键词：荧光假单胞菌
- 荧光假单胞菌2P24中抗生素合成基因和群体感应系统调控因子的筛选及分析
- 吴小刚
- 关键词：假单胞菌群体感应系统
- 生防假单胞菌2P24中mvaT和mvaV基因对PcoI/PcoR群体感应系统的调控作用被引量：3
- 2012年
- 【目的】自小麦全蚀病自然衰退土壤分离得到的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)2P24,可防治多种由植物病原菌引起的土传病害。菌株2P24具有群体感应(quorum-sensing,QS)系统PcoI/PcoR,该系统影响生防菌2P24生物膜的形成以及其在小麦根围的定殖能力,从而影响2P24的生防能力。本文利用遗传学方法进一步研究了2P24中QS系统的调控途径。【方法】将QS系统信号合成基因pcoI的转录报告质粒p970Gm-pcoIp转入gacA基因突变菌株PM201中,再利用Tn5转座子对该菌株进行随机突变,筛选影响pcoI基因表达的调控因子。【结果】根据菌落颜色的变化筛选到2株突变菌株。Tn5插入位点和基因序列分析表明这2个突变体中Tn5破坏了同一个基因mvaT;设计引物利用PCR方法从2P24基因组中获得mvaT基因及其同源基因mvaV。转录融合报告实验表明:与野生菌株2P24相比,mvaT及mvaV突变体中pcoI基因的表达和N-乙酰高丝氨酸内酯的产量显著提高;HPLC试验表明mvaT和mvaV基因影响抗生素2,4-二乙酰基间苯三酚的合成。细菌双杂交试验证实,MvaT蛋白和MvaV蛋白在体内发生自身互作,这两个蛋白也可相互作用。【结论】以上结果表明mvaT和mvaV参与调控生防假单胞菌2P24的PcoI/PcoR群体感应系统,并可能影响其生防功能基因的表达。
- 吴小刚魏亚蕊刘九成张力群
