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周海军
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
复旦大学附属中山医院肝癌研究所
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李向农
徐州医学院附属医院
王骥
徐州医学院附属医院
董红燕
徐州医学院基础学院神经生物学研...
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年份
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2012
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人外周血间充质干细胞向肝样细胞诱导分化的实验研究
被引量:1
2012年
目的探讨人外周血来源问充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的体外分离、培养及诱导分化成有功能肝样细胞的可行性。方法静脉采集13例成人外周血,分别应用单纯密度梯度离心法及人间充质干细胞富集试剂+密度梯度离心两步法分离MSCs;将得到的MSCs经贴壁纯化扩增,以流式细胞仪检测细胞表面抗原后,经肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)及抑瘤素M(OSM)诱导分化成肝样细胞;以RT—PCR、免疫荧光染色及Westernblot检测所得细胞中自蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)在基因及蛋白水平上的表达情况;电镜检测所得细胞的超微结构。结果外周血应用单纯密度梯度离心法无法培养得到MSCs。人间充质干细胞富集试剂+密度梯度离心两步法可分离并培养获得梭形细胞,经细胞表面抗原检测证实为MSCs;所得细胞经过纯化扩增和诱导分化后,RT—PCR、免疫荧光及Westernblot均证实细胞在基因及蛋白水平上存在ALB和AFP的表达;电镜证实其具有类肝细胞的超微结构。结论人外周血中存在MSCs并可使用非侵袭性的人问充质干细胞富集试剂+密度梯度离心两步法方法提取分离,所得MSCs具诱导分化成有功能肝样细胞的能力,此方法能够为以后的肝组织工程研究提供种子细胞来源。
王骥
周海军
董红燕
李向农
关键词:
外周血干细胞
间充质干细胞
肝样细胞
诱导分化
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