姚芳
- 作品数：26 被引量：82H指数：6
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 高糖对大鼠系膜细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制物表达的影响
- 目的：观察高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制物TIMP-1的表达,进一步探索糖尿病肾病中肾小球细胞外基质积聚的机制.结论：糖尿病肾病时肾小球细胞外基质的积聚不仅是由于ECM合成增多,ECM降...
- 姚芳
- 关键词：系膜细胞细胞外基质基质金属蛋白酶转化生长因子
- 文献传递
- 胰岛素对人肾小管上皮细胞SREBP-1、FAS表达及脂质代谢的时效性研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularepithelial cells line,HKCcells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞内脂滴形成的时效性影响。方法给予人肾小管上皮细胞100nmol·L-1胰岛素刺激并根据刺激时间分为0、2、4、6、12和24h组。SREBP-1和FAS mRNA采用RT-PCR检测,SREBP-1蛋白的表达用免疫细胞化学和Western blot检测,细胞内脂滴检测采用油红O染色。结果和0h组相比,2h组HKC细胞未见SREBP-1和FAS mRNA表达变化,而4、6、12h组HKC细胞SREBP-1和FAS mRNA表达均升高,其中6h组升高最明显,分别是0h对照组的3.578倍和4.272倍,差异有统计学意义。Western blot检测显示4、6和12h组HKC细胞SREBP-1蛋白的前体和成熟片段表达均较0h和2h组增强,其中也是6h组表达最强,前体和成熟片段分别是0h组的4.106倍和5.167倍。免疫细胞化学技术显示SREBP-1蛋白在人肾小管上皮细胞株中定位于细胞质,在4、6和12h组HKC内其表达明显强于0、2和24h组。油红O染色提示胰岛素刺激6h后HKC细胞内可见明显红染脂滴颗粒,而其他各组HKC细胞未见着色。结论胰岛素呈时间依赖性引起人肾小管上皮细胞SREBP-1和FAS的上调,且作用在6h达到高峰,并最终导致细胞内脂滴沉积,这可能是代谢综合征引起肾脏脂质沉积的重要机制之一。
- 郝军刘淑霞刘青娟赵松郑书深姚芳刘巍段惠军
- 关键词：胰岛素人肾小管上皮细胞脂肪酸合成酶
- 厄贝沙坦对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中Wnt/β-catenin信号途径表达的影响被引量：13
- 2009年
- 目的探讨Wnt/β-catenin信号途径在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的表达及血管紧张素受体拮抗剂(ARB)厄贝沙坦对该途径活性的影响。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HKC),分为正常糖组、甘露醇对照组、高糖组、高糖+厄贝沙坦干预组。采用免疫细胞化学观察β-连环蛋白(β-catenin)表达情况;Western印迹检测Wnt4、β-catenin、E-钙粘蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;逆转录-聚合酶链反应检测Wnt4和β-catenin mRNA表达水平。结果高糖组较正常糖及渗透浓度对照组Wnt4蛋白及mRNA、α-SMA蛋白表达增高,E-cadherin表达降低,β-catenin总蛋白及mRNA水平无明显变化,细胞质及核蛋白表达增强。Wnt4和β-catenin核蛋白表达在高糖诱导24h达高峰;厄贝沙坦下调Wnt4、α-SMA及β-catenin核蛋白表达,升高E-cadherin表达水平。结论Wnt/β-catenin信号途径可能参与了高糖介导的肾小管上皮细胞转分化过程。厄贝沙坦可能通过调节Wnt/β-catenin信号途径活性而抑制该过程。
- 闫喆姚芳张丽萍刘力强郝军傅淑霞段惠军
- 关键词：Β-连环蛋白E-钙粘蛋白Α-平滑肌肌动蛋白上皮细胞转分化厄贝沙坦
- 糖尿病肾病细胞外基质代谢失衡机制的研究
- 姚芳闫喆史永红郝军曹艳萍段惠军
- 课题研究结合体内外实验方法，观察糖尿病肾病过程中CTGF、基质金属蛋白酶MMP-2及其膜激活剂MT1-MMP和其组织抑制剂TIMP-2在肾小球细胞外基质积聚中的作用，并采用小干扰RNA技术探讨Smad2和Smad3在调节...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病肾病糖尿病并发症
- 高糖对小鼠足细胞表型转化的诱导作用及机制探讨被引量：2
- 2012年
- 目的观察高糖对小鼠足细胞表型转化的诱导作用,并探讨其机制。方法将传代培养后的小鼠足细胞随机分为A、B、C三组,A组常规培养,B组加入终浓度为30 mmol/L的葡萄糖、C组加入终浓度为30 mmol/L的葡萄糖及10μmol/L的蛋白质酪氨酸激酶(JAK2)特异性阻断剂α-氰-(3,4-二羟基)-N-苄基肉桂酰胺(AG490)进行培养,48 h后收集细胞,采用Western blot法检测足细胞中自身标志物人肾病蛋白(Nephrin)、间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及磷酸化蛋白质酪氨酸激酶(p-JAK2)蛋白,采用RT-PCR检测足细胞中的Nephrin、α-SMA mRNA。结果 A组足细胞中Nephrin、α-SMA、p-JAK2蛋白积分光密度值分别为0.96±0.01、0.21±0.02、0.39±0.01,B组分别为0.58±0.01、0.66±0.07、0.71±0.02,C组分别为0.87±0.04、0.35±0.02、0.41±0.04;A组足细胞中Nephrin、α-SMA mRNA的相对表达量为1.53±0.04、0.57±0.01,B组分别为0.82±0.09、0.89±0.03,C组分别为1.30±0.04、0.78±0.03。B组与A组比较,P均<0.05;C组与B组比较,P均<0.05。结论高糖可通过激活JAK/STAT信号途径诱导足细胞发生表型转化。
- 刘青娟张玉军李建英付晓辉姚芳吴海江邢玲玲
- 关键词：高糖状态足细胞Α-平滑肌肌动蛋白蛋白质酪氨酸激酶
- 细胞因子信号传导抑制蛋白1对糖基化终末产物诱导的肾小管细胞转分化的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对糖基化终末产物(AGEs)诱导肾小管上皮细胞(HKC)转分化及JAK/STAT信号通路的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆。分别采用白蛋白和AGEs进行刺激。采用Western印迹检测SOCS-1、α-SMA、E-钙黏着糖蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(collagenI,ColI)、信号转导和转录活化因子1、3(STAT1、STAT3)及其磷酸化蛋白(p-STAT1、p-STAT3)的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞上清液中转化生长因子-β1(TGF-β1)的分泌;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测α-SMA和E-cadherin mRNA的表达。结果与对照组相比,AGEs组肾小管细胞α-SMA和ColI蛋白表达明显上调,细胞培养上清中TGF-β1含量增加,α-SMA mRNA的表达增加,而E-cadherin蛋白和mRNA表达下调。SOCS-1过表达能够抑制AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA和ColI的表达及STAT1和STAT3的磷酸化,减少TGF-β1的含量,下调AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA mRNA的表达,同时能够逆转AGEs刺激引起的HKC细胞E-cadherin蛋白和mR-NA的下调表达。结论SOCS-1过表达抑制AGEs诱导的肾小管上皮细胞转分化可能是通过抑制JAK/STAT信号通路活化实现的。
- 史永红任韫卓赵松郝军姚芳刘巍吴海江段惠军
- 关键词：糖基化终末产物肾小管上皮细胞转分化
- 瘦素受体基因敲除SD大鼠的表型及病理观察被引量：3
- 2019年
- 目的观察CRISPR/Cas9技术建立的肥胖、代谢综合征和糖尿病前期特征的瘦素受体基因敲除大鼠模型的多种参数,为代谢性疾病的分子机制研究和新药研发提供更为理想的动物模型。方法1)定期测定Lepr^-/-大鼠的体重、摄食量、随机血糖和空腹血糖;葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验;血清血脂参数;2)观察14周和18周Lepr^-/-大鼠主要脏器的病理学改变;3)观察脏器脂质沉积情况。结果Lepr^-/-大鼠表现明显肥胖、高摄食量、葡萄糖耐量受损、胰岛素抵抗和血脂异常;14周和18周出现胰岛增生和心脏肌细胞肥大、脂肪肝、肥胖相关性肾病;肝细胞、肾小管上皮细胞和骨骼肌纤维内脂质沉积。结论Lepr^-/-大鼠是代谢性疾病的病因研究和新药研发的理想动物模型。
- 蒋丹丹曹兰凤许朝霞李硕董晓辉姚芳张连珊
- 关键词：脂质沉积
- 抑瘤素M在糖尿病小鼠肾组织中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的探讨抑瘤素M(oncostatin M,OSM)在糖尿病小鼠肾组织中的表达。方法腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ;150 mg/kg)诱发糖尿病小鼠模型,分别于成模后4、8和12周收集肾组织标本进行以下检测:免疫组织化学和酶联免疫吸附实验检测肾组织中OSM的表达;马松染色观察肾小管间质纤维化程度。结果与对照组相比,糖尿病小鼠肾组织中OSM的表达明显高于对照组增多,且其表达与肾小管间质纤维化程度呈正相关(r=0.946,P<0.01)。结论 OSM在糖尿病小鼠肾组织中的表达升高并可能参与了肾小管间质纤维化的进展。
- 王颖邢玲玲姚芳郝军刘淑霞刘青娟
- 关键词：糖尿病肾病抑瘤素M肾小管间质病变
- 糖尿病肾病细胞外基质代谢失衡机制及药物干预的研究
- 目的：糖尿病肾病（DN）是糖尿病（DM）最常见而严重的并发症，是终末期肾病的主要原因之一。糖尿病肾病的病变特征为肾小球系膜基质积聚和基底膜增厚。细胞外基质（ECM）的成分与含量取决于基质合成与降解两者之间的动态平衡。近年...
- 姚芳
- 关键词：糖尿病肾病肾小球系膜细胞结缔组织生长因子糖尿病并发症
- PTEN在糖尿病肾病患者足细胞损伤中的作用被引量：10
- 2014年
- 目的探讨磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3 kinese/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路抑制因子PTEN与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者足细胞损伤的关系。方法收集30例DN患者和10例健康志愿者的24h尿标本,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测患者尿液中足盂蛋白(podocalyxin,PCX)的水平;肾活检组织进行形态学观察,根据肾小球病变将DN患者分为3组,免疫组化法检测各组肾小球内p-Akt和PTEN的表达。结果 DN患者尿液中PCX的水平明显高于健康对照组,并随肾小球病变加重其水平逐渐上升;p-Akt和PTEN在DN患者肾小球的表达有所上调,但随着肾小球病变的加重其表达逐渐减少;DN患者尿液中PCX水平与PTEN表达呈负相关,与24h尿蛋白呈正相关。结论 PTEN表达下调可能通过改变Akt的活化状态,从而在DN患者足细胞损伤中发挥一定作用。
- 邢玲玲傅淑霞杨林姚芳王建荣于连英刘青娟
- 关键词：糖尿病肾病足细胞
