姜海芳
- 作品数：33 被引量：80H指数：6
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金吉林省科技发展计划基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 抗牛边缘无浆体MSP5蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 以纯化的牛边缘无浆体MSP5蛋白免疫BALB/c鼠，应用常规杂交瘤技术获得两株能稳定分泌特异性单克隆杭体的杂交瘤细胞系，分别命名为1D8和2F3。间接ELISA检测腹水效价分别为106和105，亚类鉴定结果分别为IgG2...
- 倪宏波姜海芳周玉龙王春仁辛九庆宫大庆钱爱东
- 关键词：边缘无浆体单克隆抗体杂交瘤
- 人工感染边缘无浆体对犊牛血清生化及血液流变学的影响
- 通过人工感染的方法建立牛边缘无浆体病动物模型,以揭示边缘无浆体(A.marginale)感染对犊牛血液主要生化指标和血液流变学指标的影响.采用地塞米松注射液长期抑制一月龄犊牛的免疫力,经颈静脉接种含有A.marginal...
- 倪宏波宫大庆姜海芳周玉龙郭爽王春仁
- 关键词：犊牛边缘无浆体血清生化血液流变学
- 牛边缘无浆体膜表面蛋白5的原核表达及其免疫原性
- 2011年
- 目的原核表达牛边缘无浆体(Anaplasma marginale)膜表面蛋白5(Membrane surface protein 5,MSP5),并分析其免疫原性。方法 pQE-MSP5/BL21(DE3)阳性重组菌经IPTG诱导表达,表达产物经MagneHisTM蛋白纯化系统纯化后,进行SDS-PAGE分析。将纯化的MSP5蛋白免疫小鼠,以生理盐水免疫作为阴性对照,ELISA法检测血清抗体水平,淋巴细胞增殖试验检测脾淋巴细胞增殖水平,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群分类。结果表达的重组MSP5蛋白相对分子质量约为23 000;纯化蛋白的纯度为83.2%,浓度为1.087 mg/ml;纯化的MSP5蛋白可刺激小鼠产生特异性抗体;免疫组小鼠淋巴细胞增殖水平明显高于阴性对照组(P<0.05);免疫组小鼠CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比例高于阴性对照组,CD8+比例低于阴性对照组。结论已成功表达并纯化了牛边缘无浆体MSP5,其免疫原性良好,为制备单克隆抗体及建立准确可靠的诊断方法奠定了基础。
- 倪宏波姜海芳周玉龙王春仁宫大庆钱爱东
- 关键词：边缘无浆体原核细胞基因表达免疫原性
- 新城疫病毒F和HN基因真核表达载体的构建被引量：3
- 2007年
- 根据GenBank中新城疫病毒(NDV)F、HN基因序列和真核细胞表达载体pEGPF-N1的克隆位点,分别设计一对引物,通过PCR方法获得了F、HN基因,经回收纯化,将产物连接到克隆载体pMD18-T上。酶切鉴定和序列分析后,再将目的基因亚克隆到真核细胞表达载体pEGPF-N1上,经鉴定,成功构建含有NDVF和HN基因的真核细胞表达载体pEGPF-N1-F和pEGPF-N1-HN,为下一步研究NDVF和HN蛋白在细胞凋亡中的生物学功能奠定基础。
- 闻晓波宋佰芬姜海芳崔玉东
- 关键词：新城疫病毒F基因HN基因真核细胞表达载体
- 奶牛猝死病例中O_(101)大肠杆菌的分离及部分毒力相关抗原的鉴定
- 2011年
- 为鉴定引起奶牛猝死综合征的病原及其毒力相关抗原,本研究无菌采集急性死亡奶牛的肝、脾、肾及小肠内容物样本,进行病原菌的分离和纯化,通过微生物学诊断、肠毒素试验、血清学试验、药敏试验和菌毛PCR进行鉴定,结果表明所分离的菌株为产ST肠毒素并具有F41菌毛、血清型为O101的大肠杆菌,该菌株对克林霉素、多黏菌素B、头孢曲松高度敏感。本实验为进行奶牛大肠杆菌性猝死综合征的防治奠定了基础。
- 倪宏波孙福先王冰石星明姜海芳周玉龙王春仁宫大庆
- 关键词：猝死综合症肠毒素血清型菌毛
- 检测牛边缘无浆体抗体的竞争抑制ELISA方法的建立
- 2011年
- 为建立检测牛边缘无浆体(Anaplasma marginale)抗体的方法,本研究以牛A.marginale膜表面重组MSP5蛋白作为包被抗原,抗MSP5单克隆抗体(MAb)作为竞争抗体,建立一种用于检测牛A.marginale抗体的重组MSP5蛋白竞争抑制ELISA(CI-ELISA)方法。经优化确定CI-ELISA的最佳反应条件为:抗原包被浓度为2μg/孔,封闭液为2%脱脂乳,MAb的稀释度为1∶400,酶标二抗的稀释度为1∶1000,阴性和阳性血清临界值分别为33%和40%;该方法具有良好的特异性和重复性;2348份临床血清样品的检测结果表明,217份为阳性,阳性率为9.2%,与IDEXX A.marginale抗体检测试剂盒的阳性符合率为95.3%,阴性符合率为100%。本实验建立的ELISA方法具有较高的特异性和重复性,可用于流行病学调查研究。
- 倪宏波王冰姜海芳周玉龙王春仁宫大庆钱爱东
- 关键词：流行病学调查
- 牛无浆体病的研究进展被引量：7
- 2010年
- 牛无浆体病主要是由边缘无浆体经脾传播的专性寄生于红细胞内的血液传染病,给养牛业带来较大的经济损失。文章对该病的病原、流行病学、临床症状、病理变化,病原诊断与检测及疾病防治等方面做了较为详细的介绍,旨在为我国开展该病的研究提供理论参考。
- 倪宏波姜海芳周玉龙辛九庆
- 关键词：边缘无浆体病
- 边缘无浆体病动物模型的建立及其生理指标变化规律的研究被引量：1
- 2010年
- 建立边缘无浆体病的动物疾病模型。采用地塞米松注射液长期抑制实验动物的免疫力,通过犊牛颈静脉接种含有无浆体病原的牛血液,监测奶牛无浆体感染过程中其生理指标的变化趋势,以及在实验动物体内的消长规律,建立起无浆体人工感染动物模型。无浆体感染实验动物有5～7d的潜伏期,感染早期体温先升高后回复正常,呼吸先加快后回复正常水平,心率无明显变化。边缘无浆体感染过程中,红细胞出现大量变形和破碎,数量减少,白细胞呈现减少升高再减少的过程后,逐步恢复到正常水平,而血小板数量增加。因此,可用1月龄犊牛在免疫抑制情况下建立无浆体人工感染动物模型,揭示犊牛在感染边缘无浆体过程中其生理与血液指标的变化规律。
- 倪宏波宫大庆姜海芳王欣周玉龙郭爽王春仁
- 关键词：边缘无浆体奶牛动物模型
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 穆飞飞孙龚刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 牛支原体套式PCR检测方法的建立被引量：26
- 2009年
- 为建立牛支原体检测方法,本研究采用牛支原体的oppD/F基因的两对特异性引物,建立了牛支原体的套式PCR检测方法。该套式PCR可以从100ccu/mL(color change unit颜色变化单位)的牛支原体培养物中检出目的片段;同时还可以从病牛肺脏、病牛鼻拭子中扩增出目的片段,而且结果与病原分离结果一致。特异性试验结果表明,该方法与其它支原体无交叉反应,是一种特异性强、敏感性高的牛支原体检测方法。
- 李媛董惠张美晶陈超曹培丽郭丹姜海芳辛九庆
- 关键词：牛支原体牛传染性胸膜肺炎套式PCR
