宋华梅
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：三峡大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 天花粉蛋白突变体的构建及其与重组天花粉在原核系统中的表达和纯化
- 2011年
- 目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。
- 曹卫红黄利鸣王艳林刘朝奇彭平平宋华梅尤程程黄益玲谭寒星吴燕珍
- 关键词：天花粉蛋白基因突变原核表达
- 重组天花粉蛋白对宫颈癌去甲基化作用研究及应用
- 黄利鸣尤程程崔蕾黄益玲宋华梅彭平平曹卫红王艳华王艳林刘瑞雪
- 主要内容：天花粉蛋白(Trichosanthin，TCS)是单链核糖体失活蛋白。临床上已应用于引产治疗异位妊娠、恶性葡萄胎、并尝试治疗肿瘤。该课题利用基因工程技术获得性质均一来源稳定的重组TCS(rTCS)，并深入探讨了...
- 关键词：
- 关键词：宫颈癌天花粉蛋白肿瘤治疗
- 哺乳动物DNA甲基转移酶家族的研究进展被引量：6
- 2010年
- 哺乳动物DNA甲基化是基凶组DNA的一种主要表观遗传修饰形式，在基因的表达与调控中起重要作用．亦与哺乳动物细胞的生长和发育以及肿瘤的发生与发展密切相关。DNA甲基化主要是通过DNA甲基转移酶（DNMT）家族催化来实现的。近年来，随着人们对表观遗传和肿瘤研究的深入．对DNMT的研究也取得长足的进展。本文就DNMT分类，
- 宋华梅黄利鸣王艳林
- 关键词：DNA甲基转移酶哺乳动物细胞家族表观遗传修饰DNA甲基化
- 天花粉蛋白对宫颈癌Caski细胞DNMT1基因表达及酶活性的影响
- 目的:研究反义 DNMT1对人宫颈癌 Caski细胞增殖和生长周期的影响,以及对Caski细胞中抑癌基因 APC(Adenomatous Polyposis Coli APC)的表达及其5ˊ端启动子区 CpG岛甲基化状态...
- 宋华梅
- 关键词：宫颈肿瘤基因表达天花粉蛋白酶活性
- 文献传递
- 重组天花粉蛋白的真核表达及其对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:观察重组天花粉蛋白(recombinant trichosanthin,rTCS)高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖的影响。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(-)/6His-TCS,稳定转染Caski细胞后,RT-PCR,Western-blot筛选rTCS高表达细胞株。以转染空载质粒pcDNA3.1(-)细胞株作为对照组,MTT法检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果:成功获得高表达rTCS的Caski细胞株,rTCS高表达能够显著抑制Caski细胞增殖(P<0.01),并能将细胞抑制在G1和G2期(P<0.05)。结论:rTCS在细胞内高表达具有抗人宫颈癌细胞生长的作用,该研究为宫颈癌治疗提供了新的思路。
- 彭平平黄利鸣王艳林尤程程曹卫红宋华梅谭寒星吴燕珍
- 关键词：宫颈癌细胞增殖
