张华峰 作品数:28 被引量:98 H指数:6 供职机构: 天津医科大学总医院 更多>> 发文基金: 天津市卫生局科技基金 国家自然科学基金 天津市科技攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
生物力学因素在激素性股骨头坏死中对软骨细胞的作用 2010年 目的建立大鼠激素性股骨头坏死正常负重和超负重模型,探究力学因素在激素性股骨头坏死中对于软骨细胞的作用。方法4月龄健康Wistar大鼠随机分成实验组与对照组。臀肌注射地塞米松磷酸钠(20mg/kg),每周1次,共计8w。实验组,置于1km/h跑步机中,强迫动物跑动,形成股骨头坏死超负重模型;对照组,生理状态下正常负重。分别于2、4、6、8w处死大鼠,取右侧股骨头标本,行免疫组织化学法Bcl-2和MMP-1染色,比较不同组之间的累计光密度(IOD)值。取左侧股骨头行组织病理学检查。结果实验组Bcl-2和MMP-1累计光密度(IOD)与对照组比较,第4周起有明显统计学差异(P<0.05)。实验组Bcl-2和MMP-1表达随激素注射时间增加有统计学意义(P<0.05),q检验显示实验组Bcl-2和MMP-1表达从4w开始两两之间有统计学意义,8w时表达最多(P<0.05)。实验组8w时病理学呈股骨头坏死表现。结论力学因素通过影响Bcl-2和MMP-1的生成,调节着软骨细胞的凋亡,促进软骨组织的改建。 马信龙 张华峰 马剑雄 杨阳 王志钢 张园 王涛关键词:激素性股骨头坏死 软骨 BCL-2 MMP-1 全髋关节置换术使用羟基磷灰石涂层股骨柄假体的Meta分析 被引量:1 2012年 背景:越来越多的青壮年患者在接受全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)中使用羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)涂层股骨柄假体,评价HA涂层多孔股骨柄假体的相关临床对照研究的报道并不完全一致,且样本量较少,存在一定局限性。目的:通过Meta分析评价THA使用HA涂层股骨柄假体的有效性及安全性。方法:计算机检索数据库Medline(1966年至2012年2月)、PubMed(1966年至2012年2月)、Embase(1966年至2012年2月)、Cochrane图书馆(2011年第4期)、中国生物医学光盘数据库(1978年至2012年2月)、中国生物医学文献数据库(1978年至2012年2月)和维普中文科技期刊数据库(1978年至2012年2月),收集THA使用HA涂层股骨柄假体和多孔股骨柄假体的临床随机对照试验,提取数据进行分析,采用统计软件RevMan5.1进行Meta分析。结果:共纳入10个随机对照研究,其中试验组480例,对照组478例。Meta分析结果显示,与对照组相比,接受HA涂层股骨柄假体的患者THA术后Harris评分无统计学差异(均数差=1.49,95%置信区间[-2.32,5.31],P=0.44),周围透光线的发生率无统计学差异(优势比=1.06,95%置信区间[0.76,1.48],P=0.74),点焊现象发生率无统计学差异(优势比=1.09,95%置信区间[0.74,1.62],P=0.66)。结论:HA喷涂于股骨柄假体多孔表面,对于初次THA无临床益处。限于纳入文献的数量和质量,Meta分析结果尚有待于更多高质量大样本随机对照试验以予证实。 王晨光 马信龙 李稚君 张华峰 张园 许可 郑永发关键词:全髋关节置换 羟基磷灰石 假体 META分析 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶-4在成骨细胞凋亡中的作用 被引量:2 2018年 目的探讨高浓度地塞米松(dexamethasone,DEX)激活还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-reduced, NADPH)氧化酶-4(NADPH oxidase 4,Nox4)途径产生氧自由基对成骨细胞凋亡的影响和作用机制。方法设正常对照组,DEX组,DEX+N-乙酰半胱氨酸(n-aeetylcysteine,NAC)组,NAC组,DEx+二亚苯基碘(diphenyleneiodonium chloride,DPI)组,DPI组。干预培养24h后,倒置显微镜下观察成骨细胞形态;MTT法检测细胞活性;荧光探针DCFH-DA检测细胞内氧自由基水平;Hoechst染色检测成骨细胞凋亡;荧光定量PCR及Western-Blot检测Nox4/NADPH氧化酶基因和蛋白的表达;Nox4 siRNA沉默细胞内Nox4/NADPH氧化酶表达后,通过荧光探针检测氧自由基水平。结果采用1000nmol/L地塞米松处理成骨细胞,按照实验分组干预培养24h,倒置相差显微镜下观察和MTT结果提示,与正常对照组相比,DEX组成骨细胞出现明显的皱缩、变形,细胞存活率显著降低,加入NAC或DPI后细胞形态良好,生长旺盛。荧光探针检测结果显示,DEX组成骨细胞内氧自由基生成(45.14%±1.49%)与正常对照组(5.86%±0.28%)相比,差异有统计学意义(P=0.000);Hoechst染色结果显示,DEX组成骨细胞凋亡(29.60%±1.52%)与正常对照组(4.12%±0.67%)相比,差异有统计学意义(P=0.000)。DEX组成骨细胞内氧自由基生成与DEX+NAC组(28.06%±1.61%)和DEX+DPI组(23.70%±1.28%)相比,差异均有统计学意义(均P=0.000),提示NAC或DPI显著降低了成骨细胞内氧自南基的产生。DEX组成骨细胞凋亡与DEX+NAC组(8.94%±1.47%)和DEX+DPI组(12.96%±2.03%)相比,差异均有统计学意义(均P=0.000),提示NAC或DPI显著降低了成骨细胞凋亡。Nox4的荧光定量PCR显示DEX组Nox4的基因表达是正常对照组的2� 张华峰 白树财 徐倩 李晖 李东 李呈凯 宋秀钢 秦亚飞 马信龙关键词:地塞米松 细胞凋亡 活性氧 NADPH氧化酶 大鼠激素性股骨头坏死模型建立及病理学评价 被引量:4 2008年 目的:建立大鼠激素性股骨头坏死模型,并对使用激素后不同时段大鼠股骨头病理学改变进行观察和评价。方法:4月龄健康Wistar大白鼠36只,雌雄各半,随机分成两组。实验组24只肌肉注射地塞米松磷酸钠(10 mg/kg),每周1次;对照组12只肌肉注射等量的生理盐水,共注射14周。两组均于肌肉注射药物后2、6、8、10、12、14周处死动物,取大白鼠双侧股骨头,HE和Masson染色后,观察股骨头单位面积内骨小梁面积百分率、骨小梁宽度、最大脂肪细胞直径、每高倍镜视野下空泡陷窝数量和单位面积骨小梁内胶原含量。结果:实验组单位面积内骨小梁面积百分率、每高倍镜视野下空泡陷窝数量与对照组比较从2周开始就有显著统计学意义(P<0.01);实验组单位面积骨小梁内胶原含量、骨小梁宽度、最大脂肪细胞直径与对照组比较从6周开始有显著统计学意义(P<0.01)。结论:建立了大鼠激素性股骨头坏死动物模型,其病理学特点表现为全股骨头坏死和修复反应差。 张华峰 马信龙 王志钢 张园 王晨光 马剑雄 王沛关键词:激素 股骨头坏死 病理学 膜联蛋白-5阳性微粒对髋关节骨折患者高凝状态影响的研究 被引量:1 2020年 目的通过分析髋关节骨折患者高凝状态与其外周血中微粒(microparticles,MPs)水平的相关性,探讨清除MPs纠正髋关节骨折患者中高凝状态的可行性。方法2018年12月至2019年9月65例我院骨科急诊收治髋关节骨折患者资料,男24例,女41例;年龄(75.6±9.8)岁(范围:58~95岁)。其中股骨颈骨折27例,转子间骨折38例,术前均摄X线片或行CT扫描确诊。同期健康体检中心健康人群20例作为对照,男8例,女12例;年龄(72.3±6.5)岁(范围:56~81岁)。实验及对照组均在清晨空腹下取2 ml抗凝全血,采用透射电镜和纳米颗粒跟踪分析仪对全血中提纯的微粒进行鉴定;全血差速离心获得无细胞血浆(cell free plasma,CFP)后采用流式细胞仪测定其中膜联蛋白-5(annexin V,AV)阳性MPs和来源于血小板AV+微粒(platelet-derived microparticles,PMPs)的数量及应用凝血和血小板功能分析仪测定凝血酶生成时间(activated clotting time,ACT)评价高凝状态程度,对与高凝状态相关的危险因素进行Logistic回归分析,判断测定MPs水平是否为高凝状态的独立危险因素,并进行相关性分析;最后应用全自动凝血分析仪测定各样本CFP在过滤去除MPs前后的凝血功能。结果电镜下MPs形态呈现囊泡状,具有完整的双层膜结构,大小在100~1000 nm范围内,并且形态不均一,有不规则囊泡状和圆形的囊泡状的大体形态,纳米颗粒跟踪分析仪可以看到髋关节周围骨折患者外周血中MPs大小为(239.7±4.0)nm;对照组MPs分布大小为(247.7±3.3)nm,且二者MPs直径大小差异无统计学意义(P>0.05)。髋关节骨折患者循环AV+MPs计数的平均水平为(564±171)个/μl,PMPs平均(326±104)个/μl,正常人群AV+MPs计数的平均水平为(252±82)个/μl,PMPs平均(192±41)个/μl,两者AV+MPs,PMPs之间的差异均有统计学意义(P<0.05);髋关节骨折患者ACT值平均水平为(324±94)s,而正常人群ACT平均水平为(535±76)s,二者之间的差异有统计学意义(P<0.05) 万鑫 秦亚飞 徐春磊 宋立成 李娜 张华峰 李晖关键词:髋骨折 微粒体 组织学 凝血酶原时间 淫羊藿苷对高重力环境下成骨细胞黏附和细胞骨架的影响 被引量:4 2020年 目的通过高加速度离心加载装置建立高重力加载模型,探讨不同高重力加载环境对成骨细胞黏附及细胞骨架的影响,并且分析淫羊藿苷对高重力加载后细胞黏附和细胞骨架的影响。方法将MC3T3-E1细胞按2×105个/cm2的密度接种于细胞培养皿中。实验共分为6组:对照组、单纯给药组、10 G加载组、10 G给药组、40 G加载组、40 G给药组。加载组应用高加速度离心加载机对细胞施行加载,连续加载3 d,每天30 min。对照组和单纯给药组暴露于正常重力情况下,其余条件与实验组无差别。给药组淫羊藿苷均采用10-7 mol/L浓度,且按预防给药的方法实验。通过茜素红染色、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定、CCK-8细胞增殖实验、细胞骨架鬼笔环肽染色、qPCR和Western Blot等相关分子生物学技术检测淫羊藿苷对高重力环境下成骨细胞integrinα5、integrinβ1和F-actin的影响。结果所有模型均成功制备。茜素红染色:淫羊藿苷可促进成骨细胞钙化结节形成,10 G加载可促进成骨细胞矿化,而40 G加载则抑制成骨细胞的矿化。ALP活性检测:单纯给药组、10 G加载组、40 G加载组的检测OD值分别为0.246、0.331、0.163,与对照组的0.207相比,差异均有统计学意义(P<0.05);10 G给药组和40 G给药组分别为0.373和0.180,与各自加载组的差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8增殖实验:单纯给药组OD值为0.650,与对照组0.551的差异有统计学意义(P=0.031);10 G加载组和40 G加载组OD值分别为1.193和0.245,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05);且10 G给药组和40 G给药组1.300和0.310,与各自加载组的差异有统计学意义(P<0.05)。鬼笔环肽染色:10 G加载细胞促进的数量增加,但细胞形态及骨架未见明显变化,40 G加载则抑制,淫羊藿苷对细胞形态无影响,但对加载损伤后的细胞有一定修复作用。QPCR和Western Blot实验结果一致证实,淫羊藿苷作用后,integrinα 宋立成 张华峰 程威 李娅 李东 秦亚飞 万鑫 李瑞欣 李晖 张西正关键词:成骨细胞 超重力 细胞黏附 细胞骨架 激素性股骨头坏死股骨头内Runx2、Osterix及AJ18的动态表达 被引量:14 2010年 目的研究股骨头坏死股骨头内Runx2(runt-related transcription factor-2)、Osterix及AJ18基因表达和蛋白合成的动态变化。方法Wistar成年大鼠共40只,采用完全随机的方法分为正常对照组10只,模型组30只。模型组动物,按20mg/kg体重剂量交替经大鼠双侧臀大肌肌内注射地塞米松,每周一次;注射地塞米松后放在实验动物跑台上每周训练两次,共8周,诱导大鼠激素性股骨头坏死动物模型。HE染色确定模型诱导成功后,分为模型8、10和12周组,每组10只,按时段提取大鼠股骨头内总RNA及总蛋白,行实时荧光定量PCR及Westernblot检测,研究股骨头内Runx2、Osterix及AJ18基因表达、蛋白合成的动态变化。结果造模8、10、12周时,模型组大鼠股骨头内Runx2和Osterix的基因表达、蛋白合成较对照组减少,两者mRNA的表达量分别为正常组的0.9621、0.3259、0.0512和0.9661、0.2026、0.0194,随时间推移两者的基因表达、蛋白合成呈下降趋势。模型组大鼠股骨头内AJ18的基因表达、蛋白合成较对照组增多,AJ18mRNA的表达在造模后8、10、12周分别为正常组的3.5487、3.6303、3.7576。结论在激素性股骨头坏死发病过程中,糖皮质激素可能通过下调Runx2、OsterixmRNA和上调AJ18mRNA来抑制成骨细胞活性,促进骨吸收,导致骨质疏松和股骨头坏死。 马信龙 刘泽朋 马剑雄 张华峰 张园 王志钢 王涛 杨阳关键词:股骨头坏死 糖皮质激素类 富血小板血浆联合钙化诱导方法对骨髓间充质干细胞增殖和诱导成骨的影响 目的观察富血小板血浆与地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠联合应用对体外培养的MSCs增殖和诱导成骨的影响,探讨此联合诱导方法做为骨组织工程种子细胞来源的可行性。方法应用密度梯度离心联合贴壁筛选法从兔髂骨骨髓中分离、纯化M... 孙晓雷 马信龙 马剑雄 王志刚 张园 张华峰 王涛富血小板血浆联合钙化诱导方法对骨髓间充质干细胞增殖和诱导成骨的影响 2009年 孙晓雷 马信龙 马剑雄 张弢 王志刚 张园 张华峰 王涛关键词:诱导成骨 富血小板血浆 碱性磷酸酶染色 钙化 骨髓间充质干细胞 甘油磷酸 大鼠激素性坏死股骨头Runx2、Osterix表达的变化 被引量:7 2009年 目的:研究大鼠激素性坏死股骨头内Runx2、Osterix基因表达和蛋白合成动态变化,探讨与骨合成代谢的关系。方法:用臀肌注射糖皮质激素和强迫负荷运动的方法制作股骨头坏死大鼠模型,HE染色确定模型诱导成功,提取大鼠股骨头内总RNA及总蛋白,行实时荧光定量PCR及Western blot检测,研究激素性股骨头坏死时股骨头内Runx2、Osterix基因表达、蛋白合成的动态变化。结果:造模8、10、12周时,模型组大鼠股骨头内Runx2和Osterix基因表达、蛋白合成较正常组减少,两者mRNA的表达量分别为正常组的0.9621、0.3259、0.0512和0.9661、0.2026、0.0194倍,且随时间推移两者的基因表达、蛋白合成呈下降趋势。结论:激素性股骨头坏死早期,股骨头内Runx2、Osterix mRNA表达和蛋白合成降低,抑制骨形成。 刘泽朋 马信龙 马剑雄 张华峰 张园关键词:股骨头坏死 RUNX2 OSTERIX