张小勇
- 作品数：12 被引量：18H指数：2
- 供职机构：北京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 干细胞移植治疗心肌梗死
- 黎健张小勇
- 干细胞移植治疗心肌梗死
- 心肌梗死是由于冠状动脉闭塞导致心脏血流供应中断而形成的以心肌细胞坏死为特征的疾病。心肌细胞是终末分化细胞,故心肌损伤后不能通过细胞再生获得修复。细胞心肌成形术(cellular cardiomyoplasty,CCM)通...
- 黎健张小勇
- 心肌梗死的干细胞治疗(英文)被引量：7
- 2007年
- 目的:认识国内外在干细胞移植治疗心肌梗死方面的研究现状。资料来源:检索Medline数据库1998-01/2005-12有关干细胞移植治疗心肌梗死的文章,检索词为"stem cells,myocardial infarction,celltransplantation",限定语言种类为英语。资料选择:对资料进行初筛,选择与干细胞移植治疗心肌梗死相关的文章,去除重复性研究和综述类文章。资料提炼:共收集到相关文章106篇,最终纳入30篇,去除76篇。资料综合:心肌梗死是由于冠状动脉闭塞导致心脏血流供应中断而形成的以心肌细胞坏死为特征的疾病。细胞心肌成形术是在干细胞研究的基础上应运而生的,通过干细胞移植促进心肌细胞再生,防止心室重构和改善心脏功能。目前国内外已尝试应用多种类型的干细胞移植治疗心肌梗死,包括骨骼肌卫星细胞、胚胎干细胞和骨髓干细胞等。虽然还有许多尚待解决的问题,但是动物实验乃至临床研究结果都展现了干细胞移植治疗心肌梗死的广阔前景。结论:干细胞移植为治疗心肌梗死提供了一种很有潜力的新手段,但要真正用于临床还需要解决一些应用中的关键问题。
- 张小勇黎健
- 关键词：干细胞心肌梗死细胞移植
- 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4源性活性氧过量产生抑制胚胎干细胞向心肌细胞的分化(英文)
- 2007年
- 背景:作为信号传导通路中的第二信使,活性氧(主要指超氧离子和过氧化氢)对细胞的生长、分化起重要作用。过量的活性氧在心脏疾病中启动了心肌细胞的凋亡,尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4源性活性氧的过量产生诱导凋亡是否抑制了胚胎干细胞向心肌细胞的分化。目的:探讨尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4活性氧对心肌细胞分化的抑制作用。设计:随机对照实验观察。单位:卫生部北京医院老年医学研究所。材料:胚胎干细胞CGR8为本实验室自存,其他主要试剂除特别注明均购自Sigma公司。方法:实验于2003-10/2005-08在卫生部北京医院老年医学研究所进行。①将小鼠胚胎干细胞分化成胚小体。在分化4d后以不同浓度的过氧化氢(1,10,100,1000nmol/L)处理胚小体1h,在分化8d后观察心肌细胞的生成,分析活性氧对心肌细胞分化的影响。②将pcDNA3.1和pcDNA3.1-NOX4质粒分别转染CGR8细胞,同时以未进行转染的CGR8细胞为对照,以RT-PCR和WesternBlotting测定尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4mRNA和MLC2v蛋白水平,应用定量四唑氮蓝高水平表达尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4干细胞中活性氧水平。③采用活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(5mmol/L)和过氧化氢酶(200U/mL)转染前处理2h作为对照,用Hoechst染色、TUNEL和DNAladder分析尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4过表达后CGR8细胞凋亡情况,同时检测转染尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶氧化酶4后CGR8细胞中p21、p53及Bcl-2的表达。主要观察指标:①活性氧对心肌细胞分化的影响。②胚胎干细胞中尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的表达。③尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4过表达后活性氧产生量、心肌细胞的分化和胚胎干细胞凋亡的观察。④p53,p21和Bcl-2是否参与了尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4过表达诱导的细胞�
- 张小勇国汉邦黎健
- 关键词：活性氧NADPH氧化酶胚胎干细胞
- NADPH氧化酶在心肌细胞分化中的作用
- 胚胎干细胞具有多潜能性，能分化成许多种类的细胞，包括心肌细胞。因此，胚胎干细胞为研究特定细胞的分化提供了一个十分有用的工具。应用胚胎干细胞作为细胞模型探讨信号传导通路中的第二信使，如活性氧(reactiVe oxygen...
- 张小勇黎健
- 关键词：NADPH氧化酶心肌细胞定向分化体外诱导信号传导通路
- 文献传递
- HDL抑制人脐静脉内皮细胞NADPH氧化酶4表达和活性氧生成被引量：1
- 2008年
- 目的分析HDL对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)内NAD-PH氧化酶4(NADPH oxidase4,NOX4)及其亚组分p22phox、p67phox、Rac1与活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的影响,研究HDL对LDL的拮抗作用。方法用Ⅱ型胶原酶消化法分离培养HUVEC;用RT-PCR、Western印迹观察NOX4、p22phox、p67phox、Rac1表达的变化;用流式细胞仪检测细胞内ROS的变化。结果HDL处理HUVEC能下调NOX4和p67phox mRNA和蛋白水平,但不影响p22phox和Rac1的表达。高浓度LDL刺激HUVEC时,NOX4表达上调,细胞内ROS生成增加,但p22phox、p67phox和Rac1的表达没有明显变化。用HDL预处理再加高浓度LDL刺激时,NOX4表达下调,ROS生成量减少;结论HDL可通过下调HUVEC NOX4表达降低ROS水平。
- 王蕾国汉邦张小勇屈顺林丁莉满永王抒黎健
- 关键词：活性氧人脐静脉内皮细胞高密度脂蛋白
- 心脏特异的转录因子在胚胎干细胞分化为心肌细胞中的作用被引量：2
- 2008年
- 胚胎干细胞在没有白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的条件下培养时可以分化成心肌细胞,这些细胞表达一些收缩蛋白,如肌浆球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)和肌球蛋白轻链-2V(ventricular myosin light chain,MLC2V)。很多研究者进一步从转录因子的角度研究了控制心脏发育的转录因子在胚胎干细胞向心肌细胞分化过程中的表达,结果表明心脏转录因子GATA4、肌细胞增强因子2C(myocyte-specific enhancer factor 2C,MEF2C)和NKx2.5控制着心脏相关基因的表达,它们在心脏发生进程中发挥重要的转录调控作用。研究同时发现多条信号通路参与了心肌细胞分化的调节。此外,纯化胚胎干细胞源性心肌细胞用于治疗心肌梗塞亦是一个关键问题。然而,胚胎细胞向心肌细胞分化的分子机理还有待进一步研究。
- 张小勇黎健
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞分化
- 高糖上调内皮细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的作用机制
- 2010年
- 目的探讨高糖上调内皮细胞间黏附分子1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达的作用机制。方法高浓度葡萄糖（20mmol／L）处理分离培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs），以2′-7′-二氯荧光素双醋酸盐（DCFH—DA）标记流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）。Western blot分析细胞内抑制性蛋白κB（IκB）和核转录因子-κB（NF—κB）蛋白表达和磷酸化水平。免疫荧光法检测NF—κB的活化。结果高糖处理HUVECs后，伴随ROS的显著升高，IκB蛋白明显下调，磷酸化的IκB和NF—κB均增多，使NF—κB移位至细胞核内，导致ICAM-1、VCAM-1的表达明显增强。结论高糖通过刺激ROS的产生和NF—κB的活化上调内皮细胞ICAM-1和VCAM-1黏附因子的表达。
- 农善伟柯丽琴张小勇黄秀清满永王抒黎健宁应之
- 关键词：细胞黏附分子
- NADPH氧化酶源性活性氧在糖尿病及其血管并发症发生中的作用机制
- 2型糖尿病的发病机制为胰岛素抵抗和胰岛素分泌受损，最新的研究结果显示,氧化应激在糖尿病及其并发症的发病机制中起重要作用。在高游离脂肪酸(FFA)条件下,由于活性氧(ROS)产生过多引起的氧化应激可造成胰岛素抵抗和胰岛β细...
- 黎健高丹李兰芳原慧萍李淼张小勇
- 关键词：糖尿病活性氧NADPH氧化酶
- 文献传递
- 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4在心肌细胞分化中的作用
- 2006年
- 目的探讨尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4在心肌细胞分化中的作用。方法用核糖酶技术获得尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4低表达小鼠胚胎干细胞克隆,将小鼠胚胎干细胞分化为胚小体。应用荧光染料2,7二氯氢化荧光素二酯和定量氮蓝四唑试验检测活性氧水平;逆转录聚合酶链反应和Western blot测定尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶mRNA水平和心室肌肌球蛋白轻链2蛋白表达水平;DNA laddering检测细胞凋亡;原位杂交分析尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4在胚胎心脏中的表达。结果活性氧清除剂N乙酰基半胱氨酸、过氧化氢酶和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶抑制剂二甲苯基碘可抑制胚胎干细胞分化成心肌细胞,而较低浓度(1nmol/L^100nmol/L)的过氧化氢可明显促进心肌细胞分化,但较高浓度(1μmol/L)的过氧化氢显示出抑制作用(P<0.001)。实验发现,心肌细胞分化过程中内源性活性氧的产生主要来自尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4。应用核糖酶技术抑制胚胎干细胞中尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4的表达,可引起活性氧水平下降(P<0.001),肌球蛋白轻链2含量显著降低,使心肌细胞的分化受到明显的抑制(P<0.001)。尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4的高水平表达使干细胞产生大量活性氧,也显著抑制心肌细胞的分化(P<0.05)。结论尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4通过产生活性氧在心肌细胞分化中起关键作用。
- 张小勇唐蔚青国汉邦Michael StouffsMarisa Jaconi黎健
- 关键词：病理学与病理生理学尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶活性氧胚胎干细胞心肌细胞
