张敏
- 作品数：9 被引量：11H指数：1
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰下调高血压相关基因SLC7a8
- 目的通过RNA干扰(RNAi)技术选择性下凋大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)高血压相关基因SLC7a8的表达,探讨该基因在高血压发病机制中的作用。方法设计并合成3个针对大鼠SLC7a8基因的特异性siRNA片段(si...
- 杨德业张敏黄晓燕周希施翔翔黄芳张怀勤
- 文献传递
- siRNA干扰SLC7a8对NRK-52E细胞摄取左旋多巴的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:通过RNA干扰(RNAi)技术选择性下调高血压相关基因SLC7a8的表达,探讨对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)摄取左旋多巴的影响。方法:设计并合成3个针对大鼠SLC7a8基因的特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3),以含非特异性编码序列的siRNA-con为对照。将上述3个片段及阴性对照通过阳离子脂质体法转染至NRK-52E内,通过流式细胞仪估算转染效率后经RT-PCR初步筛选高效率干扰片段,用Western blotting检测蛋白水平的干扰效率,采用紫外分光光度法检测空白对照组(blank)、siRNA-con转染组和SLC7a8基因特异性沉默组不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120min)NRK-52E内左旋多巴的浓度。结果:流式细胞仪测定siRNA转染NRK-52E效率为94%,RT-PCR初步筛选结果显示siRNA-1、3干扰效率较高,Western blotting检测显示siRNA-3组在蛋白水平的干扰效率较高,而对照组siRNA-con与空白对照组(blank)的SLC7a8表达差异不明显。通过紫外分光光度法检测NRK-52E对左旋多巴的吸收结果显示干扰组不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120min)细胞内左旋多巴浓度均低于siRNA-con转染组和空白对照组;对照组siRNA-con与空白对照组相比则无明显差异。结论:RNA干扰技术能选择性下调大鼠肾小管上皮细胞SLC7a8的表达水平;SLC7a8基因特异沉默后NRK-52E对左旋多巴的摄取在各个不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120min)均降低。
- 张敏黄晓燕周希施翔翔黄芳张怀勤杨德业
- 关键词：RNA干扰肾小管上皮细胞左旋多巴
- Pax-8基因在大鼠心肌细胞凋亡中的作用被引量：10
- 2009年
- 目的用RNA干扰技术选择性下调大鼠心肌细胞中转录因子Pax-8的表达,观察其对心肌细胞凋亡和增殖的影响。方法将H9C2(2-1)大鼠胚胎心肌细胞分为3组:针对Pax-8基因的小干扰RNA(Pax-8 siRNA)组,非特异性siRNA(NCsiRNA)组和空白对照组。前两组分别给予相应siRNA(5μl)和Lipofectamine 2000(5μl)配制成的siRNA-脂质体复合物溶液,空白对照组给予等量的细胞培养基。采用RT-PCR和Western blotting测定Pax-8的mRNA和蛋白质表达,荧光光度法检测半胱天冬酶(Caspase)-3活性以反映细胞凋亡,CCK-8法检验细胞的增殖抑制率。结果与NCsiRNA组和空白对照组比较,Pax-8 siRNA组的Pax-8 mRNA表达分别下调60.30%(P<0.05)和63.09%(P<0.05),蛋白表达分别下调50.38%(P<0.05)和54.17%(P<0.05),而NCsiRNA组与空白对照组间无显著差异(P>0.05)。Pax-8 siRNA组的Caspase-3活性较NCsiRNA组和空白对照组明显升高(P<0.01),而后两者间无显著差异(P>0.05)。Pax-8 siRNA组的细胞增殖抑制率明显高于NCsiRNA组(P<0.01)。结论Pax-8 siRNA能选择性下调心肌细胞中Pax-8的表达,并促进细胞凋亡、抑制细胞增殖。
- 高瞻来丹丹张敏周希黄芳黄晓燕张怀勤杨德业
- 关键词：肌细胞心脏细胞凋亡RNA干扰室间隔缺损
- SiRNA特异性沉默高血压相关基因FXYD5及其功能研究
- 目的通过RNA干扰(RNAi)技术特异性沉默大鼠高血压相关基因FXYD5的表达,探索该基因在高血压发病机制中的作用。方法化学合成针对大鼠FXYD5基因的4个特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA...
- 杨德业施翔翔来丹丹高瞻张敏黄晓燕张怀勤
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- SiRNA特异性沉默高血压相关基因FXYD5及其功能研究
- 目的:通过RNA干扰(RNAi)技术特异性沉默大鼠高血压相关基因FXYD5的表达,探索该基因在高血压发病机制中的作用。方法:化学合成针对大鼠FXYD5基因的4个特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siR...
- 杨德业施翔翔来丹丹高瞻张敏黄晓燕张怀勤
- 关键词：高血压平滑肌细胞RNA干扰
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- SiRNA特异性沉默高血压相关基因FXYD5及其功能研究
- 目的通过RNA干扰(RNAi)技术特异性沉默大鼠高血压相关基因FXYD5的表达,探索该基因在高血压发病机制中的作用。方法化学合成针对大鼠FXYD5基因的4个特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA...
- 杨德业施翔翔来丹丹高瞻张敏黄晓燕张怀勤
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- RNA干扰下调高血压相关基因SLC7a8的研究
- 杨德业张敏黄晓燕周希施翔翔黄芳
- 转录因子Pax-8基因在大鼠心肌细胞凋亡中的作用研究
- ＜正＞室间隔缺损（ventricular septum defect,VSD）是常见的先天性心脏病。至今对其致病因素及发病机理仍然知之甚少。根据近年的研究,骨形态形成蛋白受体IA（ALK3）是一个在室间隔形成过程中十分重...
- 杨德业高瞻来丹丹张敏周希黄芳黄晓燕张怀勤
- 文献传递
- SiRNA特异性沉默高血压相关基因FXYD5及其功能研究
- ＜正＞高血压病是老年人最常见的心血管疾病之一,也是导致脑血管意外、冠状动脉疾病、外周血管疾病和进行性肾脏损害的重要独立危险因素。根据2004年卫生部公布的"中国居民营养与健康状况调查"资料,我国18岁以上居民高血压患病率...
- 杨德业施翔翔来丹丹高瞻张敏黄晓燕张怀勤
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