张涛
- 作品数：9 被引量：56H指数：5
- 供职机构：吉林农业大学中药材学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金吉林省重大科技成果转化项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 干旱胁迫对防风叶片保护酶活性、渗透调节物质含量及药材品质的影响被引量：26
- 2016年
- 【目的】探讨干旱条件下防风Saposhnikovia divaricata保护酶系统与防风适应干旱的生理机制。【方法】以1年生防风为材料,设置3个梯度的水分供给,包括充分供水对照(CK)、轻度干旱胁迫(LD)和重度干旱胁迫(SD)处理,研究干旱胁迫对防风叶片保护酶活性、渗透调节物质含量及2种色原酮(升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷)总含量的影响。【结果】试验初期,不同处理下超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和脯氨酸含量均呈增加趋势,在中期达到最高值后开始呈现下降趋势。不同处理下丙二醛含量在整个试验期持续上升。试验初期,各处理2种色原酮总含量均迅速增加,LD和SD处理在试验中期达到峰值,随后开始下降,而CK处理在试验中期和后期平缓上升。LD和SD处理的3种酶活性、渗透调节物质含量及2种色原酮总含量变化幅度大于CK,且LD和SD处理各项指标的峰值均大于CK的相应数值。各水分处理下CAT活性、2种色原酮总含量分别与SOD活性显著相关。【结论】在防风栽培过程中,适当施加干旱胁迫可促进叶片保护酶活性、渗透调节物质含量的提高,有利于防风植株健壮生长并最终提高2种色原酮的含量。
- 韩忠明胥苗苗王云贺张涛韩梅杨利民
- 关键词：防风干旱胁迫保护酶脯氨酸色原酮
- 人参CYP716A53v2基因表达量及皂苷含量与生态因子相关性研究
- 目的 进一步揭示人参皂苷合成的生理生态机制,为阐明人参皂苷的生物合成奠定基础.方法 利用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定五年生人参根中皂苷含量;Real-time PCR 法测定CYP716A53v2 基因表达量;便携...
- 张涛杨利民韩梅
- 关键词：人参皂苷高效液相生态因子
- 人参叶片中人参皂苷含量、关键酶基因表达和生态因子的相关性分析被引量：8
- 2018年
- 【目的】明确人参皂苷生物合成的生理生态机制,揭示生态因子和遗传因素与药材质量的关系。【方法】以4年生不同生长时期的人参叶为试验材料,用HPLC法测定人参叶中8种单体人参皂苷(Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc和Rd)含量;实时荧光定量PCR法测定7个参与人参皂苷合成的关键酶基因(HMGR、FPS、SS、SE、DS、β-AS和CYP716A47)的表达量;通过相关性和灰色关联度分析生态因子和人参皂苷合成关键酶表达对人参叶中皂苷合成和积累的影响。【结果】7月13日—9月29日人参皂苷合成关键酶基因表达活跃,各个关键酶之间有协同增减的趋势;人参叶中单体皂苷含量最高的是Re和Rg_1,在果后参根生长期(8月31日—9月13日)分别达到最大值60.30和39.38 mg·g^(-1);温度、光合有效辐射、土壤水势、相对湿度与叶中人参皂苷含量显著相关(P<0.05);人参叶中HMGR基因的表达与Rb_2含量显著负相关(P<0.05),SS基因的表达与Rg_1、Re含量显著负相关(P<0.05),β-AS基因的表达分别与Rc、Rb_2含量呈显著(P<0.05)、极显著(P<0.01)负相关;温度、光合有效辐射、土壤水势和相对湿度与人参皂苷含量灰色关联度较高,达到0.727 9~0.871 1。【结论】在生态因子调控下,人参皂苷合成关键酶基因的表达影响人参皂苷的合成与积累。
- 杨林林张涛杨利民韩梅
- 关键词：人参生态因子人参皂苷基因表达
- 人参总RNA提取方法及反转录酶的比较被引量：6
- 2015年
- 为了探索人参根、叶片总RNA的提取方法,以多年生人参根、叶片为材料,比较7种提取方法的总RNA质量。结果表明:除改良CTAB法对人参根总RNA的提取效果不明显,其余方法均能从人参根、叶片中提取、分离到总RNA,其中RNAPure高纯总RNA快速提取试剂盒法能提取到完整性较好、纯度较高的总RNA,琼脂糖凝胶电泳显示的条带清晰完整,根中RNA的D260 nm/D280 nm为1.87,RNA浓度为351.8 ng/μL;用Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)试剂盒、Prime Script Reverse Transcriptase试剂盒、Go ScriptTMReverse Transcription System试剂盒对提取的总RNA进行反转录,其中用Go ScriptTMReverse Transcription System试剂盒反转录后进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳条带较亮,证明转录效果较好。经反转录、PCR证明,提取的总RNA适用于后续的分子试验研究。
- 张涛韩梅刘翠晶胥苗苗
- 关键词：人参叶片总RNA反转录酶
- 聚乙二醇胁迫对人参愈伤组织皂苷合成及关键酶基因表达量的影响被引量：1
- 2020年
- 探究聚乙二醇(PEG)模拟干旱胁迫对人参愈伤组织的生长、皂苷合成关键酶基因表达量与皂苷含量的影响,从基因水平揭示人参皂苷合成对水分的响应。试验以人参愈伤组织为材料,通过添加不同浓度PEG(0、10%、20%、30%)模拟干旱环境,测定不同胁迫程度下愈伤组织的生长量,单体皂苷Rg1、Re含量,并以GAPDH为内参基因,实时荧光定量PCR分析人参皂苷合成途径中4个关键酶基因HMGR、DS、CYP716A52v2、CYP716A53v2表达量。结果表明:PEG浓度越高对愈伤组织鲜重的抑制作用越明显,干重则相反。短时间内一定程度干旱胁迫对人参皂苷合成具有促进作用,10%、20%PEG处理分别促进皂苷Re、Rg1的合成;各基因表达量结果显示,4个关键酶基因的表达在不同处理下均呈现不同程度的上调,10%处理使HMGR、DS基因表达量上调(P<0.05);其中DS基因在10%处理下表达量最高(P<0.05),第25天时达最大值,是ck组的6.52倍。CYP716A52v2基因在10%处理时25 d达最大值;30%处理组在5 d时与对照比促进了CYP716A53v2基因表达量,5 d时达最大值,是ck组的5.83倍。PEG模拟干旱胁迫时可激活次生代谢合成途径中多个关键酶基因协同表达,从而有效启动人参皂苷生物合成途径,影响人参皂苷的合成与积累。
- 高岩张涛杨利民马秀杰韩梅
- 关键词：人参愈伤组织人参皂苷实时荧光定量基因表达量
- 生态因子对人参皂苷合成及其关键酶基因表达的影响被引量：8
- 2017年
- 目的研究生态因子和人参皂苷合成关键酶表达对人参皂苷合成、积累的影响。方法以人工栽培的4年生人参为研究对象,用实时荧光定量PCR法对在不同生长时期根组织中8个关键酶基因(HMGR、FPS、SS、SE、DS、β-AS、CYP82D47、CYP716A47)表达量进行测定;采用HPLC法测定根中8种单体皂苷(人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc、Rd)的量;以小型气象站对人参样地气象数据进行采集;采用SPSS软件进行相关性分析。结果人参皂苷合成关键酶基因在人参皂苷积累的重要时期(开花期至果熟期)的表达高于果后参根生长期和枯萎期,人参皂苷合成关键酶基因的表达相互影响,协同增减,人参根组织中关键酶基因的表达对人参皂苷积累多表现出了正相关关系;人参根中人参皂苷Rg_1、Rb_1、Re、Rc量较高,8种单体皂苷量动态变化趋势并不相同;温度、光合有效辐射、土壤水势是影响根部人参皂苷合成的重要生态因子,温度与人参皂苷Rb_1、Rd显著负相关(P<0.05),光合有效辐射对人参皂苷Rg_1的生成有显著的促进作用(P<0.05),土壤水势与人参皂苷Rb_1显著负相关(P<0.05);灰色关联度分析结果表明温度、光合有效辐射、相对湿度是影响人参皂苷量的主导生态因子,人参皂苷合成关键酶基因的表达是次要因子,在生态因子主导下人参皂苷合成关键酶基因调控人参皂苷的合成与积累。生态因子与关键酶基因的表达共同调控了人参皂苷的合成,对人参皂苷的积累有重要影响。结论明确了人参皂苷合成关键酶基因表达和人参皂苷量在人参中的动态变化,为人参皂苷合成生理生态机制的明晰及对人参药材质量的调控提供了理论依据。
- 杨林林张涛杨利民韩梅
- 关键词：人参人参皂苷RE人参皂苷RB1人参皂苷RB3人参皂苷RD生态因子
- 人参CYP716A53v2基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2016年
- 研究人参皂苷生物合成途径中的影响因子。以五年生人参根组织为试验材料,提取总RNA,反转录合成c DNA的第1条链,利用PCR法对人参中的原人参三醇合成酶(CYP716A53v2)基因的c DNA进行克隆及序列分析。获得CYP716A53v2基因全长片段为1 506 bp,开放阅读框长1 410 bp,编码470个氨基酸多肽。生物信息学分析显示,CYP716A53v2基因编码蛋白质不含跨膜区域。说明CYP716A53v2基因与其他植物氨基酸序列具有较高同源性,其中与人参、西洋参、三七同源性分别为99%、98%、98%。
- 张涛韩梅刘翠晶
- 关键词：人参皂苷基因克隆
- 药用植物萜类生物合成β-AS基因研究进展
- 2016年
- 药用植物中萜类次生代谢产物种类丰富,数量大,现代药理活性突出。β-AS作为萜类成分合成过程中的关键酶,对药用植物萜类活性成分生物合成过程起着至关重要的作用。本文系统阐述β-AS的生物学意义、催化机制、β-AS克隆情况、基因结构以及在重要药用植物中的研究进展。
- 董占梅张涛韩梅
- 关键词：萜类化合物药用植物基因功能
- 人参中人参皂苷生物合成对水分调控的响应及其机制的初步研究被引量：10
- 2019年
- 探究土壤含水量对人参皂苷生物合成的影响,并从抗氧化酶系统和皂苷合成途径关键酶基因表达等角度阐释其机制。以三年生盆栽人参为试验材料,设置3个水分梯度,即饱和含水量的40%(W1),60%(W2),80%(W3),采用HPLC测定11种单体皂苷含量并以GAPDH为内参基因,利用实时荧光定量PCR分析皂苷合成途径中6个关键酶基因(HMGR,SS,β-AS,CYP716A47,CYP716A52v2,CYP716A53v2)表达量,同时对超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)活性和MDA含量进行测定。人参皂苷含量及生物量随土壤含水量的增大呈上升趋势,W3处理最适;PPD(Rb1,Rc,Rb2,Rd,Rh2,Rb3,Rg3),PPT(Rg1,Re,Rf)型人参皂苷,Ro及总皂苷均在8月30日达最大值,分别为9. 92,5. 48,0. 63 mg·g-1。整个调控期间W3抗氧化酶活性大于W1,MDA含量小于W1并且W3处理时β-AS,CYP716A47,CYP716A53v2基因表达量呈上升趋势而HMGR,SS基因在各个水分条件下表达量较稳定。经相关性分析得W3处理组HMGR,SS基因与PPD,PPT型人参皂苷及Ro呈现显著正相关,CYP716A52v2基因与Ro呈显著正相关,CYP716A47基因与PPD型人参皂苷呈极显著正相关;W1,W2处理时β-AS基因与PPD型人参皂苷呈极显著正相关。W3处理为最适水分,人参总皂苷及单体皂苷含量最高,各基因与皂苷含量相关性密切,更利于人参皂苷的积累。
- 高岩张涛亢学平韩梅杨利民
- 关键词：人参皂苷水分调控荧光定量PCR基因表达抗氧化酶系统
