张翠
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:温州医学院附属第一医院更多>>
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- 胰腺癌曲古霉素A耐药细胞株转移相关基因表达的研究
- 2013年
- 该实验旨在探讨曲古霉素A(trichostatin A,TSA)对胰腺癌PANC-1细胞株侵袭转移力的影响。分别通过短时间低浓度TSA(0.1~0.2μmol/L)处理胰腺癌细胞株PANC-1 24 h,以及长期低浓度递增法建立TSA耐药株(PANC-1-TSA)。采用CCK8(cell counting kit-8)测得PANC-1、PANC-1-TSA的IC50分别为(0.51±0.09)μmol/L、(78±5)μmol/L,耐药株耐药指数为153。Transwell侵袭小室实验显示,0.1μmol/LTSA处理后,胰腺癌PANC-1细胞侵袭力未见明显改变,而耐药株PANC-1-TSA侵袭力较亲本株明显增强。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果显示,耐药株PANC-1-TSA转移相关基因MMP1/2/7/9/14/15及TIMP1/2 mRNA的表达均明显上升,尤以MMPs mRNA明显。在倒置显微镜观察到耐药细胞形态上发生上皮型向间叶型转化(epithelial mesenchymal transition,EMT),进一步通过RT-qPCR及蛋白免疫印迹(Western blot)实验证实耐药株发生EMT,其中上皮型标志物表达下降及间叶型标志物表达上升。该实验显示,耐药细胞株PANC-1-TSA侵袭力增强,侵袭、转移相关基因表达明显增加。耐药株形成的过程中,发生上皮–间叶转化(EMT),EMT可能参与了胰腺癌PANC-1-TSA细胞株侵袭能力的增强。
- 刘彪陈孝倩张翠王本泉白永恒王斯璐金嵘周蒙滔陈必成
- 关键词:胰腺癌