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张锦海: 作品数：90 被引量：235H指数：8; 供职机构：南京军区疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项江苏省科技支撑计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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某部2007—2016年恙虫病发病情况分析被引量：2: 2018年; 某部2007—2016年共报告恙虫病240例,无死亡病例。其中83. 75%病例为临床诊断病例; 90. 83%的病例集中出现在6—11月; 95%的病例发病年龄为30岁以下的年轻人为主,89. 17%为战士。据此,建议野外执勤和训练时加强个人防护,防恙螨叮咬,高发季节对营区进行除草和灭杀恙螨,降低恙虫病对部队官兵健康的危害。; 韩一芳史富全操敏谭伟龙张锦海王长军; 关键词：恙虫病

高致病性猪链球菌2型多重荧光PCR检测方法建立: 朱静张锦海胡丹石洁张先云李先富潘秀珍王长军

2型猪链球菌89K毒力岛Ⅳ型分泌系统LAMP检测方法的建立被引量：11: 2014年; 目的建立针对高致病性2型猪链球菌（Streptococcus suis 2，SS2）89K毒力岛Ⅳ型分泌系统的环介导等温扩增（100p-mediated isothermal amplification，LAMP）方法。方法根据国内流行株特有89K毒力岛编码的Ⅳ型分泌系统（T4SS-89K）的virB4-89K基因保守区域设计并合成LAMP引物，通过优化反应体系和扩增条件建立T4SS-89K快速检测方法，对方法的特异性、敏感性进行评估。结果优化的LAMP反应体系具有良好的扩增效率，检测灵敏度为1．53×10^-1拷贝／反应，全部扩增检测可在60rain内完成；建立的LAMP法具有良好的特异性，与不含T4SS-89K的猪链球菌（包括1／2型、1型、3-33型），以及其他常见9种对照菌均不发生特异性扩增，而与1998和2005年疫情现场分离的高致病性SS2均可发生特异性扩增。结论建立的LAMP方法具有特异、灵敏，设备要求简单等特点，可用于高致病性SS2快速检测。; 张凤玉胡丹吕恒张锦海郝丽娜龚秀芳操敏郑峰耿美玲朱进李丙军潘秀珍王长军

用于以RT-LAMP法检测肾综合征出血热病毒的引物、试剂盒、检测方法: 本发明涉及一种用于以RT-LAMP法检测肾综合征出血热病毒的引物、试剂盒、检测方法。该引物包括HTNV引物组和SEOV引物组，两引物组分别包括外引物对，内引物对，以及环引物对，其序列如SEQ？ID？NO:3-14所示。该...; 王长军胡丹张锦海郝丽娜吕恒谭维国; 文献传递

检测炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌多重实时荧光PCR的引物、探针序列及方法: 本发明涉及一种检测炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌多重实时荧光PCR的引物、探针序列及方法，该引物、探针序列包括炭疽杆菌、鼠疫耶尔森菌及嗜肺军团菌引物探针序列集；该方法的步骤包括选取引物对和探针、制备目标基因的质粒标准...; 王长军张锦海邓小昭王忠灿; 文献传递

检测肠产毒性大肠埃希菌GM_1-ELISA方法的建立: 2005年; 李波张锦海; 关键词：GM1 大肠埃希菌 ELISA方法 LTA 产毒 B亚单位

人锰超氧化物歧化酶基因的克隆及高表达被引量：4: 2002年; 为获得高表达人锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的工程菌。从肿瘤组织中提取总RNA ,利用逆转录聚合酶链反应扩增人MnSOD的cDNA ,将克隆的基因片段插入表达载体pET2 8a(+ )内的NcoI/EcoRI位点 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ,用PCR及SDS -PAGE的方法筛选高表达人MnSOD的工程菌。结果构建成功高表达人MnSOD的工程菌 ,表达的人MnSOD相对分子质量约为 2 2 0 0 0 ,表达量约占菌体蛋白的 3 0 %。为大量制备人MnSOD和进一步的应用研究奠定了基础。; 陶开华张锦海李越希; 关键词：锰超氧化物歧化酶基因克隆基因表达

HLA-DPA1/B1基因多态性与丙型肝炎病毒易感性和感染转归的关联研究被引量：5: 2016年; 目的探讨江苏地区有偿献血高危人群白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-DP A1/B1基因多态性与丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染转归的关联性。方法采用病例-对照(慢性丙型肝炎患者258人,自限清除者170人,健康对照者320人)研究,通过聚合酶链反应序列为基础的基因分型(polymerase chain reaction-sequence based genotyping,PCR-SBT)技术对3组人群HLA-DPA1/B1等位基因进行分析,并比较各等位基因频率。结果 HCV感染组的HLA-DPA1*0103与HLA-DPB1*0201等位基因频率高于健康对照组(40.7%vs32.2%,P=0.003)(22.0%vs 12.5%,P<0.001)。HCV持续感染组的HLA-DPA1*0201与HLA-DPB1*1401等位基因频率低于自限清除组(7.9%vs 13.8%,P=0.018)(0.0%vs 2.1%,P=0.015)。HLA-DPA1/B1单倍型分析发现,HCV感染组的DPB1*0501-DPA1*0103和DPB1*0201-DPA1*0103单倍型频率高于健康对照组(P<0.001)。而HCV感染组单倍型DPB1*0202-DPA1*0202的频率低于健康对照组(P<0.001)。HCV持续感染组的单倍型DPB1*0202-DPA1*0202的基因频率高于HCV自限清除组(P=0.004)。HCV持续感染组DPB1*0402-DPA1*0103单倍型频率又低于HCV自限清除组(P=0.008)。结论在江苏地区有偿献血高危人群中,HCV感染转归与HLA-DPA1/B1基因多态性之间存在一定关联性。; 裴家平季晓伟蒋龙凤邓小昭徐孝东肖雯丁伟良张锦海王长军朱丹燕李丙军; 关键词：肝炎病毒属 HLA抗原基因频率

H5N1禽流感病毒基因重组质粒PGEM-HA-NA-M的构建及应用: 目的：构建一种含H5N1禽流感病毒全长HA/NA/M基因的重组质粒,并为病原学检测提供阳性定量标准品。方法：设计H5N1禽流感病毒HA、NA及M抗原基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H5N1禽流感病毒总RNA后用RT-P...; 张锦海吕恒王长军鲁娟东顾海涛王平; 关键词：禽流感病毒血凝素神经氨酸酶基质蛋白; 文献传递

乙型肝炎病毒环介导等温扩增检测法的建立被引量：9: 2016年; 目的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是近年来发展起来的一种新型核酸扩增技术,文中旨在建立一种LAMP方法用于乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的快速检测。方法利用在线引物设计软件,针对B型和C型HBV基因序列的相对保守区域,设计LAMP引物、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)引物和探针序列。采用羟基萘酚蓝作为显色剂,优化反应条件,分别建立HBV的可视化LAMP反应体系和q PCR反应体系。反应体系中酶量为1.5μL、反应温度为65℃为LAMP扩增的最佳条件。用2种方法同时检测临床样本(96例乙型肝炎患者、5例丙型肝炎患者、5例获得性免疫缺陷综合症患者及50例健康对照样本的血清核酸),以q PCR检测结果为金标准,评价可视化LAMP方法诊断HBV的敏感性和特异性。结果建立的LAMP方法和q PCR方法最低可检测到10 copies/μL。96例乙型肝炎患者中,q PCR法共55例扩增阳性,其中LAMP方法共42例阳性,敏感性为76.4%(42/55);对病毒滴度高于102copies/μL和低于102copies/μL样本的检测敏感性分别为96.8%(30/31)和50%(12/24)。LAMP方法可成功检出B型和C型HBV,且不会和其他经血传播的病毒发生交叉反应,特异性为100%。结论建立的LAMP方法操作简便快捷、结果判读方便,能在1 h内敏感、特异地检测出血清中的HBV,为基层单位筛查HBV提供新的方法。; 邵靓婧张琪徐睿瑶唐慧娴韩一芳张锦海王长军; 关键词：环介导等温扩增乙型肝炎病毒特异性灵敏度

张锦海

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