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一种用于高压密封容器的高稳定性旋转机构: 本发明公开了一种用于高压密封容器的高稳定性旋转机构，属于高压密封容器技术领域，包括旋转手轮和旋转螺杆，旋转手轮具有容置旋转螺杆的容置腔室，旋转螺杆开设有调节腔室，容置腔上开设有第一通孔，调节腔室上开设有第二通孔，第一通孔...; 李大龙徐倩倩张林朱春旭

鸽β-防御素1基因的克隆及其生物学作用鉴定被引量：5: 2014年; 【目的】从鸽子组织中克隆鸽子β-防御素1(AvBD1)基因,在大肠杆菌中表达重组鸽子AvBD1蛋白,测定其生物学特性。【方法】应用RT-PCR法从鸽子骨髓组织中扩增鸽子AvBD1基因,采用Real-time PCR法检测该基因在鸽子组织器官中的表达分布。将该基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pProEX-HTa的EcoR I和Xho I双酶切位点上,构建重组表达质粒pProEX-pigeon AvBD1,将重组质粒进行诱导表达;对该重组蛋白进行纯化,通过菌落计数法测定其体外抗菌活性与理化特性。【结果】从鸽子骨髓组织中克隆到鸽子AvBD1基因,其cDNA大小为198 bp,编码65个氨基酸,经序列相似性分析,鸽子AvBD1与鸭AvBD1氨基酸序列相似性最高(81.5%)。鸽子AvBD1主要分布于免疫系统和消化系统组织中。Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明,重组鸽子AvBD1蛋白分子量约8.8 kD,与预期大小一致。该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性。此外,该重组蛋白的溶血活性极低。【结论】从鸽子骨髓组织中克隆到鸽子AvBD1基因,其主要分布在机体的免疫系统和消化系统中。该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白的溶血活性极低。; 李妍妍徐杨张婷婷徐倩倩韩宗玺刘胜旺马得莹; 关键词：重组蛋白抗菌活性

米尔贝肟对犬钩虫的体外作用研究: 犬钩虫(Ancylostoma caninum)是犬胃肠道内最主要的致病性寄生虫之一，同时也是伴侣动物的主要寄生虫，其典型后遗症为消瘦和贫血，持续的慢性感染也会导致死亡。犬钩蚴可感染人类，引起皮蚴游走症，即幼虫移行性匍行...; 徐倩倩李继昌郭时金沈志强; 关键词：体外敏感性

HPLC同时测定野菊花中4种黄酮苷类的含量被引量：7: 2019年; 目的:建立同时测定野菊花中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷、蒙花苷成分含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长:324 nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃。结果:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷、蒙花苷的质量分别在2.296~45.920 ng、0.403~8.064 ng、0.410~8.208 ng、4.296~85.920 ng与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为100.52%,99.38%,98.79%,101.30%,RSD均小于2.0%(n=6)。结论:该分析方法快速、准确、重复好,适用于野菊花黄酮苷类含量测定。; 宋冷梅徐倩倩孙迎东孙迎东李保院郭时金; 关键词：野菊花黄酮苷

PCV2多表位靶向性疫苗仔猪免疫应答及疫苗免疫效力评价: 2020年; 制备猪圆环病毒2型(PCV2)多表位靶向性疫苗探讨其免疫应答类型及对仔猪免疫效力。用参考疫苗和PCV2多表位疫苗免疫21日龄PCV2和PRRSV抗原、抗体双阴性仔猪,流式细胞仪检测外周血T、B细胞含量和Th1/Th2比值,荧光定量RT-PCR检测IL-17、TGF-β及IFN-γ基因转录和ELISA测定IL-2、IL-4和IL-10蛋白表达,以期确定免疫应答类型。通过PCV2抗体效价和仔猪免疫攻毒保护试验评价疫苗免疫效力。结果显示,参考疫苗(A组)和PCV2多表位疫苗(B组)T细胞含量于免疫后7,14 d显著升高;Th1细胞在7~28 d显著升高,而Th2细胞含量无明显变化,使得Th1/Th2比值发生明显偏移,其中B组发生偏移程度较A组轻,表明疫苗免疫发生以Th1为主的T细胞免疫应答。A和B组IL-17和IFN-γ转录水平均显著升高,其中B组在7~14 d达到峰值,显著高于A组,显示B组细胞免疫活化和非特异性反应更强。外周血中IL-2蛋白含量A和B组均有所升高,组间差异不明显;IL-4蛋白含量A组在免疫后35 d明显高于B组,说明A组体液免疫强于B组。TGF-β基因转录水平和IL-10蛋白含量在免疫后无明显变化,显示均未导致免疫抑制的发生。A和B组疫苗均能刺激机体产生抗体,保护仔猪抵御PCV2强毒攻击,但B组疫苗免疫效力高于A组。结果表明,PCV2多表位靶向性疫苗主要刺激Th1介导的细胞免疫应答,激活IL-17和IFN-γ基因转录和IL-2、IL-4蛋白表达,有效保护免疫仔猪抵御PCV2强毒的攻击,具有良好的免疫保护效力。该研究为PCV2新型疫苗的研制和推广应用提供了技术和数据支撑。; 王艳萍王金良王金良徐倩倩谢金文董林徐倩倩; 关键词：仔猪 PCV2 免疫应答

肠致病性大肠杆菌改变肠道上皮细胞极性的研究进展被引量：2: 2019年; 上皮细胞构成了宿主阻止病原微生物入侵机体的生理屏障。细胞间连接,主要是紧密连接,将上皮细胞特殊的顶端和基底外侧膜位点分开,形成极化的上皮细胞,用于维持顶端-基底极性。肠致病性大肠杆菌通过破坏感染位点多种因素导致顶端-基底极性消失,包括上皮细胞屏障结构、黏附和极性蛋白的分布,以及极性复合物。本文主要阐述了紧密连接在维持上皮细胞极性中的作用、肠致病性大肠杆菌对紧密连接的破坏作用、肠致病性大肠杆菌对上皮细胞极性的影响及其作用机制,为肠致病性大肠杆菌作用机制的研究和防御措施提供参考。; 王玉波徐倩倩郭时金郭时金张颖王艳萍沈志强; 关键词：肠致病性大肠杆菌肠道上皮细胞

重组鸡β-防御素12蛋白的原核表达及其生物学特性分析: 2014年; 为探讨鸡β-防御素12(AvBD12)的生物学特性,试验采用RT-PCR方法从鸡脾脏组织中扩增到鸡AvBD12基因,其cDNA大小为198 bp,编码65个氨基酸。将该基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pProex HTa上,进行原核表达。Tricine-SDS-PAGE电泳表明,重组鸡AvBD12融合蛋白分子质量约为14 ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定,结果显示,纯化后的重组鸡AvBD12融合蛋白对金黄色葡萄球菌和兔波氏杆菌有较高抗菌活性,对猪霍乱沙门氏菌和乳酸菌的抗菌活性较弱。高盐浓度对其抗菌活性有显著影响。该重组蛋白对鸡红细胞无显著溶血活性。荧光定量PCR结果表明,AvBD12基因在所测定的15个鸡组织器官中均有表达。; 马得莹徐杨李妍妍徐倩倩张婷婷韩宗玺刘胜旺; 关键词：重组蛋白抗菌活性

清瘟败毒颗粒的急性和亚慢性毒性试验研究被引量：5: 2014年; 在急性毒性试验中,给予试验组小鼠不同浓度的清瘟败毒颗粒水溶液,测定清瘟败毒颗粒的半数致死量和最大耐受量;在亚慢性毒性试验中,试验组大鼠以88,44,22g/(kg·d)的剂量连续经口给药42d,并另设灌服生理盐水对照组,在给药后观察大鼠的生长发育、血液学和血液生化、脏器病理学变化。结果显示,急性毒性试验没能测出清瘟败毒颗粒的半数致死量;小鼠经口灌服受试药物的最大耐受量高于132g/(kg·d);在亚慢性毒性试验期间,各给药组大鼠体重、血液学指标、血液生化指标与对照组比较均无显著性差异。急性毒性试验表明清瘟败毒颗粒无急性毒性;亚慢性毒性试验表明连续口服给药较安全。; 郭时金徐倩倩付石军周春凤王艳萍沈志强; 关键词：急性毒性试验亚慢性毒性试验

重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性被引量：2: 2016年; 【目的】研究重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达并探究其生物学特性。【方法】采用His标签蛋白原核表达系统,将鹅防御素12(Av BD12)基因亚克隆到表达载体p Pro EX-HTa上,构建重组表达质粒。将重组表达质粒转化到大肠杆菌Rosseta感受态中,用IPTG进行诱导表达,并对该重组蛋白进行纯化。进一步采用菌落计数法测定其体外抗菌活性和盐离子稳定性。【结果】经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,诱导表达的鹅Av BD12重组蛋白分子量约为12 k D,大部分以包涵体形式存在。该重组蛋白对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌均具有抗菌活性,高浓度盐离子显著抑制重组蛋白的抗菌活性。此外,该重组蛋白对鸡红细胞没有溶血活性。【结论】该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶解鸡红细胞的活性。; 王秋玲徐倩倩张婷婷赵文钧陈玉秋齐甜铭马得莹; 关键词：重组蛋白抗菌活性

单诺沙星肺靶向脂质体的研究与应用: 李继昌李艳华姜晓文王雪岩徐利刘艳艳盛尊来徐倩倩柳影; 1.简要技术说明：应用脂质体作为药物载体，通过控制脂质体粒径及改变膜成分来提高其对组织的靶向性。采用硫酸胺梯度法与冻结融解法相结合，通过正交试验优化制备工艺，以卵磷脂、胆固醇及硬脂酰胺为主要膜材制备甲磺酸单诺沙星脂质体。...; 关键词：; 关键词：药物制剂抗菌药物

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徐倩倩

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