戴晓红
- 作品数:4 被引量:46H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 分子生物学技术在人欧利希氏体病研究中的应用
- 1997年
- 人欧利希氏体病是一种新被认识的自然疫源性疾病。本文综述了分子生物学技术在人欧利希氏体的分类鉴定、临床样本和蜱媒中病原体的橙测以及在抗原结构分析中的应用。
- 曹务春戴晓红
- 关键词:分子生物学立克次氏体
- 用半套式PCR检测蜱和啮齿动物中查菲埃立克体被引量:15
- 2000年
- 目的 了解福建西北部林区查菲埃立克体 (Ehrlichiachaffeensis)的存在情况。方法 用 16SrRNA基因特异引物进行半套式PCR ,检测从福建武夷山和宁化采集的蜱类及野生动物中的查菲埃立克体DNA ,然后对有代表性的标本的扩增产物进行克隆和序列测定 ,并与GenBank中注册的核苷酸序列进行同源性比较。结果 从该地区的越原血蜱 ,野鼠(褐家鼠、黄毛鼠、黄胸鼠、社鼠、小家鼠 )和野兔的脾脏和 /或血块中均扩增出了查菲埃立克体的特异片段。越原血蜱成蜱 2 40组 (6 16只 ) ,31组阳性 ,最小阳性率 5 0 %。野鼠脾脏标本 39份 ,2 2份阳性。野鼠和野兔血块标本共 35份 ,14份阳性。 390bp的PCR产物经克隆、测序后分析发现其DNA序列与美国查菲埃立克体分离株对应位置一致。结论 福建西北部林区可能存在人单核细胞埃立克体病的自然疫源地。
- 高玉敏张习坦曹务春戴庆华张泮河陈振光戴晓红方立群杨红
- 关键词:查菲埃立克体啮齿动物RRNA
- 福建西北林区人单核细胞埃立克体病分子流行病学调查研究被引量:5
- 2001年
- 目的了解福建西北林区人单核细胞埃立克体病的存在情况。方法评价以查菲埃立克体16S rRNA基因序列高变区构建引物进行的半套式PCR的敏感性和特异性,并用此种半套式PCR技术检测从福建武夷山市和宁化县采集的蜱类、野生动物内脏和血液及人群血液标本中的查菲埃立克体DNA,对有代表性的阳性标本的扩增产物进行克隆和序列测定,并与GenBank中注册的核苷酸序列进行同源性比较。应用以 16S rRNA基因构建的特异和通用引物进行PCR,从越原血蜱及黄毛鼠标本中分段扩增查菲埃立克体DNA,进行克隆和序列测定,分别将其连成完整序列,与已知所有埃立克体及近缘菌的16S rRNA基因序列进行最大同源性比较,用Clustal X(1.8)软件对同源位碱基作聚类分析,应用“Tree View”程序得出遗传发育树图。结果这种半套式PCR检测方法具有很高的特异性,仅能扩增查菲埃立克体DNA,而对其它蜱媒病病原体,如斑点热立克次体、莱姆病螺旋体的DNA及人粒细胞埃立克体病病原体的16S rRNA基因都不能扩增,同时,用有限稀释法以含EC 16S rRNA基因的质粒为模板评价其敏感度,结果显示:最低能检测到4个拷贝的查菲埃立克体DNA。用此半套式PCR法从该地区的越原血蜱、粒形硬蜱,鼠类(褐家鼠、黄毛鼠、黄胸鼠、社鼠、小家鼠)和野兔的脾脏和/或血块中均扩增出了查菲埃立克体的特异DNA片段。检测越原血蜱成蜱283组(659只),25组阳性,最小阳性率为3.8%。粒形硬蜱4只,1只阳性。野鼠脾脏、血块及野兔血块的阳性率分别为 56.4%(22/39)、38.7%(12/31)和18.2%(2/11)。同时检测的其它蜱种、狐狸血块、野猪血块及人血块中均未发现查菲埃立克体DNA。越原血蜱和野鼠代表性标本的390bp的PCR产物经克隆、测序后,发现其DNA序列与美国查菲埃立克体分离株对应位置分别一致和相差一个核苷酸。从越原血蜱和黄毛鼠扩增
- 高玉敏张习坦曹务春戴庆华张泮河陈振光戴晓红方立群杨红
- 关键词:查菲埃立克体野生动物分子流行病学
- PCR检测蜱中查菲埃立克体DNA及其序列分析被引量:33
- 1999年
- 应用从查菲埃立克体16SrRNA基因序列高变区构建的特异引物,进行PCR,检测蜱标本中病原体DNA。结果从云南采集的龟形花蜱、从福建采集的越原血蜱和卵形硬蜱扩增出389bp的特异DNA片段。收集龟形花蜱和越原血蜱的特异PCR产物,通过与T载体连接,进行克隆和序列测定。其DNA序列与美国查菲埃立克体分离株对应位置相差一个核苷酸,与其它种埃立克体的同源性为80.7%~96.1%。这是首次在我国发现埃立克体存在的病原线索。
- 曹务春张泮河张习坦戴晓红许荣满
- 关键词:查菲埃立克体聚合酶链反应