方连玉
- 作品数：11 被引量：103H指数：5
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- 大青杨纤维素合酶PuCesA7基因片段的克隆及序列分析
- 2010年
- 本研究以大青杨叶片总DNA为模板,用已登录的欧洲颤杨PtrCesA7保守序列设计引物,进行TD-PCR扩增并将得到的片段克隆到pMD18-T载体中。测序结果分析表明,片段长2341bp将该基因片段命名为PuCesA7。经BLASTX比对,此片段包含6个编码区,共1248bp,编码416个氨基酸。并与欧洲颤杨的PtrCesA7基因的同源性为98%,证明克隆的片段为纤维素合酶基因。将该片段与GenBank中登录的玉米(Zea mays)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、棉花(Gossypium hirsutum)、欧洲颤杨(Populus tremuloides)、新西兰辐射松(Pinups radiata D.Don)同源纤维素合酶基因序列比对并进行进化树分析。结果表明,大青杨纤维素合酶基因片段均与它们的亲缘关系较远。
- 许雷刘一星方连玉
- 关键词：克隆
- 大青杨纤维素合成酶PuCesA6基因cDNA的克隆及序列分析被引量：5
- 2012年
- 以大青杨总RNA为模板,通过反转录PCR获得纤维素合成酶PuCesA6基因的全长cDNA序列。序列分析结果表明:其cDNA序列全长3 778 bp,开放读码框序列3 264 bp,共编码1 087个氨基酸。PuCesA6基因编码的氨基酸序列具备被子植物纤维素合酶基因的特征:锌指结构域、高变区I(HVR-I)、高变区II(HVR-II)与β-糖苷转移酶有关的保守结构域以及8个跨膜区。通过多氨基酸序列比对发现,与光皮桦BlCesA5相似度最高,为89%;其次是玉米ZmCesA8,相似度为80%,且8类CesA的锌指结构与C末端氨基酸序列高度保守。34种CesA蛋白序列的分子进化分析表明,大青杨PuCesA6蛋白与欧洲颤杨PtrCesA6蛋白亲缘关系最近,相似度达99%;和光皮桦BlCe-sA5、大桉EgCesA6蛋白同聚为一类。
- 许雷刘一星方连玉
- 关键词：克隆
- 15份葡萄种质遗传多样性的SSR分析被引量：25
- 2010年
- 本研究利用SSR标记对15份葡萄种质进行了遗传多样性分析。从30对SSR引物中筛选出11对多态性引物,共扩增出107条带。每对引物可检测到等位位点数为4～22,多态率为75%～100%。根据SSR扩增结果,利用NTSYSpc2.10e软件进行Jaccard相似性系数分析,15份葡萄种质的遗传相似系数在0.20～0.98,平均遗传相似系数为0.398。UPGMA聚类分析结果表明,在遗传相似系数0.29处,15份葡萄材料可分为2大类群。第一类包含7份山葡萄资源,2个山欧杂交品种,第二类包含3个欧亚种品种、2个欧美杂种品种和1个美洲杂种品种。由此可见,山葡萄与欧亚种、美洲杂种的亲缘关系较远,欧亚种与美洲种之间亲缘关系较近。此外,引物Vmc9a2.1、VMC4F3、VMC4A1、Scu14vv分别在欧亚种‘无核白’、‘山葡萄雄株’(雄1-2,雄1-3)、山葡萄‘左山二’、山葡萄‘双丰’扩增出一条特性条带,这为利用SSR标记鉴定葡萄品种或品系提供了基础数据。
- 方连玉王军许雷
- 关键词：葡萄SSR
- 大青杨纤维素合酶PuCesA6全长基因的获得及分析被引量：2
- 2011年
- 为给大青杨纤维素方面的基因改良提供基础,以大青杨叶片总DNA为模板,根据已登录的欧洲颤杨PtrCesA6序列保守区段设计2对引物进行PCR扩增,将得到的2个片段克隆到pMD18-T载体中。测序后拼接2片段,结果显示,该基因全长5 760 bp,与欧洲颤杨的PtrCesA6全长cDNA的相似性为99%,证明克隆的序列为纤维素合酶基因全长序列,将该基因命名为PuCesA6。将该全长序列与GenBank中登录的欧洲颤杨、玉米、拟南芥、棉花、新西兰辐射松、大麦、马铃薯、小麦、百日草各纤维素合酶共34条全长序列进行系统进化树分析。结果表明,PuCesA6和PtrCesA6聚为一类,与其它各类CesA都是分开的,单子叶与双子叶的CesA序列也未分别聚类。
- 许雷刘一星方连玉
- 关键词：克隆
- 欧美山杨杂种无性系在水分胁迫下几种生理指标的无性系间遗传表现
- 该研究以不同的山杨无性系为实验材料,系统研究了水分胁迫下各无性系ABA含量、可溶性蛋白质含量、细胞质膜外渗电导率等几种生理生化的遗传差异,初步探讨了不同胁迫强度对无性系抗逆性的影响.主要研究结果如下:(1)对6个欧美山杨...
- 方连玉
- 关键词：水分胁迫可溶性蛋白质ABA含量
- 文献传递
- 大青杨叶片总RNA的快速提取方法被引量：2
- 2010年
- 目的:寻求快速提取大青杨叶片总RNA的方法。方法:分别用改良CTAB法、改良SDS法、改良TRIzol法及某公司总RNA提取试剂盒提取大青杨叶片总RNA,并用紫外光谱分析、凝胶电泳方法对提取的总RNA进行鉴定。结果:用改良CTAB法和改良TRIzol法能有效地去除蛋白及多糖,提取到的总RNA纯度高,D260nm/D280nm分别为2.05和1.78,RNA的完整程度优于试剂盒法。结论:改良CTAB法为大青杨叶片总RNA的最佳提取方法。
- 许雷刘一星方连玉
- 关键词：RNA提取SDS法CTAB法TRIZOL法
- 硝酸还原酶和可溶性蛋白对红皮云杉种源生长的影响被引量：11
- 2003年
- 以东北林业大学帽儿山实验林场的红皮云杉种源试验林为材料 ,研究硝酸还原酶和可溶性蛋白含量对红皮云杉种源生长的影响。结果表明 :在种群水平上 ,红皮云杉在生长状态、硝酸还原酶活性以及可溶性蛋白含量上都存在着显著的差异 ,而且生长性状与所研究的两个理化指标之间存在显著的正相关 ,即树木体内硝酸还原酶活性高的种源、生长潜力大、蛋白质积累多。这一结果对红皮云杉种群的遗传改良、早期选择具有非常重要的现实意义。
- 王秋玉李凤娟闫绍鹏方连玉
- 关键词：硝酸还原酶可溶性蛋白红皮云杉种质资源生长发育
- 盐胁迫对盐松两种源光合日变化的影响
- 采用盆栽加盐的方式,设置0(CK)、0.25%、0.5%、1%四个盐浓度,研究NaHCO胁迫对盐松两引进种源哈萨克斯坦一号(哈一)和哈萨克斯坦二号(哈二)光合日变化的影响。结果表明:(1)盐胁迫对盐松幼苗光合日变化影响显...
- 方连玉刘桂丰王军许雷
- 关键词：盐胁迫光合作用日变化
- 盐胁迫对欧洲赤松光合作用的影响及耐盐性评价
- 本研究所用的欧洲赤松(Pinus silvestris L.)适应性非常强,常常生长在盐碱土上(Cl-0.213％,SO42-0.606％,Na+0.419％),是非常珍贵的耐盐树种。为了进一步丰富我国欧洲赤松种质资源,...
- 方连玉
- 关键词：盐胁迫光合作用耐盐性评价
- 15份葡萄种质亲缘关系的ISSR分析被引量：46
- 2006年
- 利用ISSR标记对15份葡萄材料进行了基因组多态性分析,从60条引物中筛选出15条用于葡萄的ISSR扩增。共扩增出105条带,其中多态性条带91条,多态性百分率为86.7%。根据ISSR扩增结果,利用NTSYSpc2.10e软件进行Jaccard相似性系数分析,15份葡萄材料的遗传相似系数为0.27～0.75,平均遗传相似系数为0.471。通过UPGMA进行聚类分析,探索亲缘关系。在遗传相似系数0.39处,15份葡萄材料可分为2大类群。第1类包含7份山葡萄资源、2个山欧杂交品种,第2类包含3个欧亚种品种、2个欧美杂种品种和1个美洲杂种品种。由此可见,山葡萄与欧亚种、美洲杂种葡萄的亲缘关系较远,欧亚种与美洲杂种之间亲缘关系较近。
- 吴子龙方连玉王军沈育杰
- 关键词：葡萄ISSR亲缘关系聚类分析
