李丽林
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
- 供职机构：沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市农林科学院科技创新能力建设专项北京市自然科学基金更多>>
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- 洋葱花发育C类MADS-box基因AcAG表达载体的构建及拟南芥转化
- 2014年
- 为分析洋葱AcAG基因(GenBank ID:JX974431)的功能,本研究根据课题组前期获得的洋葱C类MADS-box基因AcAG的cDNA序列设计特异引物,利用RT-PCR技术从洋葱花瓣中分离到了AcAG基因的全长CDS序列,连接到植物载体pCAMBIA1304中,构建超表达载体pCAMBIA1304-AcAG(+)。采用冻融法将重组植物表达载体转入到农杆菌菌株LBA4404中,并利用花序侵染法对野生型拟南芥进行遗传转化。经RT-PCR和酶切鉴定,结果表明,AcAG过表达载体构建成功;转基因植株基因组PCR和RT-PCR分析结果表明,外源基因AcAG已经整合到拟南芥基因组中,并在转录水平上发生表达。
- 赵瑞李丽林陈俊琴孙吉娜
- 关键词：洋葱拟南芥
- 洋葱花器官B类MADS-box基因AcPI的克隆及表达分析被引量：10
- 2012年
- 【目的】克隆洋葱花器官B类PI/GLO家族MADS-box基因,分析其序列特征及时空表达模式,为探讨其在洋葱花发育过程中的分子遗传机制奠定基础。【方法】以洋葱花蕾总RNA为模板,根据同源克隆策略设计简并引物,利用RT-PCR结合RACE技术,获得AcPI的全长cDNA序列。用生物信息学方法对其基因序列特征进行分析;利用RT-PCR和Real-time PCR分析AcPI在花蕾整个生长过程中的时空表达模式。【结果】克隆获得洋葱AcPI基因(GenBank登录号:JX679083)的cDNA全长931 bp,包含615 bp的完整开放阅读框,编码205个氨基酸。蛋白分析表明,AcPI蛋白具有植物MADS-box蛋白典型的MADS和K结构域;与水仙的NTPI、风信子的HoMADS2有78%、75%的相似性,与金鱼草的GLO也有52%的相似性。系统进化树分析表明,AcPI属于B类MADS-box蛋白家族的PI亚家族。RT-PCR表达分析表明,AcPI只在生殖器官花蕾中表达,但主要在花的第一、二、三轮花器官中表达,而在营养组织根、茎和叶中不表达。Real-time PCR进一步分析表明,AcPI在花芽整个生长过程中,在心皮中微弱表达,但表达丰度呈递增趋势;而在外轮被片、内轮被片和雄蕊中强烈表达,其表达丰度除了在外轮被片中呈先增后减的趋势外,在内轮被片和雄蕊中都呈递增趋势。【结论】AcPI在洋葱第一轮花器官中的表达支持了van Tunen提出的修正的ABC模型;但AcPI在洋葱第四轮花器官中也有表达,这表明AcPI除了调控外轮被片、内轮被片和雄蕊发育外,还可能在心皮的形成发育过程中起着重要作用。
- 李洪有王婵李丽林王永勤赵瑞
- 关键词：洋葱花器官MADS-BOX基因基因克隆
- 洋葱花发育B类MADS-box基因AcPI表达载体的构建及拟南芥转化
- 2014年
- 为进一步分析实验室前期利用RACE技术从洋葱花蕾中分离到的AcPI基因的功能,本研究构建了AcPI基因的过表达载体,采用冻融法将表达载体转入农杆菌菌株LBA4404后,通过花序侵染法介导转化生态型拟南芥进行过表达试验。转基因植株的PCR和RT-PCR分析结果表明,外源基因AcPI已经整合到拟南芥基因组中并在转录水平上表达;转AcPI基因植株除了开花时间比野生型植株有所提前外,花器官和营养器官在形态上均未发生明显改变。因此,AcPI基因的功能需要进一步利用RNAi干涉技术进行研究,以为今后全面剖析洋葱花器官发育的分子遗传机制以及利用生物工程技术创造洋葱雄性不育植株提供理论依据。
- 赵瑞李丽林陈俊琴佟昊旻
- 关键词：洋葱ACPI拟南芥
- 不同质量分数的缩节胺和复硝酚钠对黄瓜穴盘苗壮苗及生理指标的影响被引量：13
- 2014年
- 为了克服在不利条件下培育黄瓜幼苗易产生的徒长、根系细弱发育不良等问题,采用穴盘育苗试验,以早春‘新发现’黄瓜品种为试材,底水灌溉质量分数为10、50、100mg·kg^-1缩节胺（DPC）及30、60、90mg·kg^-1复硝酚钠,研究不同质量分数的缩节胺和复硝酚钠对黄瓜穴盘苗壮苗及生理指标的影响,筛选出最佳质量分数。结果表明,10mg·kg^-1的缩节胺和30、60mg·kg^-1的复硝酚钠对黄瓜穴盘苗的壮苗指标及生理指标有显著的促进作用,其壮苗指数分别比对照提高29.03%、12.13%和6.14%。但高质量分数的缩节胺及复硝酚钠对黄瓜穴盘苗有抑制或显著的抑制作用。其中100mg·kg^-1的缩节胺处理的根系活力和可溶性蛋白质质量分数分别比对照降低37.26%和41.36%。缩节胺的质量分数应控制在10mg·kg^-1左右,而复硝酚钠的质量分数应控制在30-60mg·kg^-1。
- 佟昊旻赵瑞陈俊琴李丽林王菲菲
- 关键词：穴盘苗黄瓜缩节胺复硝酚钠生理指标
- 单子叶植物花器官发育的分子机制及修正的ABC模型被引量：4
- 2013年
- 大多数单子叶植物都与人类生活密切相关,其花器官发育的好坏不仅直接关系到它们的种族延续,而且对粮食作物和园艺作物的生产具有重要影响。该文综述了在主要单子叶粮食作物和观赏园艺作物中花器官发育分子机制的研究进展,分析了基于对双子模式植物的研究所建立起来的花器官发育模型在单子叶植物中的保守性及其多样性,并提出了适当的见解以及对今后研究的展望。
- 李洪有王婵李丽林赵瑞王永勤
- 关键词：单子叶植物保守性多样性
