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中国部分地区传染性法氏囊病病毒分子流病学调查被引量：14: 2009年; 为调查我国鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的流行情况,从我国11个省(市、自治区)采集法氏囊病料,分离鉴定鸡传染性法氏囊病病毒20株,运用RT-PCR方法对分离株的VP2基因进行扩增、测序和序列分析。研究表明,20株分离毒株中有19株具有IBDV超强毒株的分子特征,即222A、256I、294I和299S,与我国IBDV超强毒Gx株的核苷酸同源率在96.7%～99.4%,推导氨基酸同源率在98.2%～100%。遗传进化分析表明,所有分离毒株具有共同的祖先。; 宇文延青高玉龙高宏雷祁小乐杨金雨王晓燕秦立廷林欢李俊山刘伟李铁强邓小芸王笑梅; 关键词：分子流行病学超强毒株

IBDV VP1单克隆抗体的制备和稳定表达Vero E6细胞系的建立: 传染性法氏囊病(Infectious bursal disease，IBD)是危害世界养禽业的主要传染病之一，其病毒(Infeetious bursal disease virus，IBDV)主要侵害雏鸡的中枢免疫器官法...; 李俊山; 关键词：传染性法氏囊病病毒单克隆抗体真核表达; 文献传递

传染性法氏囊病病毒非结构蛋白VP5的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：8: 2006年; 利用PCR技术,从传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx、Gt毒株中分别扩增出VP5基因,将其克隆到表达载体pET30a、pET28a中。经PCR、酶切和序列分析鉴定获得重组质粒命名为pET28a-GtVP5、pET30a-GxVP5。将pET30a-GxVP5、pET28a-GtVP5分别转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功表达了约24kDa的Gx-VP5及23kDa的Gt-VP5融合蛋白,它们都以包涵体形式存在。将Gx-VP5纯化后的蛋白免疫8周龄BALB/c雌鼠,ELISA分析表明制备的抗血清效价在1∶25600以上,Westernblot分析VP5表达产物能与抗6×HismAb及抗IBDV多克隆抗血清发生反应,具有良好的免疫反应特异性。; 张宁高宏雷高玉龙李俊山冉多良王笑梅; 关键词：传染性法氏囊病病毒非结构蛋白克隆表达多克隆抗体

传染性法氏囊病病毒主要宿主保护性抗原蛋白在毕赤酵母中的表达: 目的：为了建立一个抗鸡传染性法氏囊病流行毒株基因工程亚单位疫苗的快速开发系统。方法：利用基因合成技术合成经优化改造的传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株主要宿主保护性抗原蛋白VP2基因，将合成基因插入毕赤酵母基因组...; 高宏雷高玉龙祁小乐张宁李俊山王笑梅; 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒毕赤酵母免疫原性疫苗; 文献传递

抗传染性法氏囊病病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备与初步应用被引量：5: 2007年; 原核表达的IBDVGx-VP5蛋白经纯化后免疫8周龄的BALB/c雌性小鼠,三次基础免疫后,融合前加强免疫,取脾细胞在PEG(MW1500)的作用下与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经过三次亚克隆筛选,获得稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为4B4、6D12、3E8,以三株杂交瘤细胞制备的腹水ELISA效价分别为5×104、3.5×104、3×104,特异性实验表明三株单抗能与IBDVGt株反应。以单抗介导的间接免疫荧光检测表达Gt-VP5的VeroE6细胞,可以见到特异的荧光,能做为特异性的检测VP5蛋白的工具,为今后IBDVVP5蛋白的研究打下基础。; 张宁高宏雷高玉龙李俊山王晓艳冉多良王笑梅

鸡传染性法氏囊病病毒vp2基因在杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性研究被引量：8: 2007年; 将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacVP2。用Western blot和间接免疫荧光试验分析表明IBDV VP2蛋白在Sf9昆虫细胞获得正确表达,所表达的重组VP2蛋白分子量约50 Ku。以rBacVP2感染Sf9细胞裂解物免疫3周龄SPF鸡,在免疫后7 d可检测到ELISA抗体;免疫后14 d可检测到琼脂免疫扩散抗体。攻毒试验表明,初次免疫后14 d对IBDV超强毒株的攻击保护率为75%,2次免疫后14 d对其的攻击保护率为100%。; 高玉龙高宏雷王晓艳李俊山邓小芸刘伟王笑梅; 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒 VP2基因杆状病毒免疫原性

传染性法氏囊病病毒超强毒株Gx与致弱株Gt多聚蛋白的原核表达: 传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,单层衣壳,无囊膜,呈20面体立体对称,其直径55～65 nm。IBDV的基因组由A、B两个...; 高宏雷高玉龙李俊山张宁王笑梅; 关键词：传染性法氏囊病病毒; 文献传递

饲用微生态制剂作用机理浅析被引量：5: 2004年; 微生态制剂是一种复合微生物制剂,属微生物学领域。以由光合细菌、乳酸杆菌、酵母菌等数种有益菌组成的微生态制剂,从优势茵群和微生态平衡、营养助消化作用、保健作用、增强机体免疫力以及减少肠道有害产物和圈舍臭味等方面分析微生态制剂作用机理。; 王金良吴明福李俊山李林; 关键词：微生态制剂微生态平衡消化酶

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李俊山