李平花
- 作品数：142 被引量：81H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒
- 本发明提供了通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。通用型口蹄疫病毒结构蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒，包括以下组成：包被抗原的酶标板、浓缩生物素标记单抗；浓缩生物素标记单抗中...
- 付元芳李坤卢曾军曹轶梅刘在新王省包慧芳李平花白兴文孙普马雪青张婧李志勇李冬陈应理
- 文献传递
- 一种抗塞内卡病毒猪源单链基因工程抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种抗塞内卡病毒猪源Fab基因工程抗体及其制备方法和应用。利用单个B细胞抗体技术，从感染和免疫SVA的猪外周血中分选特异性结合SVA的单个B细胞，然后扩增获得SVA抗体IgG的VH和VL基因，并将其插入含CH...
- 马雪青孙普卢曾军李坤李平花曹轶梅付元芳李冬张婧赵志荀袁红刘在新
- 一种A型口蹄疫标记疫苗及其构建方法
- 本发明公开了一种A型口蹄疫标记疫苗及其构建方法，所公开的标记疫苗的种毒为具有SEQ ID NO：3基因片段的A/rV-2病毒，该基因片段编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID NO：4，其缺失口蹄疫病毒3A蛋白的104-1...
- 李平花刘在新孙普袁红白兴文卢曾军李冬陈应理包慧芳付元芳曹轶梅
- 口蹄疫病毒O/CHN/Mya98/33-P株前导蛋白对病毒感染性的影响被引量：1
- 2014年
- 【目的】研究口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)前导蛋白对于病毒感染性的影响。【方法】利用反向遗传操作技术,以O/CHN/93现用疫苗株的感染性克隆为骨架,分别构建了含口蹄疫病毒中国分离株O/CHN/Mya98/33-P和O/CHN/Mya98/HN1前导蛋白的两株嵌合全长cDNA感染性克隆,采用实时荧光定量PCR检测两株不同的嵌合病毒感染猪肾原代细胞后细胞内IFNβ和OAS mRNA的转录情况。【结果】嵌合病毒rOHN1Lab增殖能力较弱,其对应诱导产生的IFNβ和OAS mRNA含量较高,而嵌合毒rO33Lab相对于rOHN1Lab增殖能力较强,他们诱导产生的IFNβ和OAS mRNA含量较低。【结论】研究表明口蹄疫病毒中国分离株O/CHN/Mya98/33-P前导蛋白具有更强的抗IFNβmRNA转录的能力,该研究能够为进一步鉴定FMDV前导蛋白抗宿主先天性免疫的关键性位点奠定基础。
- 张萌白兴文李平花范朋举包慧芳孙普卢曾军曹轶梅陈应理刘在新
- 关键词：口蹄疫病毒嵌合病毒转录
- 猪波形蛋白的原核表达及其对口蹄疫病毒浸染PK-15细胞的作用
- 2019年
- 为研究波形蛋白在病毒侵染过程中发挥的作用,原核表达猪波形蛋白与病毒互感后检测其复制能力。根据GenBank中已发表的波形蛋白序列,设计特异性引物,从PK-15细胞中扩增波形蛋白基因,并将其克隆至pET-28a(+)载体,转化大肠埃希菌BL21进行原核表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,进行目的蛋白的纯化及复性,并利用病毒抑制试验,检测其在病毒感染过程中的作用。结果表明,成功地克隆了猪波形蛋白基因,并克隆至pET-28a(+)载体,经诱导后高效表达,经纯化复性获得的波形蛋白抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵染Marc-145细胞,然而并不抑制口蹄疫(FMDV)侵染PK-15细胞。随后借助细胞流式术检测PK-15细胞中波形蛋白的分布,显示其主要存在于细胞膜内的基质中。猪源波形蛋白的克隆表达,为进一步研究猪源波形蛋白与口蹄疫病毒蛋白之间的相互作用奠定了基础。
- 令瑛马雪青李平花张婧李坤付元芳冯若飞马忠仁卢曾军刘在新
- 关键词：原核表达口蹄疫病毒PK-15细胞
- A型口蹄疫基因工程复合表位蛋白及疫苗
- 本发明提供了一种A型口蹄疫基因工程复合表位蛋白，其特征在于：所述复合表位蛋白的氨基酸序列为序列表中SEQ？ID？No.2。本发明还提供含有上述A型口蹄疫基因工程复合表位蛋白的疫苗。应用本发明的疫苗免疫动物，一周后就可检测...
- 曹轶梅卢曾军刘在新李冬孙普付元芳白兴文李平花包慧芳陈应理
- 口蹄疫分子标记疫苗研究报告
- 口蹄疫是严重危害中国畜牧业发展的重大动物疫病,疫苗免疫和精准区分免疫和自然感染动物,筛查并淘汰染毒家畜,是预防和控制口蹄疫的关键措施,也是中国口蹄疫防控的主要策略.针对目前广泛使用的传统口蹄疫灭活疫苗,因纯化不完全,免疫...
- 刘在新陈应理谢宝霞曹轶梅王永录罗建勋刘湘涛张永光谢庆阁卢曾军李平花白兴文殷宏李冬孙普包慧芳付元芳
- 关键词：口蹄疫疫苗研制分子标记反向遗传学
- 文献传递
- 猪细小病毒VP2蛋白主要抗原表位区的原核表达及检测PPV抗体的间接ELISA的建立被引量：1
- 2014年
- 利用大肠杆菌表达51ku的猪细小病毒(PPV)VP2蛋白主要抗原表位区,通过Western-blot检测,表达蛋白具有良好的反应原性。利用此表达蛋白建立了检测PPV抗体的间接ELISA。通过检测32份阴性血清最终确定本ELISA的判定标准为:血清抗体效价>0.18,判为PPV血清抗体阳性;血清抗体效价≤0.18,判为血清抗体阴性。此ELISA的批内重复性试验的变异系数小于5%,批间重复性试验的变异系数小于10%。用此ELISA与商品化PPV IgG检测试剂盒做符合性比较试验;结果,感染猪血清抗体检测符合率为100%,免疫猪血清抗体检测符合率为82%,非免疫健康猪血清抗体检测符合率为78%,样本总体检测符合率为80%。用建立的ELISA检测田间猪血清的PPV抗体,阳性率介于28.8%~37.5%之间,提示上述地区可能存在不同程度的PPV感染情况。本研究为PPV免疫或感染状况的检测提供了一种有用的定性诊断方法。
- 范朋举曹轶梅卢曾军张萌孙普付元芳李平花白兴文包慧芳陈应理李冬刘在新
- 关键词：猪细小病毒原核表达间接ELISA血清检测
- 一种口蹄疫灭活疫苗中3AB和/或3ABC非结构蛋白定量检测试剂盒和应用
- 本发明提供了一种口蹄疫灭活疫苗中3AB和/或3ABC非结构蛋白定量检测试剂盒和应用，属于疫苗检测技术领域。本发明基于双抗体夹心ELISA原理和生物素‑亲和素检测系统，利用FMDVNSP3A单克隆抗体、生物素标记的3B单克...
- 付元芳卢曾军孙普曹轶梅李冬白兴文李坤包慧芳赵志荀李平花王健马雪青张婧袁红张强刘在新
- 含RGD受体结合位点口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株的拯救及初步鉴定
- 2009年
- 【目的】构建含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)受体结合位点口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株的全长感染性cDNA克隆。【方法】采用定点突变方法,构建Asia1型FMDV含有预期突变的全长cDNA克隆pFMDV-RGD。pFMDV-RGD重组质粒经NotI线化后,与表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,进行FMDV-RGD病毒拯救。【结果】序列测定结果表明成功构建了FMDV含有RGD受体位点的Asia1/JS/China/2005全长cDNA克隆。共转染试验获得拯救病毒,对拯救的病毒分别进行序列测定、间接免疫荧光、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析,表明成功拯救了含有RGD受体结合位点的Asia1/JS/China/2005株FMDV。【结论】该试验为进一步研究含有RGD和RDD受体结合位点2个拯救病毒生物学特性的差异奠定了基础。
- 李平花白兴文曹伟军卢曾军孙普殷宏刘在新
- 关键词：口蹄疫病毒病毒拯救
