李雪涛
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
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- ABCG2在非小细胞肺癌厄洛替尼耐药中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨ABCG2在非小细胞肺癌厄洛替尼耐药中的作用。方法厄洛替尼不同浓度(1、5、25μmol/L)处理A549细胞及其获得性耐厄洛替尼细胞(A549/ER)12、24、48 h后,荧光实时定量PCR观察ABCG2 mRNA表达变化,Western blot检测p-AKT、ABCG2蛋白表达变化。PI3K/AKT通路激活剂(IGF-1)和抑制剂(LY294002)分别作用于A549细胞及A549/ER细胞24 h后,荧光实时定量PCR和Western blot方法分别检测ABCG2 mRNA及p-AKT、ABCG2蛋白表达变化。流式细胞仪检测加入IGF-1和LY294002后ABCG2外排作用。结果与未加入厄洛替尼的A549、A549/ER细胞相比,厄洛替尼(1、5、25μmol/L)作用12、24、48 h后,随着剂量的增加和作用时间的延长,ABCG2的表达与p-AKT水平呈正相关。加入IGF-1 24 h后,A549细胞中ABCG2表达量升高,而加入LY294002的A549/ER细胞,ABCG2表达量下降,并且IGF-1作用24 h后ABCG2外排明显增高。LY294002作用24 h后A549/ER细胞ABCG2外排明显降低。结论 ABCG2经由PI3K/AKT信号通路介导非小细胞肺癌中厄洛潜尼耐药,且阻断PI3K/AKT通路可逆转由ABCG2介导的耐药。
- 张靖马虎韩静李雪涛陈正堂
- 关键词：肺癌厄洛替尼P13KAKTABCG2
- 95D细胞转移相关基因在原发灶、循环肿瘤细胞和转移灶中的差异表达被引量：2
- 2011年
- 目的利用人巨细胞肺癌高转移株(95D)裸鼠自发转移模型,分析CD9、RHOA、MYL12A、B2M、PTOV1、HSPA1B肿瘤转移相关基因在原发灶、循环血肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)和转移灶中的差异表达。方法根据前期实验结果并利用GoSufer软件进行GO(gene ontology)分析,筛选出可能与肿瘤转移相关的基因CD9、RHOA、MYL12A、B2M、PTOV1、HSPA1B。利用稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的人巨细胞肺癌细胞株95D/GFP,建立肺癌裸鼠自发转移模型,用流式细胞分选术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)分别纯化原发灶、外周血和转移灶中的肿瘤细胞,利用Real-time PCR技术检测上述基因在上述肿瘤细胞中的相对表达量。结果 CD9、RHOA、MYL12A基因在CTCs中表达较少,其次是肝转移灶,在皮下原发灶中表达较多;B2M基因在皮下原发灶、CTCs和肝转移灶中依次降低;PTOV1基因在CTCs中高表达,其次是皮下原发灶,肝转移灶中表达最少;HSPA1B基因只在原发灶中表达。结论 CD9、RHOA、MYL12A、B2M、HSPA1B基因可能是潜在的肺癌转移抑制基因,而PTOV1可能促进肺癌微转移。
- 李雪涛陈芳琳王欣欣孙建国陈正堂
- 关键词：循环肿瘤细胞荧光定量PCR
- 用于肺癌诊断的靶向奥曲肽修饰的壳聚糖分子信标纳米复合物的制备方法
- 本发明的用于肺癌诊断的靶向生长抑素类似物奥曲肽(OCT)修饰的壳聚糖(CS)分子信标(MB)纳米复合物，通过用自组装法合成壳聚糖分子信标纳米复合物，然后通过化学反应以戊二醛为交联剂合成靶向奥曲肽修饰的壳聚糖miR-155...
- 陈正堂孙建国朱海振姚权安江宏韩静李雪涛朱聪慧江飞龙陈光朋彭丽娜
- 文献传递
- 非小细胞肺癌转移相关基因在原发灶、血循环和转移灶肿瘤细胞中的差异表达
- 背景及目的: 肺癌是引起人类死亡最常见的恶性肿瘤,其中80%为非小细胞肺癌(non small-cell lung cancer,NSCLC)。近年来,尽管局部晚期肺癌经过综合治疗,总体疗效有所提高,但到目前为止,肺癌患...
- 李雪涛
- 关键词：循环肿瘤细胞
- 文献传递
- 非小细胞肺癌转移相关基因在原发灶、血循环和移灶肿瘤细胞中的差异表达
- 背景及目的:
肺癌是引起人类死亡最常见的恶性肿瘤，其中80％为非小细胞肺癌(NONSMALL-CELL LUNG CANCER，NSCLC)。近年来,尽管局部晚期肺癌经过综合治疗，总体疗效有所提高，但到目前为止，肺...
- 李雪涛
- 关键词：循环肿瘤细胞荧光定量PCR
- 文献传递网络资源链接
- 基于分子信标技术对活细胞内miR-155检测用于肺癌诊断被引量：2
- 2016年
- 目的探讨激光共聚焦检测miR-155 MB对肺癌活细胞中miR-155的识别成像功能。方法设计锁核酸修饰的miR-155分子信标(MB),同时设计不和任何序列结合的随机序列分子信标(RS MB)作为阴性对照;采用液相分子杂交试验验证其灵敏性和特异性,并进一步在肺肿瘤组织水平上验证。以纳米壳聚糖(CS)作为载体转染miR-155 MB,检测miR-155 MB对肺癌细胞中miR-155识别成像功能;同时采用miR-155抑制剂antagomir抑制miR-155的表达后检测miR-155 MB对肺癌细胞中miR-155的识别成像功能。结果液相分子杂交实验中miR-155+miR-155 MB组荧光强度为miR-155 MB组的58倍,RS+RS MB组荧光强度为RS MB组的43倍(P<0.05)。在肺鳞癌、腺癌组织中,激光共聚焦可检测到较强的荧光信号,阴性对照组未检测到明显荧光信号。纳米壳聚糖转染miR-155 MB后,可在肺癌活细胞中检测到较强的荧光信号,antagomir抑制miR-155的表达后,发现荧光信号明显降低(P<0.05)。结论利用分子信标技术可以实现通过识别肺癌活细胞中的miR-155并成像肺癌细胞,从而为发现肺癌细胞并用于肺癌诊断提供了新的理论基础。
- 朱海振郑召鹏江飞龙韩静李雪涛陈光朋李杭陈正堂
- 关键词：分子信标MICRORNA
- miR-18a对A549细胞的放射增敏作用及其机制被引量：2
- 2013年
- 目的观察miR-18a对A549肺腺癌细胞放射敏感性的影响。方法 qRT-PCR检测2 Gy X线照射A549细胞后miR-18a的变化;将人工合成的miR-18a模拟物(mimics)转染A549细胞,测定不同剂量照射后A549细胞的克隆形成能力,描记细胞存活曲线,测算2 Gy时存活分数(SF2)等指标,判断miR-18a对A549细胞放射敏感性的影响;同时检测过表达miR-18a的A549细胞中共济失调-毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)蛋白,探讨miR-18a对A549细胞放射敏感性影响的分子机制。结果与照射前(1.00±0.04)相比,2 Gy剂量照射后A549细胞miR-18a水平[(0.18±0.04)～(0.31±0.09)]显著降低(P<0.05)。miR-18a过表达后A549细胞放射敏感性增强,miR-18a过表达组、空白对照组SF2分别为0.34,0.48;同时miR-18a过表达的A549细胞中ATM、磷酸化ATM(ATM phospho S1981)水平下降。结论 miR-18a上调A549细胞放疗敏感性,可能与miR-18a下调ATM有关。
- 吴磊孙建国徐睿李德志徐燕梅马虎李雪涛彭丽娜陈正堂
- 关键词：肺癌微小RNA
- 用于肺癌诊断的靶向奥曲肽修饰的壳聚糖分子信标纳米复合物的制备方法
- 本发明的用于肺癌诊断的靶向生长抑素类似物奥曲肽(OCT)修饰的壳聚糖(CS)分子信标(MB)纳米复合物，通过用自组装法合成壳聚糖分子信标纳米复合物，然后通过化学反应以戊二醛为交联剂合成靶向奥曲肽修饰的壳聚糖miR‑155...
- 陈正堂孙建国朱海振姚权安江宏韩静李雪涛朱聪慧江飞龙陈光朋彭丽娜
- 文献传递
- 纳米壳聚糖递送分子信标成像肺癌细胞的研究被引量：3
- 2016年
- 目的采用纳米技术和分子信标(MB)技术,研究纳米壳聚糖(CS)作为miR-155 MB载体用于肺癌细胞成像的效果。方法设计并合成锁核酸修饰的miR-155 MB,采用自组装方法合成纳米壳聚糖分子信标复合物(CS-MB)并对其抗DNaseⅠ特性、粒径大小、zeta电位等理化性质进行检测。以CS作为载体转染miR-155 MB,激光共聚焦检测miR-155 MB对肺癌细胞中的miR-155的识别能力并进行成像,采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)进行进一步验证,以随机序列分子信标(RS MB)作为阴性对照。结果按照7:1的质量比合成的CS-MB,其包封率高,能抵抗DNaseⅠ的降解,粒径小,带正电荷,适合基因转染。CS转染miR-155 MB后可在肺癌细胞中看到较强的红色荧光,RS MB组未检测到荧光信号(P<0.05),且荧光信号强弱趋势与实时荧光定量PCR检测的miR-155表达趋势较一致。结论 CS可作为miR-155 MB载体检测肺癌细胞中miR-155的表达并进行肺癌细胞成像,为肺癌的诊断提供了新思路和新技术。
- 朱海振俞婕江飞龙韩静李雪涛陈光朋李杭陈正堂
- 关键词：肺肿瘤分子信标
- 原发灶、循环肿瘤细胞和转移灶中95D细胞转移相关基因的差异表达
- ：建立人巨细胞肺癌95D裸鼠自发转移模型,比较CD9、RHOA、MYL12A、B2M、PTOV1、HSPA1B等肿瘤转移相关基因在原发灶、循环肿瘤细胞和转移灶中的差异表达. 方法：利用GoSufer软件对前期实验结...
- 李雪涛陈芳琳王欣欣孙建国陈正堂
- 关键词：基因表达循环肿瘤细胞
