杨光
- 作品数:2 被引量:9H指数:2
- 供职机构:江苏省麻醉学重点实验室更多>>
- 发文基金:江苏省教育厅开放课题更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的克隆与表达(英文)被引量:4
- 2006年
- 采用RTPCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增HO1基因,将该基因克隆进pGEMTeasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,分析基因,酶切后与含有乳酸乳球菌启动子NisA的pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养.用Nisin诱导HO1表达,SDSPAGE和Westernblot分析、鉴定表达产物,并且用分光光度法测定工程菌表达的HO1活性为0.45nmolmg(protein)-1h-1.
- 吴长毅曾因明王俊科庞庆丰杨光高新跃
- 关键词:乳酸乳球菌血红素加氧酶-1基因克隆表达
- 大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的表达被引量:6
- 2006年
- 目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养。用nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE、Westernblot鉴定表达产物,并采用分光光度法测定HO-1活性。结果:表达产物相对分子量约为32kU,表达量约为7.0mg/L,HO-1活性为2.386U/(mg·h)。结论:乳酸乳球菌能够表达具有生物活性的大鼠HO-1。
- 吴长毅庞庆丰曾因明王俊科杨光高新跃
- 关键词:血红素加氧酶-1基因克隆表达乳酸乳球菌