杨小柯
- 作品数：42 被引量：258H指数：10
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli抗菌机制研究被引量：3
- 2014年
- 目的利用透射电子显微镜和流式细胞仪等技术手段,对重组柞蚕抗菌肽AD抗菌作用机制进行初步研究。方法用微量肉汤法鉴定重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli敏感质控标准菌株ATCC25922和产β-内酰胺酶菌株ATCC35218的抑菌作用后,利用透射电子显微镜观察经重组柞蚕抗菌肽AD处理前后E.coli超微结构变化,再用流式细胞Ca2+荧光探针技术检测经重组柞蚕抗菌肽AD处理前后E.coli细胞膜内游离钙离子浓度的变化。结果微量肉汤法证明重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli敏感株ATCC25922和耐药株ATCC35218的MIC值均为8μg/m L;透射电镜观察到重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli的作用主要表现为破坏细菌胞膜的完整性;流式细胞Ca2+荧光探针检测发现,经重组柞蚕抗菌肽AD作用后,细菌胞内表面上的二价阳离子Ca2+浓度增高。结论重组柞蚕抗菌肽AD对E.col i的抗菌机制可表现为膜完整性的破坏,并伴随胞内Ca2+浓度的增高。
- 张倩邓平建王兴顺李浩杨小柯耿艺介
- 关键词：抗菌肽透射电子显微镜流式细胞技术
- 植物DNA混合物中物种成分实时荧光PCR定量分析
- 2009年
- 目的：建立植物DNA混合物中物种成分实时荧光PCR定量方法。方法：建立PCR反应管中某物种DNA质量和该物种特异性基因扩增Ct值之间的定量关系,通过260 nm处光密度值的测定计算DNA提取液的浓度和DNA总质量,并以某物种DNA和总DNA的质量百分比表示该物种DNA含量。对56个待测样品中的物种成分进行定量测定以验证新建方法的准确性和精密度。结果：新建方法的LOQ低于0.51%;B ias为0.00%～20.79%,RSD为0.43%～19.64%。结论：新建方法的准确度和精密度均符合现行要求。
- 杨永存杨冬燕王学林杨小柯周向阳郭良让林健荣邓平建吴水清
- 关键词：实时荧光PCR
- 腹泻病病原学研究临床价值被引量：7
- 2010年
- 目的:探讨引起腹泻的病原微生物种类和构成特点及其流行情况。方法:采集腹泻患者粪便,进行致泻性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、空肠弯曲菌和弧菌培养鉴定和血清定型检测;对其中水样便且病原菌检测阴性的标本进行轮状病毒、诺沃克病毒、肠道腺病毒和星状病毒荧光PCR检测。结果:在2 627份粪便标本中,共检出肠道病原菌257株,其中致泻性大肠埃希菌142株(55.3%),副溶血弧菌97株(37.7%),沙门菌17株(6.6%),志贺菌1株(0.4%);未检出霍乱弧菌和空场弯曲菌;5份标本同时检出2种病原菌。在668份病原菌检测阴性的水样便标本中,有274份检出肠道病毒,其中诺沃克病毒180份(65.7%),轮状病毒77份(28.1%),星状病毒15份(5.5%)和肠道腺病毒2份(0.7%);4份同时检出轮状病毒和诺沃克病毒。结论:腹泻病原微生物类型复杂多样,以致泻性大肠埃希菌和诺沃克病毒感染居多,加强腹泻病原微生物的常规检验对腹泻病的病因诊断和治疗有重要临床价值。
- 杨虹王丽石晓路李迎慧杨小柯
- 关键词：腹泻病致泻性大肠埃希菌副溶血弧菌轮状病毒诺沃克病毒
- 2012年深圳市场大豆及豆制品的转基因检测与分析被引量：2
- 2013年
- 目的:了解深圳市场大豆及豆制品(食用油除外)中转基因成分的阳性率,完善检测方法,为政府监管转基因大豆提供科学依据。方法:定期在深圳市场随机抽取大豆及豆制品,采用实时荧光PCR方法对其进行定性检测,评估深圳市场转基因大豆的阳性率,并运用统计学方法与往年的检测结果进行比较和分析。结果:2012年共检测样品86份,均未检出转基因阳性样品,阳性率为0%,与2006和2011年的检测结果分别比较,结果差异无统计学意义。结论:深圳市场大豆及豆制品(食用油除外)的转基因阳性率较低,未见有上升的趋势。
- 杨小柯杨永存杨冬燕李浩张倩耿艺介张艳炜邓平建
- 关键词：大豆豆制品转基因检测
- 深圳地铁一期工程各站段放射性水平与分析被引量：20
- 2006年
- 目的对深圳地铁一期工程各站段(包括站厅、站台、隧道口处)γ辐射水平和氡浓度进行监测与评价。方法按照《环境地表γ辐射剂量率测定规范》和《空气中氡浓度的闪烁瓶测量方法》监测。结果深圳地铁一期工程各站段放射性属正常本底水平。结论地铁工作人员所受辐射年有效剂量与深圳市民所受辐射年有效剂量基本相当,在地铁站长期工作或乘车旅行均不能造成额外明显的受照负担。
- 慈捷元时劲松陈峰何伟川绕秀珍李胜浓李忠平杨小柯
- 关键词：深圳地铁放射性检测卫生学评价
- 利用基因芯片技术评估转基因生物安全性的应用现状及前景被引量：1
- 2010年
- 基因芯片技术在生命科学的诸多领域被广泛应用,被科学界誉为对生命科学发展产生了重要影响的技术工具。基因芯片技术能否为转基因生物安全性评估提供有力的技术支持是一个广受关注的问题。本文将立足于目前芯片技术的应用现状,从基因芯片技术本身的特点及转基因生物安全性评价要求等方面综合分析利用基因芯片技术评估转基因生物安全性的应用前景。
- 杨冬燕杨永存杨小柯张海龙邓平建
- 关键词：基因芯片转基因
- 深圳地区肠道病毒71型VP1基因变异趋势研究被引量：1
- 2011年
- 目的 研究深圳地区肠道病毒71型VP1基因变异趋势.方法 用肠道病毒71型特异性引物进行RT-PCR,并对EV71的VP1进行扩增,所得的序列与肠道病毒71型A、B、C基因型代表株的核苷酸序列比较,用DNA Star、BioEdit和Mega 3.1软件进行系统进化分析.结果 35株病毒间VP1核苷酸同源性为92.1%-100%,它们与A、B基因型代表株VP1区核苷酸同源性差异较大,为81.4%-91.1%,与C4基因型代表株接近,其核苷酸同源性在93%-97.4%之间.1998-2004年深圳地区EV71主要流行株为C4b亚型,从2003年开始逐步向C4a亚型过渡,至2006年已全部变迁为C4a亚型,且从2003年至2008年,深圳地区EV71 C4a株与安徽阜阳株FY23的核苷酸的同源性分别为：94.5%-94.7%,95.7%-95.8%,96.2%,95.4%-97.5%,96.3%-99.2%,有逐年增高的趋势.2006年两株EV71和2008年EV71代表株核苷酸序列在VP1区的第66位点,均由A→C,从而导致VP1区氨基酸的第22位点由谷酰胺变为组氨酸（Q→H）.结论 深圳地区EV71流行株逐渐由C4b亚型向C4a亚型演变,2006年部分EV71及2008年EV71 VP1第66核苷酸位点发生有义突变.
- 何雅青张宏斌姚相杰廖玉学杨洪冼慧霞阳帆张海龙杨小柯许文波
- 关键词：肠道病毒属种系发生基因
- 深圳市2006-2009年疟疾疫情监测分析被引量：10
- 2011年
- 目的了解广东省深圳市近年来的疟疾流行现状,为疟疾防控措施的制订和调整提供科学依据。方法总结2006—2009年深圳市"三热"病人血检、输入性疟疾主动监测和媒介监测的数据资料,分析病例的地区、虫种、职业、时间等分布特征和和蚊媒分布情况。结果 2006-2009年全市的血检阳性率平均为0.24%,2008年因输入性恶性疟的增加使血检阳性率出现明显上升,病例出现最多的地区为罗湖、龙岗和宝安区;恶性疟占总病例数的18.91%,间日疟主要集中于工人群体,高发于6月,恶性疟主要为涉外工作的干部职员;高发月份为2月和10月;主动监测点检出的输入性病例均为恶性疟;媒介监测未发现按蚊种群。结论深圳市的疟疾疫情和媒介传播环节控制良好,但输入性恶性疟的预防和控制应引起足够重视。
- 张倩邓平建耿艺介黄达娜吴双杨冬燕张艳炜杨小柯杨永存
- 关键词：疟疾监测输入性疟疾蚊媒
- 运用全长序列鉴定HLA-C罕见基因的实验研究
- 2013年
- 目的检测与分析2例骨髓志愿捐献者携带的罕见等位基因。方法用快速DNA提取试剂盒从全血样本中提取基因组DNA,经HLA-C基因商品化测序分型试剂盒扩增,纯化后的扩增产物作为模板用试剂盒配套的第2、3、4外显子正反向测序引物及自行研制的第5外显子正反向、第6外显子正向和第7外显子反向测序引物进行测序,结果导入Assign-SBT3.5.1.45软件分析,并用PCR序列特异性引物技术(SSP)对标本进行确认。结果分型结果显示其中一例为HLA-C*07:63,另一例为HLA-C*01:24。结论临床移植配型遇罕见基因时应测定全长序列以提高分型结果的准确性,此两例罕见等位基因为中华骨髓库建立HLA高分辨数据库提供了有效依据。
- 杨小柯何柳媚张倩杨冬燕王大明
- 关键词：等位基因聚合酶链反应
- 用多重荧光PCR技术鉴别牛肉中掺入的猪马鸭成分的研究被引量：5
- 2015年
- 目的为了敏感、高效地检测掺入牛肉中的低价肉品成分,本研究在常规荧光PCR检测一种掺假成分的基础上,建立了可以同时检测猪和马,马和鸭,鸭和猪的两重荧光PCR检测体系及可以同时检测牛、猪和马,牛、马和鸭,牛、鸭和猪的三重荧光PCR检测体系。方法配制掺入猪、马、鸭源性成分的模拟牛肉掺假样本,掺假比例分别为15.00%和20.00%,筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立多重荧光PCR扩增体系。结果研究结果表明,对于单个成分掺假比例分别为5.00%和10.00%的掺假样本,采用两重荧光PCR检测体系可以使各成分100%准确检出。而采用三重荧光PCR检测体系,即使单个成分的掺假比例低至5.00%,所有掺假样本中的各种掺假组分都被准确检出。结论本研究建立的多重荧光PCR检测体系,可以敏感、特异、准确的检出牛肉制品中掺入的猪、马、鸭成分。
- 杨冬燕杨小柯李浩杨永存邓平建田秋霞
- 关键词：牛肉掺假荧光PCR
