杨栋 作品数:8 被引量:52 H指数:2 供职机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 自动化与计算机技术 电子电信 更多>>
小麦蓝矮病植原体16S rDNA基因片段的比较分析 被引量:39 2005年 小麦蓝矮病是陕西乃至西北冬麦麦区的一个重要病害,由介体条沙叶蝉专化性传播.对小麦蓝矮病株叶片和带毒条沙叶蝉进行超薄切片及电镜观察,在叶片韧皮部和叶蝉后肠中均观察到大量典型植原体.利用植原体16S rDNA基因保守序列通用引物对Rm16F2/Rm16R1,应用PCR技术从小麦蓝矮病株叶片中扩增到1.4kb的特异片段.通过对16S rDNA基因片段序列同源性比较,结果表明小麦蓝矮病病原与三叶草绿变、翠菊黄化、绣球花绿变、草莓矮化和番茄巨芽植原体亲缘关系较近,其同源率为99.2%~99.9%.据此可以判定小麦蓝矮病植原体是属于植原体16SrⅠ组,确定了其分类地位. 顾沛雯 安凤秋 吴云锋 杨栋 罗朝鹏 相建业 杨英关键词:小麦蓝矮病 植原体 同源性 马铃薯Y病毒N株HC-pro基因的序列分析与表达 被引量:2 2005年 马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的典型成员,是烟草、马铃薯和辣椒等茄科作物病毒病的主要病原之一,分布于世界各地.近年烟草上的 PVY在全国范围内特别是陕西、黄淮和东北烟区流行呈上升趋势,且以PVY坏死株系(PVY-N)为主,重病田发生率达40%以上,并常与烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒混合侵染,严重影响烟草品质造成巨大的经济损失. 王睿 吴云锋 郝兴安 付宏岐 杨栋 樊兵关键词:HC-PRO基因 马铃薯Y病毒 马铃薯Y病毒N株系HC-Pro基因在毕赤酵母中分泌表达与鉴定 2007年 以克隆载体pGEMT-PVY-NHC为模板,用PCR方法获得HC-Pro基因,构建表达载体pPIC9K-HC,将重组质粒经SalI单酶切后电转化PachiapichiaGS115菌株,筛选出对G418有高抗性和在MM培养基上生长缓慢的转化子。经摇瓶发酵和1%甲醇诱导后,SDS-PAGE检测发酵液上清,在66kD处有1个特异条带表达,目的条带蛋白占上清液总蛋白的40%。Westernblot鉴定表明,表达蛋白可以和HC抗体发生结合反应。 杨栋 吴云锋 王睿关键词:HC-PRO基因 毕赤酵母 烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达 被引量:11 2006年 根据烟草蚀纹病毒(TEV)CP序列设计合成上下游引物,利用RT-PCR方法获得了TEV CP基因,大小为789 bp。将TEV CP基因克隆到pM D 18-T S im p le V ector,经E coRⅠ/S acⅠ双酶切得到目的片段,并将其定向插入到pET 30a载体中构建了原核表达载体pET 30-TEV CP,重组质粒经E coRⅠ和S acⅠ双酶切鉴定及基因测序验证正确后,转化大肠杆菌BL 21,用IPTG进行诱导表达。结果表明,TEV CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,分子量约为37 ku。以表达产物为抗原免疫家兔,制备了特异性抗血清,其效价为1/1 204。W estern b lot检测结果表明,制备的抗血清可用于检测田间的发病植株。 王秀敏 吴云锋 成巨龙 张建新 杨栋 罗朝鹏关键词:烟草蚀纹病毒 外壳蛋白基因 原核表达 抗血清 西瓜花叶病毒2号hc-pro基因的克隆与原核表达 <正>西瓜花叶病毒2号(WMMV-2)是马铃薯Y病毒属的成员,它能被蚜虫以非持久性传播,造成瓜类大面积感病而减产。西瓜花叶病毒2号是单链正义RNA病毒,其编码的辅助成分/蛋白酶(hc-pro)是一种多功能的非结构蛋白,它... 杨旭光 吴云锋 黎登寨 郝兴安 王睿 杨栋文献传递 麦田环境中无线传感器网络节点定位算法设计 无线传感器网络(WSNs)近年来受到了科学界的普遍关注。该网络中体积小、成本低且低功耗的设备被广泛应用于环境监测、目标追踪、生物医学检测等不同场合。在众多应用中,节点定位技术为降低无线传感器网络搭建成本做出了重大贡献,而... 杨栋关键词:无线传感器网络 文献传递 马铃薯Y病毒N株系HC-Pro基因在毕赤酵母中分泌表达与鉴定及抗血清制备 马铃薯Y病毒属成员是植物病毒中最大的被蚜虫以非持久方式传播的群体,马铃薯Y属病毒HC-Pro蛋白为病毒自身编码,在病毒生活史中体现出了多种不同功能。与很多已经鉴定出HC-Pro功能不同的是,在蚜虫传毒研究中必须使用具有生... 杨栋关键词:HC-PRO基因 PPIC9K 巴斯德毕赤酵母 文献传递 马铃薯Y病毒N株系HC-Pro基因毕赤酵母分泌表达菌株构建 马铃薯Y病毒属成员是植物病毒中最大的被蚜虫以非持久方式传播的群体, 马铃薯Y病毒N株系是此属的典型成员。蚜虫在传播此类病毒时候需要获得病毒编码辅助成分蛋白(Helper Component Proteinase,HC-P... 杨栋 吴云锋 王睿文献传递