杨汉东
- 作品数：102 被引量：445H指数：10
- 供职机构：湖北医药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省教育厅重点项目湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人脐带血间充质干细胞体外诱导分化为心肌细胞的实验研究被引量：20
- 2005年
- 目的:研究人脐带血间充质干细胞体外诱导分化为心肌细胞的可行性。方法:由人脐静脉获得间充质干细胞,纯化培养后用不同浓度的5-氮杂胞苷(5-azacytidine)诱导,透射电镜、免疫组化及RT-PCR鉴定诱导后细胞。结果:经5-氮杂胞苷诱导后的脐带血间充质干细胞在透射电镜下观察到细胞内有明显的肌丝,横纹样结构形成,核呈卵圆形,位于细胞中央位置,胞质中可见富集的糖原颗粒及线粒体结构。免疫组化可见肌钙蛋白Ⅰ染色阳性。RT-PCR方法显示能表达缝隙连接膜通道蛋白Connexin-43基因。结论:人脐带血间充质干细胞可在体外经5-氮杂胞苷诱导分化为具有典型结构的心肌细胞。
- 汤天军杨波杨汉东张有顺胡礼仪李东锋张继红
- 关键词：人脐带血间充质干细胞体外诱导心肌细胞5-氮杂胞苷
- Duchenne型肌营养不良症伴充血性心力衰竭1例
- 2007年
- 许浩闵新文杨汉东陈欣李东峰何培根
- 关键词：DUCHENNE型肌营养不良心力衰竭充血性
- 吡格列酮预处理对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及线粒体ATP敏感性钾通道的影响
- 2007年
- 目的:观察吡格列酮(Pio)对在体大鼠心肌缺血/再灌注心肌细胞凋亡及线粒体ATP敏感性钾通道影响,探讨Pio对心肌缺血损伤保护作用及其机制.方法:24只SD大鼠随机分为假手术组(SO组),缺血/再灌注组(I/R组),Pio预处理组(Pio组)和线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂5-羟基葵酸(5-HD)+Pio组(5-HD+Pio组)4组.各组于缺血/再灌注前24h尾静脉注射相应溶媒及药物,5-HD+Pio组注入5-HD10mg/kg30min后再给予Pio3mg/kg;Pio组只注入Pio3mg/kg;SO组不结扎前降支,4h后取出心脏;余三组结扎前降支30min,再灌注4h后取出心脏.用透射电镜观察心肌线粒体超微结构的改变;采用TUNEL法和免疫组化法检测缺血心肌细胞凋亡和Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白的表达以及RT-PCR法测FasmRNA的表达.又另取18只SD大鼠随机分成SO,I/R和Pio组,行心肌梗死范围的测定.结果:①与I/R组相比,Pio组线粒体损伤程度明显减轻;②与I/R组(34.93±5.55)%相比,Pio组(20.24±3.93)%心肌梗死范围明显减少(P<0.05);③与I/R组相比,Pio组能明显增加Bcl-2蛋白的阳性细胞指数(P<0.05),降低心肌细胞凋亡率(P<0.05)及Bax,Caspase-3蛋白的阳性细胞指数(P<0.05),下调FasmRNA的表达水平.I/R组与5-HD+Pio组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论:Pio预处理可通过保护心肌线粒体结构,减少心肌细胞凋亡及梗死范围,保护缺血心肌损伤作用可被线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂所对抗.
- 李健冯义柏田莉郎明健杨汉东
- 关键词：吡格列酮缺血再灌注钾通道
- 靶向大鼠CTGF的shRNA表达载体的构建和作用分析被引量：5
- 2008年
- 目的:构建并筛选靶向大鼠结缔组织生长因子(CTGF)的shRNA表达载体.方法:根据大鼠CTGF mRNA序列设计并构建4个靶向大鼠CTGF基因的shRNA干扰质粒;然后以脂质体转染试剂将目的质粒转染至大鼠心肌成纤维细胞,流式细胞技术分选出成功转染的阳性细胞.通过RT-PCR和Western Blot技术对成功构建的4个shRNA干扰质粒进行有效性筛选,分析其CTGF mRNA及蛋白表达水平.结果:酶切证实转录shRNA的目的基因片段已成功克隆入载体,经测序证明与设计的相同;在转染成纤维细胞48h后,与空白对照组比较,有3组细胞CTGF mRNA及蛋白表达水平明显降低;而转染非特异阴性质粒对照组CTGF mRNA及蛋白表达水平无明显变化.结论:成功构建并筛选出靶向大鼠CTGF的shRNA真核表达质粒重组体,为进一步进行体内外心肌纤维化的RNA干扰研究奠定了基础.
- 郎明健曾秋棠郭敏杨汉东闵新文
- 关键词：结缔组织生长因子RNA干扰心内膜心肌纤维化
- 右颈内静脉留置导管致室性心律失常一例被引量：1
- 2015年
- 心脏换瓣术后的室性心律失常多数与手术创伤、应激、电解质紊乱及心脏自身病变等有关,但是个别可能与中心静脉留置导管有关。本院发生1例与右颈内静脉留置导管相关的室性心律失常,现报道如下：1病例简介朱某某,男,25岁,身高168 cm,主因“劳累后乏力、气促3年”入本院心脏病中心。
- 许浩杨汉东闵新文
- 关键词：颈内静脉留置导管室性心律失常
- NR6A1过表达腺病毒载体构建及在血管平滑肌细胞中的表达被引量：3
- 2012年
- 目的:构建核受体家族分子NR6A1重组腺病毒载体,观察NR6A1蛋白在血管平滑肌细胞中的表达。方法:从cDNA文库中,利用PCR方法钓取目的基因NR6A1,采用In-Fusion克隆技术将目的基因插入腺病毒穿梭质粒pDC315-3FLAG,将重组质粒与辅助包装质粒pBHG loxΔE1,3 Cre共转染HEK293细胞,整合包装成重组腺病毒。运用蛋白免疫印迹技术检测NR6A1蛋白表达水平;运用免疫荧光化学技术检测NR6A1蛋白在平滑肌细胞中的亚细胞定位。结果:通过In-Fusion技术获得pDC-NR6A1-3FLAG阳性质粒,该质粒在HEK293细胞中重组成腺病毒Ad-NR6A1;蛋白免疫印迹技术发现pDC-NR6A1-3FLAG重组质粒及Ad-NR6A1均能够正确表达NR6A1蛋白;而且该蛋白定位于培养的血管平滑肌细胞核中。结论:In-Fusion技术能够高效克隆NR6A1基因,所构建的NR6A1过表达腺病毒能够正确表达NR6A1核蛋白,NR6A1定位于血管平滑肌细胞核中。
- 张亚辉钱航张志峰杨汉东闵新文郎明健张鹏
- 关键词：平滑肌细胞
- 小鼠Pim-3基因siRNA慢病毒载体的构建及表达
- 2012年
- 目的:本研究拟构建针对Pim-3基因的siRNA慢病毒载体,诱导靶细胞中Pim-3基因沉默。方法:分析Pim-3 mRNA序列特征,根据siRNA设计原则,设计并合成特异性针对小鼠Pim-3的siRNA靶DNA序列及阴性对照序列。用限制性核酸内切酶将pGCSIL-GFP载体线性化,将寡DNA片段退火成含有粘性末端的DNA双链后,与慢病毒骨架质粒连接转化至大肠杆菌中进行重组,运用PCR技术筛选阳性克隆并测序,得到pSC-Pim-3 shRNA质粒。采用脂质体将pSC-Pim-3 shRNA质粒和辅助包装质粒共转染到HEK293细胞中包装形成慢病毒。采用倍比稀释法测定慢病毒滴度。慢病毒感染NIH3T3细胞,运用实时定量PCR技术检测Pim-3基因mRNA表达水平,运用蛋白免疫印迹技术检测Pim-3蛋白表达水平。结果:酶切后获得7.5 kb的pGCSIL-GFP片段。DNA片段成功连接到pGCSIL-GFP载体;重组慢病毒的滴度约为2×109TU/mL。慢病毒能够高效感染靶细胞,并显著抑制内源性Pim-3基因的mRNA(抑制率超过70%)和蛋白(抑制率超过80%)表达。结论:针对Pim-3基因靶序列CCTCTTCGACT-TCATCACT的shRNA重组慢病毒能够有效沉默靶细胞Pim-3基因。
- 陈继舜钱航杨汉东闵新文郎明健张鹏
- 关键词：PIM-3RNA干扰慢病毒载体
- 联合检测新型胰岛素抵抗指数与系统性炎症反应指数与冠心病相关性的初步探究被引量：2
- 2023年
- 目的 探究新型胰岛素抵抗指数(METS-IR)与系统性炎症反应指数(SIRI)与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关系,以及是否可以用以上简便指标预测冠心病的发生。方法 回顾性纳入2021年1月至2022年6月因胸痛在国药东风总医院住院并进行冠脉造影检查的482例患者,排除2型糖尿病及入院前服用调脂药物的患者,根据冠状动脉造影检查的结果将患者分为冠心病组与对照组。记录两组患者的空腹血糖、甘油三酯、中性粒细胞、淋巴细胞等生化指标并计算METS-IR与SIRI,分析METS-IR、SIRI与冠心病的相关性,采用二元Logistic回归分析方法确定冠心病的独立危险因素,借助受试者操作特征(ROC)曲线得到METS-IR、SIRI及两者联合检测诊断冠心病的最佳界限值及对应的灵敏度及特异性,以此来评价各指标对于冠心病的诊断价值及预测该疾病的能力。结果 冠心病组和对照组比较,METS-IR和SIRI均升高(P<0.05)。提示以上两种指标升高均有患冠心病的风险。Logistic回归结果显示METS-IR、SIRI均为独立的冠心病危险因素,METS-IR、SIRI及两项联合检测评估冠心病的曲线下面积(AUC)分别为(0.632、0.633、0.696),两者联合检测的灵敏度及特异性均较单一指标检测的高。结论 METS-IR、SIRI与冠心病的发生存在密切关系,两者联合检测的风险评估能力更强,诊断准确度最高,相较于冠脉造影有创侵入性操作来说,以上指标的获得更加便利,有助于冠心病的早发现、早治疗、早预防。
- 李清妹钱航李东锋陈继舜肖金平闵新文杨汉东陈俊许浩
- 关键词：冠心病
- 自主神经功能异常与阵发性心房颤动的关系被引量：4
- 2006年
- 目的：探讨自主神经活动在阵发性心房颤动发作前后的变化及其与阵发性心房颤动的关系。方法：在动态心电图上测量分析了25例阵发性房颠患者53阵次心房颤动发作前后及白天（6：00～22：00）和夜间（22：00～6：00）的心率变异指标（SDNN、LF、HF、LF／HF）的变化。结果：房颠发作前5minSDNN、HF较终止后5min显著升高（P〈0．01），LF／HF显著降低（P〈0．05），LF无变化；LF、HF白天均高于夜间（分别为P〈0．05和P〈0．01），夜晚LF高于HF（P〈0．05），白天与夜间SDNN、LF／HF无差异，白天LF与HF无差异。结论：阵发性心房颤动患者白天迷走神经张力增强；迷走神经张力变化是阵发性房颤发作争终止的重要原因。
- 冯应君杨汉东闵新文李华义
- 关键词：自主神经系统疾病
- 住院病案与患者隐私保护研究被引量：2
- 2010年
- 住院病案中的一般项目包括患者身份证号码、工作单位、户口地址、电话号码等资料是属于患者的隐私,但与患者疾病没有关系,与患者的诊断及疾病的转归没有关系,因此,应改革病历书写制度,删除住院病历中部分一般项目,以保护患者隐私。
- 余红星杨汉东
- 关键词：病案隐私实名制伦理学
