杨辉
- 作品数：26 被引量：67H指数：5
- 供职机构：深圳市龙岗区人民医院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金东莞市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用果蝇S2细胞高效表达甲型H1N1流感病毒可溶性HA蛋白及其活性分析被引量：1
- 2013年
- 目的应用果蝇s2细胞表达甲型H1Nl流感病毒可溶性HA蛋白，并评估其免疫活性。方法以甲型H1N1流感A／Shenzhen／7I／09病毒株作为模版，采用RT-PCR技术扩增HA基因，构建持续性表达载体pAC5．1-HA，协同筛选载体pCoblast共转染至s2细胞，通过Blasticindin抗生素筛选获得稳定转染的s2细胞株。利用WesternBlot技术鉴定细胞上清HA蛋白表达，使用Ni亲和柱纯化重组HA蛋白。使用HA免疫BALB／c小鼠3次，利用ELISA检测HA特异性抗体效价。结果成功克隆A／Shenzhen／7I／09HA基因，长度约1．7×10^3bp。将HA基因克隆入pAC5．1-V5／His载体，经过转染、抗生素筛选后获得稳定表达HA的s2细胞株，目的蛋白以分泌形式表达于上清，相对分子质量约75×10^3D。免疫小鼠后可诱导机体产生抗HA特异性抗体，免疫后10d、30d效价分别为1：1280、1：5120。结论获得可溶性表达的HA蛋白，并具有良好的免疫活性，为后期流感免疫诊断试剂的研制、亚单位疫苗的开发、单克隆抗体的制备奠定了基础。
- 姚思敏林巧张国良杨辉邓小凤聂广郑学宝刘映霞
- 关键词：果蝇属流感病毒A型血凝素类
- IL-1B基因多态性与甲型H1N1流感温邪传变模式的相关性
- 2012年
- 目的:探讨白细胞介素-1B基因多态性与甲型H1N1流感温邪传变模式的关系。方法:建立基于飞行时间质谱技术的SNP分型方法,检测167例甲流患者和192例健康对照人群IL-1B基因rs1143623和rs16944位点多态性,将甲流患者辨证分型为温邪不传、顺传和逆传3种模式,比较不同人群等位基因频率差异。结果:rs16944位点具有A和G两种等位基因,A等位基因频率在健康对照、不传型、顺传型和逆传型人群分别为49.5%、60.2%、62.5%和71.4%,甲流3种传变模式人群A等位基因频率均显著高于健康对照(P=0.016,P=0.013,P=0.025)。rs1143623位点等位基因频率在不同人群中差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-1B基因rs169441位点多态性与甲型H1N1流感温邪传变模式相关,A等位基因为易感基因,可以作为甲流中医辨证分型的分子遗传标签。
- 张国良聂凡杨辉吴其恺聂广
- 关键词：白细胞介素-1B甲型H1N1流感基因多态性
- ABCA1基因功能性SNP对糖尿病患者胰岛β细胞功能的调控作用被引量：2
- 2019年
- 目的探究ABCA1基因功能性SNP对糖尿病患者胰岛β细胞功能的调控作用。方法选取我院2015年12月-2017年4月收治的糖尿病患者332例,按胆固醇情况分为对照组和实验组,检测各生化指标并进行DNA提取和PCR测定,比较生化指标差异及其相关性,比较各功能性SNP基因频率。结果 TG、TC、HDL-C、INS、CP是与胰岛β细胞功能有关的独立影响因素,多态性位点rs2020927基因频率在对照组和实验组之间存在显著差异(P<0.05),而等位基因位点在两组之间无明显差异(P>0.05)。结论 ABCA1基因多态性位点rs2020927可能与糖尿病患者胰岛β细胞功能缺陷有关。
- 李观强杨辉洪雄新万彦彬李小峰陈玉华
- 关键词：三磷酸腺苷结合盒转运体A1基因多态性胰岛Β细胞
- 高分辨率熔解曲线技术在结核耐药检测中的应用进展被引量：2
- 2012年
- 结核病是严重危害人们健康的重大公共卫生问题和社会问题[1]。为此大量研究人员致力于快速诊断结核分枝杆菌耐药的研究。高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）技术是一种基于核酸的物理性质,使用饱和染料反映核酸的熔解曲线变化来进行分析的技术,其不受突变碱基位点和种类的局限,既可以对未知突变进行筛查、扫描,也可以对已知突变进行分析。
- 杨辉张国良张明霞
- 关键词：高分辨率熔解曲线结核分枝杆菌耐药
- 白细胞介素-1β基因多态性与新型甲型H1N1流感的关系被引量：1
- 2012年
- 目的探讨白细胞介素-1β（IL-1β）基因单核苷酸多态性（SNP）与新型甲型H1N1流感易感性的关系。方法针对IL-1β基因5’端的4个SNP位点（rs1143623,rs1143639,rs16944,rs3917345）,使用飞行时间质谱分析技术（TOF-MS）对167例H1N1流感组患者和192例健康对照组人群检测其基因多态性。结果rs16944有A和G两种等位基因,H1N1组A等位基因频率为61.9%,对照组为49.5%,差异有统计学意义（χ2=10.761,P=0.001,OR=0.602,95%CI0.444~0.816）;rs1143639有G和A两种等位基因,G等位基因频率在H1N1组中为95.5%,对照组为98.7%,差异也有统计学意义（χ2=6.708,P=0.0096,OR=3.564,95%CI 1.281~9.917）;其余两个位点在两组人群间无统计学意义。结论rs16944和rs1143639位点与新型甲型H1N1流感易感性相关。
- 杨辉张国良汪文斐陈心春郑学宝吴爱武
- 关键词：白细胞介素-1Β单核苷酸多态性甲型H1N1流感
- 飞行时间质谱法研究IL-1B基因多态性与甲型H1N1流感温邪传变模式的相关性
- 目的:探讨白细胞介素-1B基因多态性与甲型H1N1流感温邪传变模式的关系。方法:建立基于飞行时间质谱技术的SNP分型方法,检测167例甲流患者和192例健康对照人群IL-1B基因rs1143623和rs16944位点多态...
- 张国良杨辉吴其恺聂广
- 某地区结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药相关基因突变特征分析被引量：11
- 2012年
- 目的了解深圳地区结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼的耐药相关基因的突变特点。方法 60株结核分枝杆菌临床分离株通过全自动快速分枝杆菌培养鉴定系统(BACTEC-MGIT960)进行鉴定和药敏分析。在这60株菌株中,针对包括利福平耐药决定区(RRDR)在内的rpoB基因和异烟肼耐药相关位点katG315、inhA-15、kasA269、kasA312进行PCR扩增,并将扩增产物T-A克隆后进行测序。结果在60株结核分枝杆菌临床分离株中,检出利福平耐药株45株,敏感株15株;异烟肼耐药株41株,敏感株19株;利福平和异烟肼同时耐药的有14株。在45株利福平耐药株中,rpoB基因RRDR突变发生率为91.1%(41/45),共检测到12种突变形式,主要突变位点在531、526、516、533,以Ser531Leu突变最常见,占rpoB发生基因突变株的51.2%(21/45)。在41株异烟肼耐药株中,katG315位点有29株发生突变,包括28株katG315(AGC-ACC)和1株katG315(AGC-AAC)突变,突变发生率为70.7%(29/41);inhA-15位点有9株发生突变,均为(C-T)突变,突变发生率为21.95%(9/41)。kasA基因未发现常见突变形式。结论深圳地区结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药相关基因突变位点与国内外研究基本一致,但各位点频率有所不同。
- 杨辉张国良张明霞陈心春陈建波吴爱武
- 关键词：药物耐受性突变
- 102例非结核分枝杆菌感染临床和CT影像学特征被引量：4
- 2022年
- 目的 分析102例非结核分枝杆菌(NTM)感染临床特征和炎性指标变化及CT影像学表现。方法 选取2018年7月-2020年12月深圳市第三人民医院、深圳市龙岗区人民医院收治的疑似肺结核患者568例,分析胸腔积液标本NTM分离情况,观察NTM患者胸部CT影像表现,硝基苯甲酸和噻吩-2-羧酸肼法鉴定菌型,基因芯片法鉴定NTM菌种。分析炎症指标C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数、血沉水平差异。结果 568例患者共检出102例非结核分枝杆菌肺病(NTM-PD)患者;NTM-PD患者主要检出脓肿分枝杆菌52株占50.98%、其次为胞内分枝杆菌24株占23.53%;患者既往患有结核病史(57.84%)和支气管扩张(22.55%);患者出现咳嗽咳痰症状最多(75.49%);患者胸部影像学表现最多的是类支气管扩张(36.27%);其次是肺部空洞(35.29%)和结节(34.31%)。脓肿分枝杆菌感染肺病患者白细胞计数高于胞内分枝杆菌和鸟分枝杆菌感染肺病患者(P<0.05)。胞内分枝杆菌感染患者CRP水平高于脓肿分枝杆菌和鸟分枝杆菌感染肺病患者(P<0.05),血沉低于脓肿分枝杆菌和鸟分枝杆菌感染肺病患者(P<0.05)。结论 NTM-PD与MTB肺病患者临床特征和CT影像具有一定差异性和相似性,临床诊断两者可结合患者临床特征及CT影像学综合鉴别。
- 李观强叶涛生傅向东万彦彬杨辉张国良
- 关键词：非结核分枝杆菌炎性指标CT影像学
- 2型糖尿病患者ABCA1、PPARγ、SREBP、ADPN、LXRα表达水平及临床价值研究被引量：3
- 2018年
- 目的探讨2型糖尿病患者中三磷酸腺苷(ATP)结合盒转运体A1(ABCA1)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、脂联素(ADPN)、小鼠肝X受体α(LXRα)表达水平及其临床价值。方法选自该院于2015年6月至2017年6月期间收治的2型糖尿病患者71例作为观察组;另选自该院于2015年6月至2017年6月期间健康体检者60例作为对照组。清晨空腹采集受试者外周静脉血,分离血清,采用放射免疫法测定血清人ADPN含量,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法测定血清ABCA1、PPARγ、SREBP及LXRα含量。结果观察组血清ABCA1和ADPN含量低于对照组,而血清PPARγ、SREBP和LXRα含量高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);ABCA1+PPARγ+SREBP+ADPN+LXRα五项联合检测灵敏度和特异度高于ABCA1、PPARγ、SREBP、ADPN和LXRα单独检测。结论 2型糖尿病患者ABCA1和ADPN表达下降,而PPARγ、SREBP和LXRα表达上升,ABCA1+PPARγ+SREBP+ADPN+LXRα五项联合检测具有较高的灵敏度和特异度,具有重要的临床研究价值。
- 李观强杨辉洪雄新万彦彬李小峰郭中秋张秋霞杨素珍
- 关键词：ATP结合盒转运体A1固醇调节元件结合蛋白
- 白细胞介素-1β基因启动子-31位点单核苷酸多态性与甲型H1N1流感易感性的关联分析
- 2012年
- 目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)基因启动子-31位点单核苷酸多态性(SNP)与甲型H1N1流感易感性的关系。方法采用病例-对照研究方法,应用TaqMan探针技术,对167例H1N1流感患者和192例健康对照人群IL-1β基因-31位点进行等位基因分型,比较两组人群基因型分布及频率差异。结果 IL-1β基因-31位点具有T和C两种等位基因,其中H1N1流感组T、C等位基因频率分别为38.3%和61.7%,对照组T、C等位基因频率分别为54.4%和45.6%,两组差异具有统计学意义(P<0.001,OR=1.922,95%CI 1.426-2.590)。结论 IL-1β基因启动子-31多态性位点与甲型H1N1流感易感性相关,C等位基因是甲型H1N1流感易感基因。
- 林巧张国良杨辉刘腊香刘映霞刘晋洪
- 关键词：白细胞介素-1ΒTAQMAN探针甲型H1N1流感单核苷酸多态性
