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富勒烯对PCR反应的抑制作用被引量：3: 2008年; 以110bp单链DNA为模板,研究富勒烯(C60)对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的影响.实验结果表明,随着C60浓度的增加,PCR反应被显著抑制;将Taq DNA聚合酶、单链DNA模板与C60孵育后,其PCR扩增产物均显著减少;增加PCR反应体系中的Taq DNA聚合酶量,可消除C60的抑制作用,但增加起始单链DNA模板的数量,效应不明显.上述研究结果说明,C60不仅可抑制Taq DNA聚合酶活性,同时对DNA模板也具有一定的损伤作用.; 张捷林燕汪畅梁勇江桂斌周群芳; 关键词：富勒烯 TAQ DNA聚合酶 PCR DNA模板

富勒烯(C60)对核酸分子的损伤效应研究: 碳纳米材料的毒性效应日益受到广泛关注。在本研究中，利用不同实验方法和设计多种反应条件(温度，时间和离子强度等)，来检测富勒烯(C60)以及C60Cu2+在避光条件下对质粒DNA构象的影响;并且以mRNA的reverse ...; 林燕; 关键词：富勒烯核酸分子毒性作用分子机制

C_(60)/Cu^(2+)影响质粒DNA构象的复合效应研究: 2012年; 碳纳米材料的毒性效应日益受到广泛关注,通过比较研究多种非光催化条件下,富勒烯(C60)/Cu2+共存时对质粒DNA构象影响的复合作用,借以评估碳纳米材料的毒性效应。实验结果显示在非光催化条件下,C60/Cu2+可显著诱导DNA构象从超螺旋DNA转变成开环DNA,并且这种剪切效应随C60和Cu2+浓度的升高而增强;断裂后的DNA片段可重新被T4DNA连接酶连接成环状DNA,这说明C60/Cu2+的剪切位点为磷酸二酯键。另外,多种活性氧捕获剂均不能有效消除C60/Cu2+对DNA的剪切作用,这与Cu2+在DNA裂解中起主要作用相关。上述研究结果表明在非光催化条件下,C60/Cu2+可有效诱导DNA断裂,具有明显的复合效应,其潜在的基因毒性值得关注。; 李佳林燕李准洁李正梁勇; 关键词：CU2+C60 ROS

不同分子量PVP对PCR扩增反应效率的影响被引量：2: 2012年; 以人为设计的110bp单链DNA为模板,研究不同分子量聚乙烯基吡咯烷酮(Polyvinyl-pyrrolidone,PVP)对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的影响。实验结果表明:0.5%的PVP K-30、PVP 8000、PVP 58000和PVP 630000均可显著提高PCR效率,并且这4种化合物提高PCR效率的能力,依次为PVP 630000>PVP 58000>PVP K-30和PVP 8000;然而,在相同浓度时,PVP K-40却显著抑制PCR扩增反应;另外,溶解曲线的实验结果显示,0.5%PVP 630000可显著降低PCR产物的Tm值,表明PVP 630000可通过与DNA相互作用,降低DNA结构稳定性,使得模板更易在PCR的变性阶段解链,最终提高PCR效率。上述研究结果表明,不同分子量的PVP对PCR扩增效率的影响不同,与其分子量大小密切相关。; 李佳林燕姚晶蒋琳李正梁勇; 关键词：荧光定量PCR DNA构象

聚乙烯基吡咯烷酮对质粒DNA降解效应的研究: 2011年; 为评估聚乙烯基吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone,PVP)的生物可利用性,研究了不同相对分子质量PVP对闭合环状双链质粒DNA pBR322的降解效应.实验结果表明:在常温、非光催化条件下,相对分子质量小的PVP(PVP8000)可引起质粒DNA构象的改变,并且这种效应与反应温度、反应时间及PVP的相对分子质量和浓度相关;另外,在反应体系中加入不同浓度的甲酰胺,PVP 8 000的DNA剪切效应可被显著抑制,结果表明在一定程度上,PVP的表面性质以及DNA构象的稳定性是影响DNA降解的主要因素.; 林燕姚晶李佳蒋琳李正梁勇; 关键词：PVP DNA构象质粒DNA

副猪嗜血杆菌无动物源冻干保护剂及其制备方法和应用: 本发明公开了一种副猪嗜血杆菌无动物源冻干保护剂及其制备方法和应用，它的各组分重量百分比为：蔗糖：2％～8％，甘露醇：0.5％～4％，聚乙烯吡咯烷酮：0.25％～3％，右旋糖酐：2％～6％，余量为超纯水。该方法将聚乙烯吡咯...; 蔡旭旺蔡国华刘世强戴昕燕张迪冯师帆林燕王智超顾嘉运徐晓娟; 文献传递

三种纳米金颗粒对聚合酶链式反应扩增效率和特异性的影响被引量：5: 2012年; 比较了采用柠檬酸三钠(Trisodium citrate,Na3Ct)还原法、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone,PVP)包裹法和巯基丙酸-同型半胱氨酸(Mercaptopropionic Acid-Homocystine,MPA-HCys)包裹法制备的3种纳米金颗粒(Gold nanoparticles,AuNPs)对聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增效率及特异性的影响,以评估金纳米材料表面性质与DNA生物大分子之间的相互作用.实验结果显示,3种AuNPs均能显著提高PCR效率,它们提高PCR效率的能力依次为:Na3 Ct-AuNPs(12 nm)>MPA-HCys-AuNPs(12 nm)>PVP-AuNPs(4 nm),而且这种增强效应与其浓度和尺寸相关.相同实验条件下,具有相似尺寸大小的Na3Ct-AuNPs比MPA-HCys-AuNPs更能有效提高PCR效率,这说明AuNPs的表面性质也是影响PCR效率的重要因素之一.另外,3种AuNPs均能有效消除竞争性引物对PCR的抑制作用,并且这种作用与其浓度密切相关.上述研究结果表明,具有不同表面性质的3种AuNPs均能有效提高PCR效率和特异性,并且这种作用与其浓度、尺寸和表面性质密切相关.; 姚晶林燕李佳周群芳梁勇; 关键词：PCR 特异性 DNA

东亚正钳蝎毒素基因BmKbpp的原核表达及其抗菌功能初步鉴定被引量：2: 2012年; 一级结构分析和二级结构预测表明无二硫键蝎毒液多肽(NDBPs)BmKBPP具两亲性α-Helix结构,含有大量带净正电荷的碱性残基(Arg和Lys),符合多价阳离子抗菌肽的典型特征。采用PCR法和质粒载体pGEX-5X-1构建BmKbpp、EGFP及BmKbpp/EGFP与GST的原核融合表达载体,3个表达载体与pGEX-5X-1分别在Rossetta(DE3)菌中进行表达,并测定4个Rossetta(DE3)表达工程菌诱导表达的生长曲线。结果表明,BmKBPP是一个具有很强抑菌功能的抗菌肽,GST、BmKBPP及EGFP3个蛋白一起融合表达可获得少量蛋白的表达,这将为后续的功能研究和应用研究奠定基础。; 罗锋李正范丽梅梁勇林燕蒋琳; 关键词：蝎毒素抗菌肽原核表达

富勒烯(C_(60))对RNA逆转录的影响: 2013年; 目的:研究富勒烯(C60)对RNA逆转录(Reverse Transcription,RT)反应的影响。方法:以斑马鱼鱼肝mRNA为模板,在M-MLV逆转录酶作用下合成cDNA,并在RT反应体系中添加不同浓度的C60,分别研究C60对M-MLV逆转录酶和RNA构象的影响。结果:100μg/mL C60可显著抑制RT反应,抑制效应与C60浓度相关,但增加M-MLV逆转录酶量可以有效逆转C60对RT的抑制作用。C60与RNA在37℃避光孵育12 h后,C60可特异降解28S rRNA,同样具有浓度依赖性。结论:C60不仅可显著抑制M-MLV逆转录酶活性,而且对RNA也具有一定的损伤作用,C60具有潜在的基因毒性。; 李佳林燕陈敏杰张捷李正梁勇; 关键词：逆转录 RNA

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林燕