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游仆虫Rab蛋白基因的克隆表达与纯化被引量：13: 2004年; 为对单细胞原生动物纤毛虫中Rab蛋白的功能进行研究 ,进而探讨以胞吞和胞吐为主要物质交换途径的纤毛虫中囊泡定向运输的机理 .利用PCR技术从游仆虫大核DNA及cDNA中扩增出rab基因 ,并进行了序列分析 ,该基因全长为 783bp ,两端为端粒序列 ,编码框为 6 2 4bp ,编码 2 0 7个氨基酸 ,开放读框中有 3个TGA ,在此编码半胱氨酸 .利用定点突变将rab基因中 3个TGA突变为通用半胱氨酸密码子TGC .将游仆虫Rab蛋白基因构建于原核表达载体pGEX 4T 2中 ,得到的重组质粒pGEX Eorab1转化至大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,IPTG诱导表达 .表达产物与抗GST抗体在 4 9kD处有很强的交叉反应 .融合蛋白GST EoRab1通过亲和层析柱纯化和凝血酶的切割 ,再经两步纯化得到电泳纯的游仆虫Rab蛋白 .; 樊俊蝶王伟柴宝峰智慧梁爱华; 关键词：游仆虫 RAB蛋白克隆纯化 WESTERN印迹纤毛虫

Sema4C在神经干细胞中的表达: 2007年; 目的探讨Sema4C及其相关蛋白在神经干细胞中的表达。方法利用RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法对神经干细胞中内源性Sema4C及其相关蛋白的表达进行检测。结果Sema4C及其相关蛋白在神经干细胞中表达,并且Sema4C在神经干细胞终末分化细胞神经元中表达,但在星形胶质中不表达。结论Sema4C及其相关蛋白在神经干细胞中表达,提示Sema4C及其相关蛋白可能在神经干细胞中起作用。; 樊俊蝶朱玲玲赵彤吴海涛范文红范明; 关键词：神经干细胞

Sema4C在神经干细胞发育中的表达与功能研究: 本研究突破了Semaphorins家族分子在轴突导向方面的研究模式，就Sema4C在神经干细胞发育中的表达与功能进行了探讨。采用RT-PCR和western blot方法检测Sema4C在NSC及其分化过程中...; 樊俊蝶; 关键词：神经干细胞发育过程; 文献传递

八肋游仆虫rab基因的克隆与表达: 真核细胞中细胞器在空间上分布不同,各细胞器之间通过复杂的囊泡运输和微管系统进行物质交换和信息传递.Rab蛋白作为真核细胞中各细胞器之间囊泡运输的分子开关,在囊泡运输的不同阶段调节囊泡特定的运输途径.纤毛虫是单细胞的原生动...; 樊俊蝶; 关键词：纤毛虫 RAB蛋白游仆虫基因构建; 文献传递

低氧对人骨髓间充质干细胞基因表达谱的影响被引量：2: 2007年; 低氧可以促进人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stem cells,hMSCs)增殖。为探讨其可能机制,本实验采用cDNA芯片技术动态检测低氧促进hMSCs增殖过程中基因表达的变化,用RT-PCR验证芯片结果。结果显示,在含21 329条基因探针的芯片上,检测到282个基因差异表达,其中代谢类基因最多;差异表达基因的数目随低氧时间不同而变化,其中24 h时差异表达基因的数目最多。差异表达基因中4个为已知的低氧诱导因子-1(hypoxia- inducible factor 1,HIF-1)靶基因,在低氧处理36 h时都基本上调。此外,差异表达基因中有10个连续变化的基因,这些基因中既有上调基因也有下调基因。4个HIF-1靶基因和连续变化的基因的RT1-PCR结果大部分与cDNA芯片结果一致。结果提示,低氧促进hMSCs增殖是多基因参与的过程,可能与HIF-1及其下游信号通路有关。; 吴恩惠李海生赵彤樊俊蝶马鑫熊雷李伍举朱玲玲范明; 关键词：低氧人骨髓间充质干细胞 CDNA芯片差异表达基因

Rab蛋白的结构、功能及进化被引量：18: 2004年; Rab蛋白是小分子GTP结合蛋白家族 (smallGTP bindingproteins)中最大的亚家族 ,大约由 2 0 0个氨基酸组成 ,由保守的G结构域与高度可变的N端和C端组成。Rab蛋白作为细胞内囊泡运输的分子开关 ,与其上游调控子和下游特定的效应子相互作用 ,并与GTP的结合和水解过程相偶联 ,在囊泡运输的不同阶段发挥作用。对不同Rab蛋白调控囊泡运输的研究有利于全面理解细胞内各类囊泡定向运输的分子动力学机制。; 樊俊蝶王伟梁爱华; 关键词：RAB蛋白囊泡运输 GTP结合蛋白

Semaphorins在神经发育及突触可塑性中的作用被引量：2: 2007年; 在神经发育过程中Semaphorins为轴突导向和神经细胞的迁移提供导向信息。在成年脑中,这些导向分子通过抑制自发的或异常的轴突生长来维持已建立的神经连接,并参与突触可塑性,以及中枢神经受损后抑制神经再生与神经细胞的死亡。本文主要介绍Semaphorins在神经发育及突触可塑性中的作用。; 樊俊蝶朱玲玲范文红范明; 关键词：SEMAPHORINS 轴突导向细胞迁移神经再生

人Sema4C重组腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12中的表达: 2007年; 利用Ad5腺病毒载体系统构建人Sema4C基因重组腺病毒表达载体并在成肌细胞系C2C12中表达,并初步探讨Sema4C基因在成肌发育过程中的可能作用。利用脂质体介导重组腺病毒载体转染HEK293细胞,包装出完整的腺病毒;将重组腺病毒载体感染C2C12成肌细胞后,利用激光共聚焦显微镜观察发现12h即有绿色荧光表达,24h后绿色荧光蛋白表达最强;流式细胞仪检测病毒的感染效率几乎达100%。WB检测结果表明感染重组腺病毒载体组C2C12细胞Sema4C蛋白的表达量明显高于空载体对照组(P<0.01)。为了进一步观察Sema4C基因对C2C12细胞增殖分化的影响,流式细胞仪检测了病毒感染48h后C2C12细胞的增殖指数,并对感染后诱导分化的C2C12细胞的分化情况进行了观察。结果首次表明,过表达外源性人Sema4C基因不仅能使C2C12细胞的G0/G1期比例增加,细胞的增殖指数下降,同时在分化培养条件下还能促进C2C12细胞肌管的形成。; 吴海涛刘淑红吴燕樊俊蝶范文红范明; 关键词：腺病毒载体成肌细胞 C2C12 增殖指数

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樊俊蝶