江勇
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院饲料研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 免疫再生素对仔猪生产性能及免疫指标的研究被引量：1
- 2007年
- 常文环江勇蔡辉益姜树林杨磊
- 关键词：动物生产性能免疫指标食品安全意识仔猪饲料安全有毒有害物质
- 北京油鸡肠道肽转运蛋白PEPT1表达载体的构建及在293-T细胞的表达被引量：2
- 2008年
- 本试验通过分子生物学手段建立了北京油鸡PEPT1细胞模型。根据GenBank的原鸡PEPT1保守区序列设计引物,从北京油鸡肠道粘膜组织中扩增出PEPT1基因,将其与pGEM-T载体连接并测定核苷酸序列,成功获得到测序正确的2145bp的基因,并将北京油鸡肠肽转运载体PEPT1基因克隆到真核表达载体pcDNA3.0,构建了真核表达载体pcDNA3-PEPT1。采用脂质体介导将表达质粒pcDNA3-PEPT1转染293-T细胞,同时转染pcDNA3.0-EGFP荧光蛋白进行转染体系荧光监测,流式细胞术检测转录后16、20、24h的荧光强度。分别在16、20、24、44h收集等量转染细胞,抽提转染细胞总RNA,DNAseⅠ处理残留的DNA污染,反转录合成cDNA,以构建不同稀释度的pGEM-T-PEPT1质粒为模板,建立SYBERGREEN实时荧光定量标准曲线,检测PEPT1在293-T细胞中的转录水平。结果表明,在质粒转染入293-T细胞后,在16、20、24、44h均有稳定的转录水平。从而建立了在293-T细胞表达北京油鸡PEPT1的外源模型,同时为研究该转运蛋白性质,进一步调控动物肠道肽的吸收奠定了基础。
- 江勇蔡辉益刘国华李勇张姝常文环郑爱娟
- 关键词：北京油鸡克隆
- 鸡PEPT1抗原表位基因的原核表达及序列鉴定被引量：2
- 2008年
- 根据GenBank的原鸡PEPT1基因保守区序列设计引物,PCR扩增得到PEPT1基因抗原表位区序列,将该序列定向克隆至pET22b(+)载体上,成功构建了pET-22b-PEPT1重组质粒。重组质粒在原核表达宿主Rosetta(DE3)中诱导表达出PEPT1抗原表位区蛋白,纯化的表达产物经过质谱分析鉴定,为进一步生产鸡肽转运载体PEPT1的特异性抗体奠定了基础。
- 江勇蔡辉益刘国华李勇张姝
