汪涛 作品数:21 被引量:51 H指数:5 供职机构: 九江学院 更多>> 发文基金: 江西省教育厅科学技术研究项目 国家自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
地塞米松对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫作用的影响 2014年 目的研究地塞米松(Dexamethasone,DXM)对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫感染的影响。方法采用瑞-姬染色观察弓形虫在与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞内的增殖;以半定量RT-PCR法检测与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞IFN-γ、TNF-α和IL-2mRNA的表达,以ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ、TNF-α和IL-2的含量。结果弓形虫在DXM孵育的腹腔巨噬细胞内大量增殖,其弓形虫密度0h为(37±7)个/100个细胞,而24h时为(173±32)个/100个细胞(P<0.01);与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞24h时的IL-2、IFN-γ和TNF-αmRNA及其蛋白的表达与对照组相比均明显降低(P<0.01),如:DXM孵育组的TNF-α(187.52±39.41pg/ml)与对照组(115.43±22.46pg/ml)相比差异显著(P<0.01)。结论 DXM可诱发腹腔巨噬细胞易感弓形虫,其机制可能与细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2表达下调有关。 汪涛 李金福 王伟业 李兴暖 周小鸥 赵志军关键词:地塞米松 大鼠腹腔巨噬细胞 弓形虫 细胞因子 咽侧体提取物成分诱导散居型雄性蝗虫表皮变黄(英文) 2012年 黄色蛋白(yellow protein,YP)对雄性成年蝗虫的黄色表皮形成起着重要作用,而此过程需要有高量的保幼激素(juvenile hormone,JH)存在的条件下才会发生.而对于蝗虫大脑中是什么因素激活JH的合成,目前仍属未知.给散居型蝗虫注射L.migratoria蝗虫咽侧体(corpora allata,CA)提取物后,肉眼观察表明:散居型蝗虫表皮变黄.此后的定量PCR实验证实了散居型蝗虫表皮变黄是因为YP的(表达或存在).这暗示着黄色蛋白沉淀于散居型蝗虫的表皮.因此我们可以得出结论:给散居型蝗虫注射CA提取物,可以引发YP-mRNA的表达,CA提取物中有激活JH合成的因子. 周英棠 陈静 姜登钊 汪涛 余敬谋 余欢关键词:咽侧体 MRNA表达 猪链球菌2型MRP和EF双基因共表达重组腺病毒载体的构建 2013年 旨在构建猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF)双基因共表达重组腺病毒载体。根据猪链球菌2型MRP和EF的基因序列设计合成2对引物,以猪链球菌2型基因组为模板,扩增MRP基因(第1 801-2 513位)和EF基因(第1 783-2 563位)序列,并克隆到pMD18-T载体。然后将MRP基因、IRES元件和EF基因依次定向克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-MRP-IRES-EF,再经PmeⅠ酶切,然后转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞中,经同源重组获得重组腺病毒载体质粒rAdeno-CMV-MRP-IRES-EF。PacⅠ酶切线性化该重组腺病毒载体质粒,再转染AD-293细胞进行病毒包装,最后对细胞包装的病毒液进行PCR鉴定。结果表明,克隆的MRP和EF基因测序正确,酶切重组穿梭质粒和腺病毒载体质粒得到特异酶切产物;线性化的重组腺病毒载体质粒rAdeno-CMV-MRP-IRES-EF转染AD-293细胞6 d后也出现明显的细胞病变(CPE),在培养细胞的上清病毒液中也检测到了MRP和EF基因片段。 汪涛 余辉 梅钧 李兴暖 周小鸥 赵志军关键词:猪链球菌2型 溶菌酶释放蛋白 双基因共表达 重组腺病毒载体 大鼠巨噬细胞感染弓形虫的基因表达谱分析 被引量:2 2016年 目的分析大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫RH株的基因表达谱差异。方法以弓形虫RH株速殖子感染SD大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞0h、6h后提取细胞总RNA,采用NimbleGen 12x135K微阵列基因表达分析芯片检测差异表达基因,并对部分表达变化的基因进行Real time PCR验证。结果表达分析芯片涵盖大鼠26 419个基因,对差异表达基因(Fold Change≥4.0)进行聚类分析显示,经弓形虫RH株作用6h和0h的RNA表达谱相比,大鼠肺泡巨噬细胞上调的基因有49个(主要包括Zfp90,Map4k4,Mrpl42等),下调的基因有130个(主要包括Pitx1,Chpt1,Chd6等)。大鼠腹腔巨噬细胞上调的基因有136个(主要包括Map2k3,Il17b,Phka2等),下调的272个(主要包括Tlr2,Tgfb2,Wnt2等)。GO、Pathway分析差异表达的基因,大鼠腹腔巨噬细胞能够引发更多和弓形虫有关的信号通路变化,其肺泡巨噬细胞则不能引起这一效应。Real time PCR和基因芯片检测结果一致。结论大鼠腹腔和肺泡巨噬细胞感染弓形虫不同的表现型,可能和其基因表达差异引起的信号通路变化有关。 赵志军 董辉 汪涛 郭雅琪 钟利 王姝 殷国民 林茹关键词:弓形虫 基因表达谱 弓形虫病:速殖子、包囊和卵囊的传播 被引量:7 2012年 目的弓形虫是一种世界范围内广泛分布的机会致病原虫,能感染包括人在内的所有温血动物,能引起人兽共患弓形虫病,严重威胁着人类健康和畜牧业生产。本文重点阐述弓形虫速殖子、包囊和卵囊的生物学特性和传播特点。 汪涛 汤自豪关键词:弓形虫 生物学特性 弓形虫感染与男性不育研究新进展 被引量:7 2013年 弓形虫是一种专性细胞内寄生的原虫,能感染包括人在内的所有温血动物。众所周知弓形虫感染孕妇可导致早产、流产、死胎、畸胎等严重后果,而弓形虫感染导致的男性不育却长期未受到足够重视。本文就近年来有关弓形虫感染致精子、生殖细胞的损伤以及睾酮和一氧化氮(NO)分泌的异常而致男性不育的相关研究进展进行综述。 汪涛 汤自豪关键词:弓形虫 精子 生殖细胞 睾酮 男性不育 水菠菜叶乙醇提取物对MG-63骨质疏松相关基因表达的影响 2013年 为探讨水菠菜叶乙醇提取物与抗骨质疏松作用的关系及其作用机制,用水菠菜叶乙醇提取物处理人成骨样细胞MG-63 48 h后,提取水菠菜叶乙醇提取处理组和对照组细胞的总RNA,将两组RNA纯化为mRNA,逆转录成cDNA,用Cy3和Cy5两种不同的荧光染料进行线性扩增标记,然后与骨质疏松相关基因表达谱芯片杂交,扫描后对获得的数据用LuxScan 3.0软件分析.研究发现经水菠菜叶乙醇提取物诱导后MG-63细胞的244个骨质疏松相关基因中,有c-Fos、JNK、ODF、c-src、OSCAR、RANKL、Samd4、Samd6、Samd7 9个基因表达明显上调,LRP5、Dkk1、TGFB、OPG 4个基因明显下调.结果表明水菠菜叶乙醇提取物能改变骨质疏松相关基因的表达,抗骨质疏松作用机制可能与Wnt/β-catenin蛋白信号传导途径和骨保护素/核因子受体激活信号传导途径有关,与雌激素内分泌途径无关. 江慎华 陈惠 陈静 汪涛 周英棠关键词:基因表达 骨质疏松 信号传导途径 人GNAS1基因克隆、真核表达载体的构建及瞬时转染Hela细胞 2014年 目的:克隆人GNAS1基因编码区序列、构建真核表达载体并瞬时转染Hela细胞。方法:通过RT-PCR克隆GNAS1基因编码序列,亚克隆至pMD19载体,测序鉴定正确后,通过酶切连接至真核表达载体pEGFP-N1,通过菌液PCR和酶切鉴定获得pEGFP-GNAS1重组质粒;表达载体以Lipofectamine2000介导转染Hela细胞,并用实时定量PCR检测外源基因在Hela细胞中的表达。结果:克隆到GNAS1基因并获得了pEGFP-GNAS1表达载体,在Hela细胞中获得了GNAS1的过量表达。结论:成功克隆了GNAS1基因编码序列,并构建其真核表达载体,瞬时转染至Hela细胞,为进一步深入研究Gsα蛋白生物学作用奠定基础。 李兴暖 王庭 汪涛 刘建云 熊建军 李卫东关键词:基因克隆 真核表达载体 VAP-1在H22肿瘤小鼠体内的表达与活性研究 目的:观察血管黏附蛋白-1(VAP-1)在H22肿瘤小鼠体内的表达和活性变化情况.方法:取Balb/c小鼠制备H22肿瘤模型,于造模第3、6、9天将小鼠处死,分别取肿瘤、肝脏和肺组织对VAP-1蛋白水平和SSAO活性进行... 李兴暖 于欢 汪涛 谢鑫 刘建云miRNA-140-5p在人骨髓间充质干细胞成脂分化中的表达及其靶基因的预测 被引量:5 2017年 目的筛选出人骨髓间充质干细胞(h MSCs)成脂分化中具有潜在价值的mi RNA及其靶基因,为人类成骨细胞与脂肪细胞分化平衡调控机制的深入研究提供有力实验依据。方法收集h MSCs成脂分化过程中的0、7、14、21 d的细胞样品,应用mi RNA芯片和转录组测序(m RNA-seq)技术,分析4个点细胞中mi RNA和m RNA的表达水平,并将mi RNA与m RNA的表达趋势进行关联分析,聚焦具有研究价值的mi RNA与m RNA相互调控关系,同时,采用Target Scan、Pic Tar和mi Randa等数据库进行靶基因的预测。结果发现mi R-140-5p在成脂分化中表达量呈逐渐下降的趋势,而白血病抑制因子受体(LIFR)表达量呈逐渐升高趋势,二者呈现负调控的对应关系。同时经3个靶基因数据库预测,LIFR为mi R-140-5p共有的靶基因。结论 mi RNA-140-5p可能与人骨髓间充质干细胞的成脂分化密切相关,且通过调控其靶基因LIFR的表达而参与成脂分化。 汪涛 颜瑞巧 曹俊 曹玲玲 张铉浦 李兴暖 吴萍 周小鸥 吴建芳 许晓源关键词:人骨髓间充质干细胞 成脂分化 MI 白血病抑制因子受体