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汪道涌

作品数:10 被引量:11H指数:3
供职机构:中国科学院植物研究所更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家攀登计划更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 9篇生物学

主题

  • 9篇固氮
  • 6篇棕色固氮菌
  • 6篇钼铁蛋白
  • 4篇英文
  • 3篇原子
  • 3篇原子簇
  • 3篇金属
  • 3篇金属原子
  • 3篇金属原子簇
  • 3篇固氮酶
  • 2篇突变种
  • 2篇棕色固氮菌突...
  • 2篇钼铁
  • 2篇晶体
  • 2篇晶体生长
  • 2篇变种
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇蛋白晶体
  • 1篇植物

机构

  • 10篇中国科学院植...
  • 5篇中国科学院
  • 1篇浙江大学

作者

  • 10篇汪道涌
  • 9篇黄巨富
  • 6篇董志刚
  • 6篇汪志平
  • 5篇王耀萍
  • 3篇吕玉兵
  • 2篇张华峰
  • 2篇韩毅
  • 2篇骆爱玲
  • 1篇顾淑荣
  • 1篇龚海韵
  • 1篇许祥明
  • 1篇陆建华
  • 1篇董明理
  • 1篇赵颖
  • 1篇代小虎
  • 1篇钟泽璞

传媒

  • 9篇Acta B...

年份

  • 3篇2001
  • 1篇2000
  • 3篇1999
  • 3篇1998
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
固氮酶金属原子簇对其结构和功能的影响
汪道涌
关键词:重组蛋白棕色固氮菌
PEG和盐对棕色固氮菌细菌铁蛋白和钼铁蛋白晶体生长的影响被引量:3
1998年
棕色固氮菌(OP)体内的固氮酶钼铁(MoFe)蛋白和细菌铁蛋白均为重要的生物功能蛋白。前者为生物固氮的关键酶[1],后者则可为生物代谢贮存丰富而又可溶的铁原子[2]。因而都得到了广泛而深入的研究。Kim[3]报道了MoFe蛋白衍射结果。赵宝光等[2]...
黄巨富汪道涌汪志平骆爱玲顾淑荣李佳格
关键词:细菌铁蛋白钼铁蛋白棕色固氮菌
固氮酶锰铁蛋白的晶体生长(英文)被引量:1
2001年
从以Mn代钼的固氮培养基中固氮生长的固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 中分离纯化的MnFe蛋白 ,在一定的结晶条件下 ,可从溶液中析出深棕色的短斜四棱柱晶体。Tris和Hepes缓冲液、NaCl、MgCl2 和PEG的浓度及结晶方法等 ,对该蛋白的出晶率、晶核数目、晶体大小和质量均有明显的影响 ,PEG浓度的改变还可使该蛋白晶体的晶型发生变化。MnFe蛋白结晶所需的上述化合物的最适浓度与缺失nifZ固氮菌突变种ΔnifZMoFe蛋白结晶所需的最适浓度有所不同。SDS凝胶电泳表明 ,晶体溶解后的蛋白与结晶前的MnFe蛋白基本相同。结果表明 。
黄巨富董志刚汪道涌吕玉兵张华峰王耀萍韩毅代小虎
关键词:晶体生长
缺失nifZ的棕色固氮菌突变种钼铁蛋白的晶体生长研究(英文)被引量:2
2000年
在一定的结晶条件下 ,缺失nifZ的棕色固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种钼铁蛋白将从溶液中结晶出深棕色的短斜四棱柱晶体。PEG 80 0 0、MgCl2 、NaCl、Tris的浓度及缓冲液的pH对该蛋白的结晶及晶体生长影响的系统研究表明 ,浓度和pH较低时 ,不出晶体 ;随着浓度逐渐提高及pH高于 8.0 ,在一周内出现大量小晶体 ;再提高浓度 ,便延长结晶时间但出质好、体积大而数少的晶体 ;然后晶体随浓度的提高而又变小、变多、甚至晶质变差 ,直至不再出晶体。影响晶体生长的各因子的最适浓度随其他条件的改变而有所不同。当缓冲液的pH为 8.2而PEG 80 0 0、MgCl2 、NaCl、Tris和蛋白质的浓度分别为 1.86 %、30 0mmol/L、40 0mmol/L、5 3mmol/L和 4.6 4g/L ,在一滴悬滴液中只有一颗较大的优质晶体 (最大两边线均为 0 .16mm)。
黄巨富王耀萍董志刚黄孝明汪道涌吕玉兵汪志平
关键词:棕色固氮菌晶体生长
棕色固氮菌nifZ与固氮酶钼铁蛋白P-cluster合成的关系被引量:3
1999年
与野生型固氮菌(OP)MoFe蛋白相比,缺失nifZ的棕色固氮菌(AzotobactervinelandiiLipann)突变种的△nifZMoFe蛋白对乙炔的还原活性和Fe/Mo比值都显著降低。在相同实验条件下从这两种MoFe蛋白中抽提出的FeMoco在催化活性和金属组成方面都很相似,而这两种蛋白的圆二色(CD)谱则有显著差异,除在540-750nm外,△nifZMoFe蛋白在可见光区域380-540nm的△ε明显降低并在430nm附近处出现一个奇特的尖负峰;而在紫外区域的208nm和222nm负峰的高度却明显增加。△nifZMoFe蛋白可在合适浓度的PEG8000和MgCl2溶液中结晶出来,而晶体大小和出现沉淀多少与上述CD谱的负峰有关。这表明:棕色固氮菌nifZ与MoFe蛋白P-cluster的合成有关,并由此影响蛋白质的构象、稳定性和结晶过程。
黄巨富汪道涌董志刚汪志平李佳格王耀萍
关键词:棕色固氮菌钼铁蛋白固氮酶
含锰固氮酶组分Ⅰ蛋白的纯化和特性(英文)被引量:2
2001年
棕色固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 能在无Mo而含Mn的无氨培养基中固氮生长。低浓度的Mn对UW3 突变种生长有促进作用。从在Mn中生长的UW3 菌体中分离得到的部分纯固氮酶组分Ⅰ蛋白含有Mn和Fe原子 (Fe/Mo/Mn为 10 .41∶0 .19∶1.0 0 )并具有OPMoFe蛋白一半的还原乙炔和质子的活性。这种蛋白的吸收光谱和圆二色谱与MoFe蛋白存在明显的差异 ,含Mn蛋白的亚基分子量都与MoFe蛋白的α亚基相近。初步结果表明 ,这种含Mn蛋白可能是一种固氮酶组分Ⅰ蛋白。
黄巨富汪道涌董志刚汪志平张华峰吕玉兵许祥明赵颖
关键词:蛋白纯化
锰、铬和钼重组液及其与部分缺金属原子簇钼铁蛋白重组的比较研究被引量:4
1998年
棕色固氮菌(Azotobactervinelandi)钼铁蛋白经邻菲口罗啉和O2处理后,缺失一部分FeMoco和Pcluster,并失去大部分活性。高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇(DTT)分别与K2CrO4、KMnO4和Na2MoO4按一定比例混合的具有不同颜色的重组液,均可显著激活失活的钼铁蛋白;然而,除DTT可略提高失活蛋白的活性外,其它化合物或缺一、二种化合物的混合液均无激活能力。含99Mo重组液与失活蛋白重组后的微分扰动角关联测定显示,该蛋白中的41%的99Mo的状态与克氏肺炎杆菌99MoFe蛋白中的99Mo相似,表明这种激活主要是以金属原子簇含量恢复为基础的。由此可推论出,含Mn或Cr的重组液,通过与失活钼铁蛋白重组得到含Mn或Cr的固氮酶是可能的。
汪道涌黄巨富骆爱玲李佳格董明理杜洪善
关键词:钼铁蛋白棕色固氮菌
缺失nif Z的棕色固氮菌突变种钼铁蛋白的特性和结晶被引量:5
1999年
从棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)缺失nifZ突变种中提纯得到的Δnif ZMoFe蛋白达到SDS凝胶电泳纯。每个△nfi ZMoFe蛋白分子含1.5个Mo和15.9个Fe原子,它的Fe和Mo比值低于野生型固氮菌MoFe蛋白的Fe和Mo比值,而它的C2H2、H+还原活性及其比率(C2H4/H2(Ar))分别为野生型MoFe蛋白的16.6%、21.7%和77.2%。在与野生型MoFe蛋白结晶条件略有不同的情况下,所得的Δnif Z MoFe蛋白晶体为深棕色的斜四棱柱体晶体。表明nifZ的缺失可能使突变种MoFe蛋白中的P-cluster或数目减少或结构发生变化,从而引起该蛋白的结构和功能发生明显改变。
汪道涌黄巨富钟泽璞李佳格王耀萍汪志平
关键词:棕色固氮菌突变种钼铁蛋白
氧敏感蛋白空间晶体生长的研究(英文)
2001年
为适应固氮酶蛋白等厌氧蛋白质空间晶体生长的要求 ,应在地面用简易而适用的厌氧加样装置以优化这类蛋白的结晶条件。用塑料袋或简易箱代替固氮酶实验室常用的笨重厌氧箱 ,获得了缺失nifZ固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种的MoFe蛋白和含锰固氮培养基中生长的UW3 的MnFe蛋白晶体。并在远离固氮酶实验室的地方 ,使用由小食品塑料袋和急救用的氩气袋组成的更轻便的厌氧装置 ,用坐滴法也能使这两种蛋白结晶出来。结果表明 ,利用上述简易厌氧装置有望达到以上
董志刚王耀萍韩毅龚海韵汪道涌陆建华黄巨富
关键词:植物生物固氮
含铼重组液对部分缺失金属原子簇的钼铁蛋白的激活作用被引量:5
1999年
棕色固氮菌(AzotobactervinelandiiLipmann)固氮酶MoFe蛋白经邻菲啉和空气处理后,成为部分缺失P_cluster和FeMoco的失活蛋白。与由Re2O7、高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇(DTT)组成的无圆二色(CD)谱信号的重组液保温后,保温蛋白对乙炔和质子还原的活性都得以显著恢复;紫外和可见光CD谱虽有明显恢复,但仍与还原MoFe蛋白有所差异。这表明:1)保温的蛋白液中除含有未被邻菲啉等处理而破坏的完整MoFe蛋白外,还可能存在新组装的含Re的固氮酶;2)新组装的ReFe蛋白和MoFe蛋白可能在固氮能力上相似。
黄巨富汪志平汪道涌董志刚李佳格
关键词:失活钼铁蛋白体外组装
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