狄春辉
- 作品数：50 被引量：205H指数：8
- 供职机构：北京大学医学部基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自然科学总论更多>>
- 腺病毒和腺伴随病毒基因元件提高白细胞介素6在真核细胞中的表达效率
- 1998年
- 目的：构建高效真核表达载体以提高细胞因子在真核细胞中的表达效率。方法：利用基因克隆技术构建了两个新的白细胞介素６（ＩＬ６）真核表达载体ｐＡｄＣＩＩＬ６和ｐ３３５ＣＩＬ６。将它们瞬时转染ＣＯＳ７细胞后，利用ＩＬ６依赖株７ＴＤ１对上清中的ＩＬ６进行检测。结果：两种新建载体分别能提高ＩＬ６在真核细胞中的表达效率５．５和３．４倍。结论：腺病毒的病毒相关Ⅰ和ⅡＲＮＡ（ｖｉｒｕｓａｓｏｃｉａｔｅｄⅠａｎｄⅡＲＮＡ，ＶＡⅠａｎｄＶＡⅡ）和腺伴随病毒（ａｄｅｎｏａｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓ，ＡＡＶ）的倒转末端重复序列（ｉｎｖｅｒｔｅｄｔｅｒｍｉｎａｌｒｅｐｅａｔ。
- 刘红涛袁勇张颖妹狄春辉王应马大龙
- 关键词：白细胞介素6腺病毒分子克隆真核细胞
- 人重组蛋白酶3的cDNA克隆化及其在真核细胞的表达
- 2001年
- 目的 应用真核表达系统表达人重组蛋日酶３（ＰＲ３），并用于检测患者血清中的抗蛋日酶３抗体（ａｎｔｉ－ＰＲ３）。方法 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ ）技术获得蛋白酶３的ｃＤＮＡ．并克隆至真核表达载体ｐｃＤＩ。将其瞬时转染至ＣＯＳ－７细胞，应用夹心ＥＬＩＳＡ法检测细胞上清中重组蛋白酶３（ｒＰＲ３）的表达，并以表达上清作为抗原检测患者血清中的ａｎｔｉ－ＰＲ３。同时转染ＣＨ０细胞，建立ＣＨ０／ＰＲ３稳定表达株。 结果 转染后的ＣＯＳ－７细胞和ＣＨＯ细胞均可以表达ｒＰＲ３，且ＣＯＳ－７细胞表达的ｒＰＲ３可以被多数ａｎｔｉ－ＰＲ３阳性患者血清识别。结论 用真核细胞表达的ｒＰＲ３具有抗原活性，为重组ＰＲ３替代天然ＰＲ３用于临床检测和实验研究提供了新的途径。
- 于净章友康赵明辉狄春辉马大龙
- 关键词：真核表达系统原发性小血管炎
- 白细胞介素－1受体拮抗剂对小鼠油酸型肺损伤的保护作用被引量：3
- 1994年
- ３６只小鼠分为对照组、油酸肺损伤组及白细胞介素－１受体桔抗剂（ＩＬ－１ｒａ）保护组，每组１２只。油酸由小鼠尾静脉注入，保护组注入上述拮抗剂后再给予油酸。结果表明，保护组肺系数、肺湿／干重比值较低，支气管肺泡灌洗液总蛋白量较少，ＰａＯ＿２较高，肺组织学改变（肺泡水肿、肺泡出血、肺坏死、炎症细胞浸润）明显减轻。认为该拮抗剂对油酸型肺损伤有保护作用，从而为其在成人型呼吸窘迫综合征中的临床应用提供一定依据。
- 赵鸣武孙德俊马大龙廖松林狄春辉刘进卜捷
- 关键词：生物学白细胞介素1呼吸窘迫
- 利用抑制性减数杂交技术(SSH)研究IL-10抑制表达的新基因被引量：15
- 2000年
- 目的 利用抑制性减数杂交 (SSH)技术筛选IL 10抑制表达的新基因。方法 以PHA刺激的U937细胞为tester,以PHA刺激同时IL 10抑制的U937细胞为driver,提取mRNA ,反转录构建cDNA文库 ,利用SSH技术筛选IL 10抑制表达的新基因。结果 通过SSH技术 ,发现了 15个可能的IL 10抑制表达的基因 ,其中 6个与GenBank中已公布的表达序列检签 (expressedsequencetag ,EST)片段没有明显同源性 ,为新基因 ,其中之一经EST拼接 ,得到全长cDNA ,为一种新的C C家族趋化因子 ,已被GenBank收录 ,收录号码为AF0 96 985。挑选 4个新基因进行Northernblot分析 ,发现IL 10可抑制其中 3个新基因表达。结论 SSH技术是一种高效的差异基因筛选方法 ,IL
- 韩文玲李莹张颖妹徐秀珍宋泉声狄春辉马大龙
- 关键词：白细胞介素10U937细胞
- Magic/WizardDNA纯化试剂盒的再生利用被引量：1
- 1998年
- ＤＮＡ的提取是分子生物学的常规操作，美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司推出的Ｍａｇｉｃ／Ｗｉｚａｒｄ试剂盒大大简化了这一烦琐、费时的工作，但试剂盒一次性使用的价格使多数国内实验室难以承受，摸索出一种简单的试剂盒再利用的方法，使再生试剂盒的纯化效果与原装试剂盒无显著差别，在方便了研究工作的同时也大大降低了实验成本．
- 袁勇宋泉声刘红涛狄春辉王玉刚
- 关键词：DNA提取试剂盒再利用
- 人重组内皮细胞衍生IL-8在大肠杆菌中高效表达
- 1992年
- 白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)是一种趋化因子,对中性粒细胞、T细胞有很强的趋化作用,并能活化中性粒细胞,因而IL-8在免疫调节和炎症过程中起着重要的作用。我们利用基因工程技术在大肠杆菌中表达出有生物活性的IL-8融合蛋白。
- 周宝宏马大龙庞建宋泉声狄春辉肖波冯岚龙振洲
- 关键词：IL-8INTERLEUKIN白细胞介素趋化因子基因工程技术
- 人硫氧还蛋白及其变异体对TF-1和NFS60细胞的凋亡抑制和促增殖效应被引量：5
- 2000年
- 目的 :比较rhTRX与rhTRXδ3对细胞因子依赖株TF 1细胞、NFS6 0细胞撤除细胞因子所诱导凋亡的抑制及促细胞增殖作用。方法 :在大肠杆菌中克隆并表达重组hTRX和hTRXδ3,纯化rhTRX与rhTRXδ3蛋白 ,FACS检测凋亡细胞 ,MTT法检测细胞增殖。结果 :在依赖IL 3、GM CSF生长的TF 1细胞 (人红白血病细胞 )和依赖G CSF生长的NFS6 0细胞 (小鼠白血病细胞 )撤除细胞因子后 ,加入rhTRXδ3比加入rhTRX能更有效地抑制这两种细胞的凋亡并有促增殖的作用。结论 :重组hTRX和hTRXδ3有着不同的生物活性 。
- 王应狄春辉张颖妹宋泉声马大龙
- 关键词：硫氧还蛋白肿瘤细胞
- 人凋亡相关蛋白TFAR19在细胞凋亡过程中的核转位研究
- ＜正＞ TFAR19（TF-1 cell apoptosis related gene 19,TFAR19）是本研究室克隆出的一个拥有自己知识产权的人类新基因。最近,国际人类基因命名委员会建议命名为PDCD5（progr...
- 陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙
- 文献传递
- 抗人凋亡相关蛋白TFAR19的单克隆抗体制备及鉴定被引量：18
- 2000年
- 目的研制鼠抗人凋亡相关蛋白 TFAR19的单克隆抗体，以进一步探讨 TFAR19蛋白的结构与功能。方法以纯化的重组人 TFAR19蛋白为抗原 ,免疫 BALB/c小鼠，将 TFAR19蛋白免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0进行细胞融合，经克隆筛选获得鼠抗人 TFAR19蛋白单抗的杂交瘤细胞株，以间接 ELISA、 Western免疫印迹分析等方法进行单克隆抗体的鉴定。结果获得了 3株稳定分泌抗人 TFAR19单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (C1,C10,2C12),其分泌的单抗效价高，特异性好，亲和力不一，免疫球蛋白亚类均为 IgG1。 Western免疫印迹分析证明 TFAR19蛋白在凋亡细胞中高表达。结论所获单抗能特异识别原核及真核细胞表达的 TFAR19蛋白，为进一步探讨 TFAR19蛋白的生物学效应提供了条件。
- 陈英玉张颖妹孙荣华宋泉声狄春辉马大龙
- 关键词：TFAR19PDCD5单克隆抗体
- 白细胞介素8片段在大肠杆菌中表达及其功能研究
- 1994年
- 利用ＤＮＡ重组技术在大肠杆菌中表达出白细胞介素８的Ｎ端４３氨基酸片段（ＩＬ８－Ｎ）和Ｃ端２４氨基酸片段（ＩＬ８－Ｃ），经过ＦＡＣＳ和趋化活性鉴定表明，ＩＬ８－Ｎ和ＩＬ８－Ｃ均能与中性粒细胞结合，其中ＩＬ８－Ｎ能部分封闭ＩＬ－８的趋化活性。
- 周宝宏马大龙秦建中冯岚宋泉声狄春辉李建远
- 关键词：白细胞介素8片段大肠杆菌
