王为善
- 作品数：29 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程农业科学轻工技术与工程更多>>
- 热葡糖苷酶地芽孢杆菌CRISPR type I-B基因编辑及其应用
- 本发明公开了热葡糖苷酶地芽孢杆菌CRISPR type I‑B基因编辑及其应用，通过建立内源CRISPR type I‑B系统的基因编辑方法，有效解决了基于反向筛选的同源重组基因编辑方法存在的编辑效率低、费时费力，以及异...
- 王为善杨志恒李子龙卜瑞红
- 包含别构转录因子调控系统的生物传感器、试剂盒及其在小分子检测中的用途
- 本发明涉及将小分子信号转化为DNA扩增产物信号的体外(in vitro)检测技术，用于精准检测小分子的生物传感器、试剂盒及其相关的方法和用途。所述生物传感器的机理在于，自然界里微生物利用别构转录因子(allosteric...
- 张立新王为善姚永鹏曹佳倩李珊珊李子龙
- 文献传递
- 委内瑞拉链霉菌中jadR3调控杰多霉素生物合成的分子机制
- 杰多霉素是委内瑞拉链霉菌在环境压力胁迫(如乙醇刺激)条件下产生的一种抗生素。作为隐性抗生素转录激活的研究模式,杰多霉素生物合成的调控机制具有非常重要的研究价值。在杰多霉素的生物合成基因簇中存在有多个调控基因,其中jadR...
- 邹正中王为善杨克迁谭华荣
- 文献传递
- 链霉菌启动子元件开发
- 王为善李珊珊李肖王俊阳杨统见杨克迁
- 产土霉素的工程菌及其构建方法与应用
- 本发明提供一种产土霉素的工程菌及其构建方法与应用。本发明以白色链霉菌Del14作为底盘生产菌株，通过异源重构，首次在S.albus Del14中成功异源表达了otc cluster，具体地，通过增加一拷贝强启动子Pkas...
- 李子龙刘文溪王为善闫浩
- 发现未知调控子的方法学探索
- 链霉菌次级代谢产物在工业、农业和医药领域具有重要的应用价值,近年的研究表明,次级代谢的生物合成调控过程错综复杂,往往与产生菌的生理和发育状态紧密相关,形成多水平的调控网络。而对链霉菌次级代谢调控机制的系统认
- 王为善杨克迁
- 文献传递
- 热葡糖苷酶地芽胞杆菌NCIMB 11955高效电转感受态细胞电转体系的建立被引量：2
- 2023年
- 热葡糖苷酶地芽胞杆菌(Geobacillus thermoglucosidasius)是一种革兰氏阳性兼性厌氧菌,因其高温生长速度快、不易染菌的特性,作为下一代工业生物技术的候选底盘,已被广泛用于生产生物燃料和高附加值的化学品。然而,相比于经典的模式菌株大肠杆菌(Escherichia coli),热葡糖苷酶地芽胞杆菌因其转化效率低,限制了其作为底盘菌株的高效应用。本研究的目的是开发一种能够提高该菌株电转化效率的方法。本研究通过敲除该菌株中预测的限制性内切酶基因,添加细胞壁弱化剂和细胞膜抑制剂,优化目标菌株高效感受态细胞的制备,从而提高转化效率。热葡糖苷酶地芽胞杆菌的4个限制性内切酶基因的敲除可以使感受态细胞电转化效率提高至1.2×10^(4)CFU/(μg DNA);在敲除株的基础上,分别通过添加吐温80、DL-苏氨酸和甘氨酸进一步优化感受态细胞转化效率,其中吐温80的添加使感受态细胞电转化效率提高22.5倍左右,DL-苏氨酸的添加可以使感受态细胞电转化效率增加44倍,甘氨酸的添加可以使感受态细胞电转化效率进一步提高334倍左右,优化整合添加各类试剂后感受态细胞电转化效率在限制性内切酶缺失菌株的基础上提高至4.6×10^(6)CFU/(μg DNA),相对野生型菌株提高了3个数量级。这为热葡糖苷酶地芽胞杆菌的高效遗传操作和代谢工程奠定了基础。
- 卜瑞红杨志恒李子龙张国建王为善
- 角蒽环抗生素作为链霉菌信号角色的研究
- 微生物能够产生多种结构各异的抗生素,然而,对微生物产生抗生素的真正生物学意义的认识至今尚不明晰.研究表明天然抗生素除了对非产生菌的抑杀作用外,还可能在微生物种间起信号作用;但是,迄今为止尚没有在分子层面上,对抗生素作为种...
- 王为善杨克迁
- 多杀菌素生物合成基因簇启动子探测和转录时序被引量：3
- 2013年
- 多杀菌素是对农业虫害防治及粮食仓储安全均具有重大意义的农用抗生素。为了深入揭示刺糖多孢菌合成多杀菌素的调控特点,首先通过建立基于报告基因的启动子探测技术,探测了多杀菌素生物合成基因簇的9个启动子活性。并进一步通过荧光定量PCR,分析了这9个基因和不在基因簇内的负责糖基前体供应和鼠李糖合成的4个基因的转录时序,结果表明多杀菌素生物合成基因簇内的9个基因在菌体生长进入稳定期时有较高的转录,这和发酵液中此时开始大量积累多杀菌素一致;同时还发现,簇外的4个与糖基供应相关的基因和基因簇内基因的转录时序不同,它们在菌体生长对数期有较高的转录活性,这暗示多杀菌素聚酮链的合成速率和参与后修饰的糖基底物供应的最优化匹配有可能是提高生物合成多杀菌素的前提和关键。
- 冯晓洲王为善任晓慧刘新利毛相朝杨克迁
- 关键词：多杀菌素生物合成基因簇
- 茂原链霉菌XM4的TGase酶学性质分析及其高产菌株的构建
- 2024年
- 【目的】系统地分析茂原链霉菌CGMCC4.1851(菌株XM4)谷氨酰胺转氨酶(TGase)的酶学性质,随后对该菌株进行改造以构建高产菌株,实现TGase在链霉菌内高效表达并缩短发酵周期、提高TGase生产效率。【方法】通过测定发酵液pH和TGase研究菌株XM4的发酵特性,采用醇沉结合离子层析纯化菌株XM4的TGase,测定酶的适宜反应条件(pH、温度、金属离子)和酶动力学等指标,并通过结合酪蛋白交联实验评价其催化效率;然后利用基因工程技术,通过异源表达、替换核糖体结合位点(ribosome binding sites,RBS)提高改造原始菌株,测定TGase产量。【结果】菌株XM4的TGase在pH 4.0-11.0范围内具有良好的活性和稳定性,其中最适反应温度为50℃,最适pH值为10.0;在改造后的表达系统中实现了TGase在链霉菌中的高效表达,产量相较于原始菌株提升了103.3%,同时发酵时间缩短至24 h。【结论】菌株XM4的TGase具有良好的耐酸碱性和热稳定性,在食品工业特别是乳制品加工中具有广阔的应用前景。同时,改造菌株可实现TGase的高效生产,为TGase的工业化生产与应用提供了新的选择。
- 修涵李子龙袁方李国莹王为善毛淑红
- 关键词：谷氨酰胺转氨酶酶学特性
