王佳凤
- 作品数：12 被引量：33H指数：3
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- CpG-ODN对乙肝核酸疫苗及重组疫苗免疫效果的影响被引量：5
- 2005年
- 目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpGODN)对乙肝核酸疫苗及重组(CHO细胞)疫苗免疫效果的影响。方法核酸疫苗实验组用CpGODN与乙肝核酸疫苗联合免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射核酸疫苗,阴性对照组注射质粒pVAX1;重组疫苗分4个实验组,用CpGODN与不同剂量的重组疫苗配伍后分别免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射重组疫苗,阴性对照组注射生理盐水。应用ELISA检测小鼠血清中的抗HBs水平。结果CpG与乙肝核酸疫苗组抗体阳转率比阳性对照组提高3倍,抗体水平提高2倍。CpG与重组疫苗组的阳转率和阳转时间均高于或早于CpG与核酸疫苗实验组。加入CpGODN后,即使重组疫苗用量减少3倍,诱导抗体水平和阳转率均无明显改变。结论CpGODN可提高乙肝核酸疫苗和重组疫苗的免疫效果,并使抗体产生的时间提前。
- 吴晓娟赵大鹏冷梅刘丹戚凤春汪春义王佳凤岳丹王华齐影付学奇
- 关键词：CPG-ODN核酸疫苗重组疫苗免疫效果乙肝寡聚脱氧核苷酸疫苗用量
- 沙门菌PCR-ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2015年
- 目的建立沙门菌PCR-ELISA检测方法,并进行验证。方法根据沙门菌inv A基因设计PCR-ELISA引物及探针,进行PCR扩增、核酸杂交及ELISA检测,对变性反应条件、杂交探针浓度、杂交时间和温度及显色时间进行优化,确定阴性、阳性判定的阈值,并进行敏感性、特异性及重复性验证。用建立的PCR-ELISA方法检测人工染菌的22批中药丸剂及27批液体乳中的沙门菌,并与PCR及GB4789方法进行比较。结果 150 mmol/L Na OH变性液可使核酸变性最彻底,50 pmol/ml地高辛标记探针为最适浓度,50℃60 min为最佳杂交时间和温度,最佳显色时间为50 min;阴性、阳性的阈值为0.265。该方法最低检测限为0.5 pg/μl,灵敏度高;能针对性地扩增沙门菌的特异性片段,检测特异性强;检测结果的批内、批间变异系数均小于10%,重复性较好。人工染菌的22批中药丸剂和27批液体乳的PCR-ELISA方法检测阳性率明显高于PCR法,与GB4789方法检测阳性率基本一致。结论优化后的PCRELISA方法特异性强,灵敏度高,重复性好,可快速检测食品、药品中的沙门菌。
- 韩来辉董少晨王佳凤李井涛
- 关键词：沙门菌聚合酶链反应酶联免疫吸附试验
- 制备重组CHO细胞乙型肝炎疫苗的新方法
- 本发明涉及将含有乙型肝炎病毒表面抗原的溶液，通过疏水层析、硫酸纤维素层析以及凝胶过滤层析等多步处理，获得纯化或部分纯化的乙型肝炎病毒表面抗原的方法，实施所述方法的装置系统，使用所述系统通过所述方法获得的乙肝病毒表面抗原纯...
- 盛军陈万革金立杰李德娟阎昆明乔宏雷孙俊业周长军刘延明谷铁军罗璇赵睿王佳凤
- 文献传递
- 无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞的比较被引量：13
- 2004年
- 目的对无血清培养基与含血清培养基培养CHO细胞进行比较。方法应用两种培养基采用小方瓶培养CHO细胞,观察细胞维持时间、培养过程的形态变化及对血凝效价的影响。结果应用无血清培养基(A)培养CHO-C28细胞虽然可维持细胞正常生长,但贴壁不好,逐渐降低(A)加量情况可得到相应改善。结论 目前无血清培养基尚不能完全取代含血清培养基用于培养CHO细胞。
- 付百年赵睿王智宇王佳凤李德娟金立杰
- 关键词：血清培养基
- 结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6的原核表达及纯化被引量：2
- 2010年
- 目的原核表达并纯化结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6。方法将ESAT-6基因自pET-24b-ESAT-6质粒亚克隆至pGEX-3C载体中,构建重组表达质粒pGEX-ESAT-6,经酶切及测序鉴定正确后,分别转化大肠杆菌JM107和BL21(DE3),以不同浓度IPTG诱导表达,表达产物经GSH-Sepharose4 B亲和层析纯化。结果所构建的重组表达质粒pGEX-ESAT-6经酶切及测序鉴定正确;重组融合蛋白在大肠杆菌JM107中的表达量较高,可达菌体总蛋白的24.2%;最适IPTG诱导浓度为0.1mmol/L;纯化的目的蛋白纯度可达83.9%。结论已成功构建了重组表达质粒pGEX-ESAT-6,并在大肠杆菌JM107中高效表达,为结核分枝杆菌亚单位疫苗及核酸疫苗的研制提供了材料。
- 马姬何巍吴文鹃孙迪王佳凤
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达纯化
- 国产与进口MEM培养基培养MRC-5细胞效果的比较被引量：1
- 2014年
- 目的对国产及进口MEM培养基培养MRC-5细胞的效果进行比较。方法用国产及进口MEM培养基培养37代MRC-5细胞,于显微镜下观察培养24、48、72 h后的细胞的生长情况,并对细胞在33~37代传代过程中的细胞活性进行检测;以0.008 MOI的Oka株水痘-带状疱疹病毒感染37代MRC-5细胞,观察细胞病变情况。结果国产及进口MEM培养基培养的37代MRC-5细胞,细胞形态、贴壁、伸展、牵手、成网、单层等生长情况均相似,细胞数量也无明显差异,均可使细胞保持较高的活力,两组间细胞存活率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;细胞病变均比较典型、广泛,病变程度均在70%以上,且细胞完整,未见明显撕裂现象。结论国产及进口MEM培养基均可满足MRC-5细胞的生长和病毒培养的宿主条件。
- 陈嘉雯王佳凤徐俊峰周欣曲成陈维金
- 关键词：细胞培养
- 制备重组CHO细胞乙型肝炎疫苗的新方法
- 本发明涉及将含有乙型肝炎病毒表面抗原的溶液，通过疏水层析、硫酸纤维素层析以及凝胶过滤层析等多步处理，获得纯化或部分纯化的乙型肝炎病毒表面抗原的方法，实施所述方法的装置系统，使用所述系统通过所述方法获得的乙肝病毒表面抗原纯...
- 盛军陈万革金立杰李德娟闫昆明乔宏雷孙俊业周长军刘延明谷铁军罗璇赵睿王佳凤
- 文献传递
- 人二倍体细胞(2BS株)细胞库的建立及生物学特性鉴定被引量：5
- 2014年
- 目的建立人二倍体细胞（2BS株）主细胞库和工作细胞库。方法将人二倍体细胞（2BS株）扩大培养后冻存,建立主细胞库和工作细胞库,采用台盼蓝染色计数细胞,计算细胞活力,并进行染色体、外源病毒因子、微生物污染、致瘤性的检测及鉴别试验。将全面检定合格的工作细胞库细胞分别接种至T75一次性培养瓶、3 L玻璃转瓶和10层细胞工厂,观察细胞形态;将水痘病毒分别按0.010 5、0.012 8、0.018 8 MOI接种至T75一次性培养瓶、3 L玻璃转瓶和10层细胞工厂上的单层细胞,收获病毒原液,检测病毒滴度。结果主细胞库细胞活力为94.1%,工作细胞库细胞活力为94.4%;1 000个处于分裂相时期的细胞的核型分析结果均在《中国药典》三部（2010版）人二倍体细胞染色体分析标准的规定范围内;细胞上清液和裂解液中人外源病毒因子检测结果均为阴性,符合《中国药典》三部（2010版）规程要求;细胞均贴壁,成纤维细胞形态,种属鉴别为人细胞B型;细胞库未被细菌、真菌、病毒及支原体污染,也未出现致瘤性。建立的细胞库在3种培养器皿中均可在工艺要求时间内生长为单层,单位面积活细胞浓度在（2.01~2.59）×105个/cm2之间,收获的病毒滴度在5.0~5.25 lg PFU/ml之间,符合成都生物制品研究所有限责任公司《水痘减毒活疫苗制造及检定规程》要求。结论建立了人二倍体细胞（2BS株）主细胞库和工作细胞库,为2BS细胞应用于水痘减毒活疫苗的研发和生产提供细胞资源和理论依据。
- 梁本王佳凤侯良玉麻广李永忠李立哈秀杰李开军单玉杰林崇健刘晔黄林
- 关键词：细胞库生物学特性
- 重组HBsAg大规模生产中超速离心纯化工艺的改进被引量：1
- 2003年
- 目的 为提高制品的纯度和收率以及离心机的使用效率,建立更适合大规模生产的超速离心工艺。方法 样品在超离前先过滤,然后再分别调整梯度液的液量及比重。结果 样品经过滤后适当调整梯度液的液量,超离心的峰形和所收获的HBsAg的纯度和收率都明显提高,而改变梯度液的比重则收液量下降,收率降低。结论在超离心前先过滤,然后再改变原有梯度液的比例,减少A液50ml,增加B液50ml,能提高制品的纯度和收率。
- 董雪林杨屹周长军赵小敏王佳凤李德娟魏自力
- 关键词：超速离心HBSAG纯化工艺
- 预防医学期刊数字化出版进程中的问题及出路被引量：2
- 2011年
- 随着信息产业的快速发展和广大读者阅读习惯的改变,数字出版作为全新的出版方式在出版业引发了一场全新的变革,传统的出版印刷受到了前所未有的冲击。同样也给科技期刊带来了新的机遇和挑战。本文就我国科技期刊数字出版中所面临的一些问题进行了细致分析,并对其未来出路提出了一些意见。
- 吕勇张效群何巍王佳凤任志霞
- 关键词：出版业数字化科技期刊信息产业
