王文芳
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：湖南农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 欧文氏菌T85-166果胶酶基因克隆与序列分析被引量：8
- 2009年
- 根据果胶酶Pel基因在欧文氏菌基因组上的分布特点,通过合理设计引物,从欧文氏菌株T85-166克隆出3个果胶酶Pel基因(Pel-1、Pel-2和Pel-3),它们分别编码372、373和374个氨基酸。序列分析表明,Pel-1前105及后100个氨基酸序列与Pel-2完全相同,但与Pel-3有较大差异,而中间170个左右的氨基酸序列与Pel-3则高度相似。初步构建了3个Pel基因的工程菌。
- 李琦戴小阳刘正初谢达平王文芳宋娟
- 关键词：果胶酶欧文氏菌克隆PCR
- 水稻CesA4基因启动子与GUS基因融合表达被引量：3
- 2009年
- 目的:利用GUS报告基因,研究水稻CesA4基因在水稻组织和器官的定位。方法:克隆水稻的CesA4基因的启动子并用GUS组织化学染色检测启动子与GUS基因融合表达情况。结果:成功克隆了水稻的CesA4基因的启动子,并发现水稻的CesA4基因在水稻的根、茎、叶、鞘、穗的纤维均有表达。结论:通过将水稻CesA4基因的启动子与GUS基因融合来分析水稻此基因的表达部位,是一种简便和有效方法。
- 王文芳刘爱玲李琦邹杰周小云许发喜李尉王育华陈信波
- 关键词：水稻启动子GUS
- 水稻OsCesA4和OsSCP基因的功能鉴定
- 水稻(Oryza sativa)是世界上非常重要的粮食作物之一。但是由于全球环境的变化,水稻产量和品质受到了严重的威胁,这就使如何获得优良水稻品种变得十分迫切。因此,研究水稻中起重要调控作用的基因,用于水稻的遗传改良,具...
- 王文芳
- 关键词：水稻基因纤维素合成酶
- 文献传递
- 水稻OsHsfA7基因RNA干扰载体的构建及遗传转化研究被引量：7
- 2010年
- 为研究水稻热激转录因子基因OsHsfA7的功能及其在水稻耐热育种方面的应用价值,本文通过构建水稻OsHsfA7基因RNA干扰载体获得功能抑制变异材料,从反向遗传学进行基因的功能分析。扩增OsHsfA7c DNA3'编码区470bp片段,分别以反向和正向插入到中间载体pBSK连接的GUS片段两侧,然后将得到的RNA干扰片段克隆到改造的植物表达载体p1301M,构建以CaMV35S启动子驱动表达的水稻OsHsfA7基因RNA干扰表达载体。将该载体转入根癌农杆菌EHA105后,采用农杆菌介导法进行了水稻日本晴品种的遗传转化,获得了23株具有潮霉素抗性的转基因植株,其中12株经GUS染色呈蓝色并且DNA检测10株已插入目的片段,RNA检测其中6株OsHsfA7基因的表达水平下降甚至未检出。结果说明本研究构建的OsHsfA7基因RNA干扰载体对该基因表达沉默是有效的。
- 刘爱玲邹杰王文芳周小云张先文陈信波
- 关键词：水稻
- 高产果胶酶细菌的筛选及其Pel基因克隆被引量：12
- 2009年
- 用透明圈法筛选50份产果胶酶菌株,通过PCR方法从菌株的基因组DNA克隆果胶酶Pel基因,Pel基因与PMD18-T载体连接后转化到大肠杆菌DH52α,用菌落PCR方法和透明圈法筛选阳性重组菌株。结果表明,成功筛选出一株透明圈大的T85-166菌株,初酶液果胶酶活力达213.30U/ml,克隆了877bp的Pel基因片段并在大肠杆菌DH52α中有表达,其表达产物具有生物学活性。
- 李琦谢达平戴小阳刘正初王文芳
- 关键词：果胶酶克隆
