王海燕
- 作品数：84 被引量：189H指数：8
- 供职机构：河北农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 小麦STK类抗病基因同源序列的克隆与分析被引量：9
- 2010年
- 根据丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶类催化结构域Ⅰ和Ⅷ氨基酸保守序列设计简并引物,以TcLr19、TcLr35和感病对照Thatcher的cDNA为模板进行抗病基因同源序列的PCR扩增,得到了6条通读的抗病基因同源序列(RGAs)Lr19-RGA1、Lr19-RGA2、Lr19-RGA3、Lr35-RGA1、Lr35-RGA2和TC-RGA。在NCBI中用BLASTp比对发现,Lr19-RGA1、Lr19-RGA2、Lr19-RGA3、Lr35-RGA1和Lr35-RGA2编码的氨基酸序列具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Serine-thre-onine kinase,STK)的催化结构域Ⅱ-Ⅷ。对序列分析还发现,它们与已克隆的STK类抗病基因有不同程度的相似性,为进一步克隆小麦抗叶锈病相关基因提供了依据。
- 张楠王海燕刘大群
- 关键词：小麦
- 叶锈菌及信号分子诱导小麦TaLr35PR2蛋白的表达分析
- 2015年
- 为明确小麦TaLr35PR2蛋白在叶锈菌和信号分子诱导下的表达模式,在前期研究工作基础上,成功构建了TaLr35PR2基因的原核表达载TaLr35PR2-pEASY,在大肠杆菌中高效表达分子量约为30kDa的融合蛋白,采用Western杂交分析了TaLr35PR2蛋白在叶锈菌、水杨酸(Salicylic acid,SA)、脱落酸(Abscisic acid,ABA)诱导下的表达水平。结果表明,小麦成株期接种叶锈菌后不同时间点,TaLr35PR2蛋白在亲和反应(Thatcher)中表达量变化不大,趋于平缓;而在非亲和反应(TcLr35)中的表达量变化较大,在接种叶锈菌后不同时间点有明显的上升或下调,且在非亲和组合中的表达量明显高于亲和组合。另外,信号分子可以诱导TaLr35PR2蛋白的表达,信号分子预处理后接种叶锈菌,TaLr35PR2蛋白表达量显著上调。这些研究结果首次从蛋白表达水平明确叶锈菌和信号分子SA、ABA显著诱导TaLr35PR2蛋白的表达,推测TaLr35PR2可能与小麦TcLr35成株抗叶锈病防御反应具有一定相关性。
- 栗小英刘景坤张艳俊王海燕刘大群
- 关键词：叶锈菌病程相关蛋白信号分子
- 一种用于筛选小麦抗叶锈病基因的引物序列及其应用
- 本发明公开了一种用于筛选小麦抗叶锈病基因的引物序列及其应用，所述引物序列是由序列表中引物wms582和barc8的上下游核苷酸序列组成的引物对。本发明提供了一个新的小麦抗叶锈病基因LrBi16的SSR标记cfa2257和...
- 刘大群李在峰张海李星王海燕张汀
- 1个小麦NBS类抗病基因同源cDNA序列的克隆与鉴定被引量：6
- 2009年
- 利用cDNA末端快速扩增技术对小麦抗叶锈病近等基因系TcLr35中所获得的抗病基因同源片段S2A25′端和3′末端序列进行扩增,并根据拼接序列设计特异性引物,进行全长基因的扩增,获得了1个通读的NBS类抗病同源基因S2A2cDNA序列,该序列全长为3 476 bp,编码866个氨基酸序列。经BLASTp比较,该片段含有NB-ARC保守结构域和多个LRR结构域,与已知植物抗病基因I2C1-、L6、RPS2等相应区域相一致。半定量RT-PCR分析表明,该基因在小麦叶片中为低丰度组成型表达。本研究在TcLr35小麦中成功获得了抗病同源基因,这为最终克隆小麦抗叶锈病基因Lr35奠定了基础。
- 王海燕刘大群杨文香李在峰张立荣张娜
- 关键词：小麦抗叶锈病基因CDNA末端快速扩增技术同源序列
- 中国小麦品种中抗锈病基因的鉴定、发掘和定位
- 刘大群李在峰李星王海燕杨文香
- 项目所属科学技术领域：植物免疫学科基础应用研究领域。 主要研究内容及发现点： 1.已知抗叶锈病基因在小麦品种中的分布：该项目对来自国内主要小麦产区的102份小麦材料进行苗期和成株抗叶锈鉴定，在65个品种中检测到了Lr1等...
- 关键词：
- 关键词：小麦抗条锈病基因植物免疫学
- 使TcLr19感病的叶锈菌突变体的获得
- 小麦TcLr19表现为全生育期抗性,在我国至今没有发现对TcLr19产生毒性的菌株,所以本研究拟利用EMS诱变获得使小麦TcLr19感病的叶锈菌PHNT毒性突变菌株。本研究以叶锈菌菌株PHNT为野生型实验材料,对其进行单...
- 武文月王菲王丽珊崔钟池王海燕刘大群
- 关键词：叶锈菌EMS诱变
- 文献传递
- 沼液喷施桃树的防虫效果试验研究被引量：2
- 2017年
- 沼液与传统杀虫剂、肥料的最大区别在于,即使沼液使用过多也不会发生烧苗现象。基于此,本文开展沼液喷施桃树与传统农药喷施桃树防虫效果的对比试验,结果表明:相较于传统农药杀虫效果普通且见效缓慢、质量水平不一、容易受到环境影响等缺点,沼液杀虫不仅效果强于农药,而且成本更低,原材料获取容易,还可增加作物产量,提高果实品质。总之,沼液喷施防虫是一项值得推广应用的技术。
- 郑海红杨小凡范凡王海燕
- 关键词：沼液桃树防虫
- 利用GFP-Trap和酵母双杂交技术筛选TaPR1互作靶标被引量：1
- 2021年
- 病程相关蛋白PR1(pathogenesis related PR1 proteins,PR1)在小麦抗病防御反应中发挥重要作用。本试验是在前期研究基础上,借助烟草成功表达TaPR1蛋白,利用GFP-Trap技术结合质谱分析获得与TaPR1互作的蛋白。同时,利用酵母双杂交技术(Yeast two-hybrid,Y2H)在接种叶锈菌生理小种PHNT的‘中国春’小麦酵母文库中筛选获得与TaPR1互作的寄主蛋白。经过序列比对分析,2种方法共同筛选出谷氨酰氨合成酶(Glutamine synthetase)、细胞色素b6(Cytochrome b6)、应激蛋白(Stress protein)等可能与TaPR1互作的蛋白,为进一步深入研究TaPR1参与小麦叶锈病防御反应的分子机制提供了理论基础。
- 申松松王菲耿怀民孟麟硕冯燕王海燕
- 关键词：小麦叶锈菌酵母双杂交
- TcLr19PR1、TcLr19PR2和TaLr19TLP1的酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
- 在前期研究的基础上,已成功克隆得到3个病程相关蛋白PR1、PR2和PR5的序列,分别命名为TcLr19PR1、TcLr19PR2和TaLr19TLP1。将这3个基因分别连接到酵母双杂交诱饵载体pGBKT-7上,并转化到感...
- 王菲张艳俊梁芳张家瑞王海燕刘大群
- 关键词：病程相关蛋白酵母双杂交诱饵载体毒性检测
- 文献传递
- 基于转录组测序开发的一个小麦叶锈菌特异分子标记被引量：1
- 2020年
- 小麦叶锈菌毒性变异频繁,新的毒性小种不断出现,往往导致小麦抗叶锈病品种在推广种植几年后的抗性丧失。因此,开发用于田间小麦叶锈病的诊断与预测预报的特异性分子标记具有重要意义。在前期已经完成小麦叶锈菌PHNT转录组测序的基础上,本研究拟在数据库中挑选候选效应蛋白,利用实时荧光定量PCR明确其在叶锈菌侵染小麦后不同时间点的表达模式,根据差异表达分析筛选出候选效应蛋白,再根据编码候选效应蛋白的基因序列设计引物,对小麦叶锈菌PHNT基因组DNA进行PCR扩增,旨在开发小麦叶锈菌特异性分子标记。结果在转录组数据库中筛选出24个候选效应蛋白,qPCR检测明确其中17个具有明显的表达差异。PCR扩增结果表明,基于候选效应蛋白基因PTTG-05290设计的引物在小麦叶锈菌PHNT中获得一条920 bp的条带,且在检测的25种叶锈菌生理小种中均稳定存在,而在小麦条锈菌、菜豆锈菌、枣树锈菌、柳树锈菌、苹果树锈菌及芦苇锈菌6种锈菌中不能获得有效扩增,表明该引物在小麦叶锈菌中具有特异性。qPCR结果表明,PTTG-05290在叶锈菌侵染小麦4 d时达到表达高峰,表达量为0 d的218倍,而0.5 d时便大量检测到该基因。因此,PTTG-05290可作为分子标记用于小麦叶锈菌的田间早期检测及预测预报,对小麦抗叶锈病品种在田间的合理布局具有重要意义。
- 武文月王丽珊郭鹏王菲王逍冬刘大群王海燕孟庆芳
- 关键词：小麦叶锈菌PCR
