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压力对视网膜神经节细胞存活及突起生长影响的研究被引量：3: 2004年; 目的　建立体外加压培养SD乳鼠视网膜神经节细胞 (RGCs)模型 ,并观察压力对RGCs存活及突起生长状况的影响。方法　取生后 0～ 3天SD乳鼠的视网膜组织 ,用酶化学方法制备成细胞悬液并接种于培养瓶中。用自行设计的体外加压模型 ,使瓶内压力分别达到 2 0mmHg、4 0mmHg、6 0mmHg和 80mmHg,同时设对照组 (压力为 0 )。分别于培养后 2 4h、4 8h和 72h在倒置显微镜下观察RGCs的存活及生长状况 ,并应用Thy 1 .1单克隆抗体对RGCs进行免疫细胞化学鉴定。结果　压力为 2 0mmHg及 4 0mmHg实验组中RGCs生长状况与对照组相似 ,RGCs存活数量及突起生长率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;压力为 6 0mmHg及 80mmHg实验组中RGCs存活数量及突起生长率与对照组存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　RGCs可以在体外存活并生长 ,一定的压力 (≥ 6 0mmHg)可以影响RGCs的存活数量及突起生长率。; 段永恒原慧萍王莉娜杨滨滨王雅; 关键词：视网膜神经节细胞细胞培养突起生长

地塞米松对人眼小梁细胞连接蛋白表达和细胞骨架的影响研究: 目的：探讨地塞米松(Dex)对体外培养正常人及 POAG 患者人眼小梁细胞紧密连接蛋白 ZO—1和间隙连接蛋白 Cx43 表达的变化及 Actin 骨架形态结构的影响,初步证实其在小梁网房水流出阻力调节中的作用。方法：将...; 卓业鸿侯飞王莉娜黄亚琳葛坚; 文献传递

地塞米松对人眼小梁细胞连接蛋白表达的影响研究: 目的：探讨地塞米松(Dex)对体外培养正常人及 POAG 患者人眼小梁细胞紧密连接蛋白 ZO—1和间隙连接蛋白 Cx43 表达的影响,初步证实其在小梁网房水流出阻力调节中的作; 卓业鸿侯飞魏雁涛李亮王莉娜葛坚; 文献传递

地塞米松对人眼小梁细胞连接蛋白表达和流畅阻力的影响: ＜正＞目的:探讨地塞米松（Dex）对体外培养的人眼小梁细胞紧密连接蛋白ZO—1、Occludin和缝隙连接蛋白Cx43表达和流畅阻力的影响。方法:将体外培养的人眼小梁细胞选择第 3—5代接种于0．4μm孔径的滤膜上,待细...; 卓业鸿侯飞黄亚琳王莉娜葛坚; 文献传递

基因打靶技术及其在眼科领域的应用: 2006年; 基因打靶是近十年来发展起来的分子生物学技术,此项技术的应用和发展为人们在整体水平研究基因的功能及其调控、建章人类疾病动物模型和发展基因疗法提供了可靠的手段。本文综述了基因打靶技术的概况以及其在眼科疾病研究中的应用。; 王莉娜葛坚黄冰; 关键词：基因打靶基因工程眼疾病

体外诱导室管膜下区神经干细胞分化为视网膜神经细胞样细胞的研究被引量：7: 2003年; 目的　研究室管膜下区细胞的体外培养及其诱导分化情况。方法　取新生 0～ 3d的SD乳鼠室管膜下区细胞进行体外培养 ,同时培养视网膜神经细胞。收集视网膜细胞培养上清液 ,配制成条件分化液 ,将培养的室管膜下区细胞接种于视网膜细胞条件分化液中 ,并对诱导的细胞进行免疫荧光鉴定。结果　体外培养的室管膜下区细胞在无血清的培养基中生长良好 ,接种于SD乳鼠视网膜细胞条件分化液中的室管膜下区细胞可分化为视网膜神经样细胞。应用Thy1 1单克隆抗体行免疫荧光检查 ,细胞呈阳性反应。结论　在一定条件下室管膜下区细胞能够于体外培养存活 ,视网膜细胞条件分化液可定向诱导室管膜下区细胞分化为视网膜神经节细胞样细胞 ,体外模拟眼内环境行室管膜下区细胞诱导 ,将为进一步的眼内移植提供理论依据。; 原慧萍葛坚段永恒王艳梅王莉娜杨滨滨; 关键词：体外诱导室管膜下区神经干细胞细胞分化视网膜神经节细胞视功能

突变型Myocilin调控人小梁细胞内质网应激反应: ＜正＞目的:探讨P370L突变型Myocilin对人小梁细胞内质网应激反应的调控作用,初步揭示P370L突变型Myocilin的细胞损伤机制。方法:应用定点突变技术构建P370L突变型 Myocilin基因真核表达载体,...; 王莉娜葛坚卓业鸿黄圣松; 文献传递

RNA干扰技术抑制体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的初步研究被引量：14: 2005年; 目的探讨RNA干扰技术对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的抑制作用。方法采用化学合成的靶向IKKβ的siRNA,转染体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞,同时以对任何基因均无作用的siRNA作为阴性对照。以逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术检测IKKβmRNA表达水平,免疫印迹法检测IKKβ蛋白表达水平。将siRNA的转染浓度分别设为5、10、25、50、100、200nmol/L,进行转染,于转染后48h采用四甲基偶氮唑盐法检测其转染后对成纤维细胞的抑制作用。结果经转染了靶向IKKβ的siRNA,其成纤维细胞IKKβ的mRNA和蛋白表达水平均受到抑制。各个转染浓度(5、10、25、50、100、200nmol/L)均可抑制成纤维细胞的增殖(P<0.05),抑制率分别为10.72%、23.35%、30.84%、51.25%、50.06%、49.63%,50nmol/L时已达最大抑制率。结论靶向IKKβ的siRNA转染可以降低IKKβ的表达水平,同时对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的增殖具有抑制作用。抗IKKβ的RNA干扰技术可能是抑制抗青光眼术后滤过道瘢痕化的新手段。; 黄圣松葛坚王莉娜尹心宝魏雁涛马萍; 关键词：RNA干扰蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶筋膜成纤维细胞细胞分裂

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王莉娜