王颢
- 作品数：12 被引量：24H指数：4
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 正常SD大鼠组织钠泵α亚单位的基因表达被引量：9
- 2000年
- 目的 系统研究正常SD大鼠各组织内钠泵α亚单位三种异构体的分布情况。方法 采用分子生物学RT PCR及免疫组织化学技术 ,检测正常大鼠多种组织内钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平的表达。结果 左室心肌主要表达α1与α2亚单位 ,α3亚单位表达较弱 ;肝脏中在mRNA水平α1亚单位表达较强 ,α2与α3亚单位较弱 ,而在蛋白水平三者表达均较弱 ;肾脏中主要表达α1亚单位 ,α2与α3亚单位较弱 ;肾上腺中α1亚单位的表达略高于α2与α3亚单位 ;动脉平滑肌中α2亚单位的表达略高于α1与α3亚单位 ;垂体中三种亚单位的表达均较强 ;下丘脑中α2与α3亚单位表达较强 ,α1亚单位表达较弱。结论 本研究系统揭示了正常大鼠多种组织内钠泵α亚单位三种异构体在mRNA及蛋白水平的表达情况 。
- 原卫清王颢吕卓人
- 关键词：钠泵基因表达SD大鼠Α亚单位
- “一肾一夹”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位的基因表达被引量：6
- 2001年
- 目的 探讨“一肾一夹 (1k1c)”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变 ,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法 分别应用分子生物学RT PCR及免疫组化技术 ,探讨 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变 :无论在mRNA或蛋白水平 ,α1亚单位表达增强 ,而α2与α3亚单位表达无改变。结论 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变 ,这种改变可能参与了该模型的血压升高机制。
- 原卫清王颢吕卓人
- 关键词：高血压动脉平滑肌细胞钠泵基因表达
- 抗哇巴因多克隆抗体F(ab)_2片段的研制及鉴定被引量：3
- 2000年
- 目的 用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体 ,制备出F(ab) 2 片段 ,为改型抗体的研究提供依据。方法 免疫家兔制备出抗哇巴因多克隆抗体 ,并用胃蛋白酶分别在不同的酶解条件下消化抗体 ,继之用高效液相排阻色谱法 (HPSEC)对其进行分析、纯化 ,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测、鉴定其活性。结果 用胃蛋白酶 2mg/1 0 0mg抗哇巴因多克隆抗体 ,消化 1 8h ,反应体系的 pH3 0时 ,可获得F(ab) 2 片段。结论 用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体是研制出有活性的F(ab) 2
- 张明娟吕卓人袁育康贺浪冲王颢
- 关键词：F(AB)2片段
- 哇巴因与地高辛对大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位基因表达的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 对比研究哇巴因与地高辛对大鼠肾脏皮质钠泵 (Na+ ,K+ ATP酶 )α亚单位基因表达的影响 ,探讨内源性哇巴因 (EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制。方法 长期给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg- 1·d- 1)与地高辛 (32 μg·kg- 1·d- 1) ,动态观察大鼠血压变化 ;分别应用分子生物学RT PCR及免疫组织化学技术 ,研究各组大鼠肾脏皮质钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果 哇巴因与地高辛对大鼠血压的影响存在着明显差别 ,长期给予大鼠注射小剂量哇巴因可使大鼠血压升高 ,而地高辛对大鼠血压无影响。但哇巴因与地高辛对大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位基因表达的影响是相同的 ,在mRNA水平均可使α1亚单位表达增强 ,α2与α3亚单位表达无改变 ;而在蛋白水平α1亚单位表达减弱 ,α3亚单位表达增强 ,α2亚单位表达无改变。结论 哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致相同的肾脏皮质钠泵基因表达改变 ,提示这种表达的改变在哇巴因导致血压升高的过程中可能并不起着关键性作用。
- 王颢原卫清吕卓人
- 关键词：哇巴因地高辛肾脏钠泵基因表达肾脏皮质亚单位
- “一肾一夹”高血压大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位的基因表达被引量：5
- 2001年
- 目的 :探讨“一肾一夹 ( 1k1c)”高血压大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变 ,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法 :分别应用RT -PCR及免疫组化技术 ,探讨 1k1c高血压大鼠肾脏皮质钠泵α1、α2 及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果 :正常大鼠肾脏皮质主要表达钠泵α1亚单位 ,α2 与α3亚单位表达较弱 ;在mRNA水平 ,1k1c高血压大鼠肾脏皮质钠泵α1亚单位表达明显较强 ,α2 与α3亚单位表达无改变 ,而在蛋白水平各亚单位基因表达与对照组比较均无明显差异。结论 :1k1c高血压大鼠肾皮质钠泵α亚单位基因表达发生改变 ,这种改变可能参与该模型的血压升高机制。
- 原卫清王颢吕卓人张明娟杨军
- 关键词：肾皮质钠钾泵基因表达
- 正常SD大鼠血清及组织内源性哇巴因的含量及其意义
- 2000年
- 探讨正常 SD大鼠血清及组织内源性哇巴因 ( EO)的含量 ,为 EO生理及病理作用的进一步研究提供理论及实验依据。方法 制备高度特异性的哇巴因抗体 ,应用酶联免疫吸附试验 ( ELISA)的方法 ,对正常 SD大鼠血清及组织标本测定其 EO含量。结果 血清、肝脏、肾脏、肾上腺、垂体及下丘脑内 EO含量分别为 ( 1 .1 2± 0 .1 7) μg/ L、( 1 .79± 0 .44) μg/ kg组织、( 1 .0 8±0 .63)μg/ kg组织、( 1 .73± 0 .81 )μg/ kg组织、( 2 7.54± 6.91 )μg/ kg组织、( 1 .83± 0 .54)μg/ kg组织、( 1 0 .1 0± 3.0 8) μg/ kg组织。肾上腺内 EO含量明显高于其它组织及血清 EO含量。结论 确定了正常 SD大鼠血清及多种组织内源性哇巴因的含量 ,提示肾上腺有可能是
- 原卫清王颢吕卓人袁育康任会勋
- 关键词：SD大鼠酶联免疫吸附内源性哇巴因
- 哇巴因、地高辛与高血压发病关系的研究被引量：4
- 2003年
- 目的 观察哇巴因、地高辛对组织钠泵α亚单位基因表达的不同影响 ,探讨哇巴因与高血压发病的可能关系。方法 给予大鼠哇巴因 30 μg·kg-1·d-1,地高辛 4 0 μg·kg-1·d-1腹腔注射 7周。用免疫组化及原位杂交方法检测心脏、肾脏、肝脏、腹主动脉和肾上腺组织钠泵α亚单位蛋白水平及mRNA水平的表达。结果 哇巴因与地高辛对上述组织尤其是动脉及肾脏的钠泵α亚单位表达的影响不同 ,哇巴因增强动脉的α2 表达 ,地高辛则抑制其表达 ;哇巴因使肾脏α1表达增强 ,地高辛则使其减弱。结论 哇巴因导致组织钠泵α亚单位基因异常表达 。
- 刘梅颜吕卓人王颢
- 关键词：哇巴因地高辛高血压发病Α亚单位钠泵
- 哇巴因与地高辛对大鼠肝脏钠泵A亚单位基因表达的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 观察哇巴因与地高辛对大鼠肝脏钠泵基因表达的影响 .方法 分别给大鼠注射哇巴因 (2 0 μg· kg- 1·d- 1 )、地高辛 (32 μg·kg- 1·d- 1 )和生理盐水 (1m L· kg- 1·d- 1 ) ,观察给药后 6wk大鼠血压的动态变化 ;并分别应用分子生物学 RT- PCR及免疫组织化学技术 ,探讨各组大鼠肝脏钠泵 α1 ,α2 及 α3 亚单位 m RNA及蛋白水平基因表达的改变 .结果 给予哇巴因 2 wk后大鼠血压开始升高 ,至 6 wk时明显高于生理盐水组 (17.7± 1.2 ) vs(15 .4± 1.1) k Pa,P<0 .0 1) ,而实验过程中地高辛组血压与对照组比较差异不明显 .无论是在 m RNA水平还是在蛋白水平 ,哇巴因对大鼠肝脏钠泵α1 亚单位表达无影响 ,而地高辛使α1 亚单位表达增强 ;两组大鼠 α2 亚单位表达均无改变 ;哇巴因使 α3 亚单位蛋白水平表达减弱 ,而 m RNA水平增强 ,地高辛组大鼠肝脏钠泵 α3 亚单位无论在 m RNA水平及蛋白水平表达均增强 .结论 哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变 。
- 原卫清王颢吕卓人
- 关键词：哇巴因地高辛高血压基因表达
- “一肾一夹”高血压大鼠心肌钠泵α亚单位的基因表达被引量：2
- 2001年
- 目的 :探讨“一肾一夹 (IKIC)”高血压大鼠心肌钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变 ,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法 :分别应用分子生物学RT -PCR及免疫组化技术 ,探讨IKIC高血压大鼠心肌钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果 :在mRNA水平 ,1K1C高血压大鼠心肌钠泵α2亚单位表达减弱 ,α3亚单位表达增强 ,而蛋白水平表现为α2亚单位表达增强。结论 :1K1C高血压大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达发生改变 ,这种改变可能与肾血管性高血压的发病有关。
- 原卫清王颢吕卓人
- 关键词：高血压心肌钠泵
- 钠泵抑制物噬菌体单链抗体库的构建被引量：1
- 2001年
- 目的 应用噬菌体展示技术构建钠泵抑制物单链抗体库 .方法 用 OUA- OVA(ouabain- ovalbumin)免疫小鼠 ,取脾脏 ,分离淋巴细胞 ,提取 m RNA,逆转录成 c DNA第一链 ,用简并引物经 PCR分别扩增轻、重链抗体库 ,经重叠延伸PCR由 L inker将轻、重链拼接成 Sc Fv(单链抗体 ) ,用 RS引物以 Sc Fv为模板进行第 2次 PCR,同时在 5 及 3 端分别加上 Sfi I,N ot I酶切位点 .经 Sfi I,N ot I酶切后 ,在 T4连接酶的作用下将 Sc Fv与 p CANTAB 5 E噬菌粒连接 ,电转化进入TG1大肠杆菌 ,挑取 12个单菌落提取质粒用 Eco R 和 H ind 进行酶切鉴定 ,后经 M13KO7辅助噬菌体拯救 ,离心收集上清即为全套 Sc Fv基因的噬菌体表面展示文库 .结果 以OU A- OVA免疫小鼠 ,检测血清中抗体效价可达 (1∶ 2×10 6 ) ,用通用引物分别扩增出轻、重链片段的大小为 32 5 bp和 34 0 bp,将两者拼接得到约 72 0 bp大小的单链抗体库 ,以8× 10 1 1 的转化效率转染 TG1细胞 ,Eco R 和 H ind 酶切后 ,12个单菌落所提噬菌粒 DNA中有 10个切出了约为 2 .1kb的目的条带 ,所构建的噬菌体抗体库库容量约为 1.2× 10 8.经 M13KO7超感染后 ,测噬斑滴度为 9× 10 1 4 pfu· L- 1 .结论 成功地构建了钠泵抑制物噬菌体单链抗体库 .
- 原卫清王颢吕卓人陈萍韩骅牛利国
- 关键词：噬菌体展示抗体
