竺蓓
- 作品数：21 被引量：54H指数：5
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会基础研究重点项目上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小干扰RNA表达载体抑制单核细胞TLR4表达的研究
- 目的研究小干扰RNA(small interference RNA,siR- NA)表达载体对单核细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达的抑制作用,筛选有效抑制TLR4基因表达的s...
- 耿红莲王爱华赵文静邓燕竺蓓孙贞仲人前
- 关键词：TOLL样受体4小干扰RNA流式细胞术定量PCR
- 文献传递
- Toll样受体4小干扰RNA表达载体的构建及鉴定筛选被引量：1
- 2010年
- 目的构建并筛选到能有效抑制TLR4基因表达的小干扰RNA表达载体,用于研究TLR4基因功能。方法 RNA干扰采用体外构建小干扰RNA表达载体法,将构建好的表达载体转染单核细胞株,分别用流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化,筛选抑制效率最高的小干扰RNA表达载体。结果成功构建了TLR4小干扰RNA表达载体,并经电泳及测序证实;编号为S8-1的载体转染入细胞后,TLR4阳性率为27.03%,显著低于对照组的35.12%;流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测均证实编号为S8-1小干扰RNA表达载体的抑制效率最高,可用于后续实验。结论本实验所构建的编号为S8-1小干扰RNA表达载体可有效抑制TLR4基因表达,小干扰RNA表达载体法能够抑制体外培养细胞株TLR4的表达,可用于研究TLR4基因功能。
- 耿红莲王爱华陆慧琦赵文静邓燕竺蓓仲人前
- 关键词：TOLL样受体4小干扰RNA转染
- 人心肌线粒体肌酸激酶的提纯及抗体制备被引量：1
- 2004年
- 目的 从人心肌中分离纯化肌小节型线粒体肌酸激酶 (sMtCK) ,制备抗血清 ,从抗血清中制备对sMtCK有特异免疫反应的抗体 ,建立酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,测定血清sMtCK。方法 采用超低温高速离心、硫酸铵分级提取、SepharoseCL6B层析等技术分离纯化sMtCK ,免疫新西兰大白兔。应用自制抗sMtCK建立ELISA检测健康体检者、心肌炎及急性心肌梗死 (AMI)患者血清sMtCK。结果 经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)和Westernblot鉴定 ,纯化的sMtCK为单一蛋白质条带。制备的抗sMtCK多克隆抗体在琼脂糖免疫扩散实验和ELISA中的抗体效价分别为 1∶32和 1∶80 0。自制抗体建立的ELISA检测心肌炎和AMI患者的血清sMtCK阳性率分别为 5 1.6 % (16 / 31)和 5 4 .1% (2 0 / 37) ,与健康对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 经离心、提取、纯化所得的sMtCK是免疫纯。建立的ELISA检测血清sMtCK有助于心肌炎和AMI的诊断。
- 王爱华张建于嘉屏顾鹏飞竺蓓
- 关键词：抗体酶联免疫吸附试验
- 冠心病患者血清CRP和高半胱氨酸水平观察被引量：6
- 2009年
- 目的探讨冠心病(CHD)患者外周血C反应蛋白与高半胱氨酸(Hcy)水平的改变及其临床意义。方法测定108例CHD患者及56例健康体检者血清Hcy及CRP浓度,生化常规测定血脂及其他炎症指标,进行相关性分析。结果CHD组血清Hcy水平为(20.50±6.29)μmol/L,其中AMI组(21.09±9.04)μmol/L,非AMI组(20.30±5.14)μmol/L,均显著高于健康对照组(11.51±2.55)μmol/L(P<0.001),而CHD两组之间无显著性差异;CHD组血清CRP平均为25.23mg/L(0.16～179mg/L),其中AMI组为72.70mg/L(3.57～179mg/L),非AMI组为5.24mg/L(0.16～31.8mg/L),均显著高于健康对照组0.46mg/L(0.16～1.28mg/L)(P<0.001),CHD两组之间有显著性差异(P<0.01)。血清Hcy与WBC、T-Bil、D-Bil、I-Bil呈明显正相关,CRP与WBC、T-Bil、D-Bil、I-Bil呈明显正相关,与LDL-C、apoB100、TBA、Alb呈明显负相关。结论CHD患者血清Hcy和CRP水平明显增高,且与其他炎症指标或血脂呈一定相关性。
- 熊怡淞王爱华耿红莲陈军竺蓓施巍宇邓燕赵文静陈国飞仲人前
- 关键词：冠心病C反应蛋白高半胱氨酸炎症
- 自身免疫性肝病148例临床特点分析
- 目的:分析自身免疫性肝病(autoimmune liver diseases,ALDS)的临床、生化及自身抗体特点。方法:分析我院1996年-2005年148例ALDS患者[自身免疫性肝炎(autoimmune hepa...
- 屠小卿朱烨周琳吴萍耿红莲竺蓓顾鹏飞仲人前
- 关键词：自身免疫性肝炎原发性胆汁性肝硬化自身抗体
- 文献传递
- TLR4介导氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化作用的研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)的致动脉粥样硬化作用与Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达的相关性。方法构建针对TLR4的小干扰KNA(small interference RNA,siRNA)表达载体,转染人单核细胞株U937,于转染前后用不同浓度的ox-LDL刺激,用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化,同时用ELISA测定NF-κB活性改变以及细胞上清液中动脉粥样硬化相关细胞因子MCP-1和IL-8的浓度变化。结果ox-LDL刺激可导致单核细胞TLR4表达上调,同时NF-κB p65活性增强,MCP-1和IL-8在细胞上清液中的浓度显著高于对照组(P<0.05),并且呈剂量依赖性;利用siRNA表达载体使TLR4表达抑制后,相同剂量的ox-LDL刺激,NF-κB p65相对活性以及MCP-1和IL-8的分泌显著低于TLR4未抑制组(P<0.05)。结论ox-LDL的致动脉粥样硬化作用至少部分是由TLR4介导的;调节TLR4的表达,可以减弱ox-LDL刺激引起的包括NF-κB活化以及MCP-1和IL-8分泌等致动脉粥样硬化效应。
- 耿红莲王爱华屠小卿吴萍赵文静邓燕竺蓓仲人前
- 关键词：动脉粥样硬化氧化型低密度脂蛋白TOLL样受体4小干扰RNA
- 自身免疫性肝病148例临床特点分析被引量：10
- 2006年
- 目的分析自身免疫性肝病(autoimmune liver diseases,ALDS)的临床、生化及自身抗体特点。方法分析我院1996年-2005年148例ALDS患者其中自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)患者52例,原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosi,PBC)患者96例的临床表现,并分析有关实验室检查资料。结果两组患者临床症状均不典型,肝功能各项指标普遍异常,AIH组以ALT升高更为明显,而PBC组患者ALP和GGT升高更为显著(P<0.01)。在自身抗体检测情况两组有极大的差异。AIH患者主要以高效价的抗核抗体(antinuclear antibodies,ANA)(44/52)和/或抗平滑肌抗体(antismooth muscle antibodies)(35/52)为主,此外,尚有9.6%(5/52)和3.8%(2/52)的AHI患者出现抗可溶性肝抗原抗体(auti-soluble liver antigen autoantibdies,抗SLA)和抗肝/肾微粒体(liver/kidney microsomal,LKM)抗体阳性。PBC组以抗线粒体抗体(mitahondrial anto-antibodies,AMA)阳性(99.0%)为主,93.8%的患者AMAM2阳性。结论AIH及PBC的诊断可结合临床、生化、自身抗体检查的结果,其中自身抗体的检测尤为重要。
- 屠小卿朱烨周琳吴萍耿红莲竺蓓顾鹏飞仲人前
- 关键词：自身免疫性肝炎原发性胆汁性肝硬化自身抗体
- Toll样受体4小干扰RNA表达载体的构建及鉴定筛选
- 耿红莲王爱华陆慧琦赵文静邓燕竺蓓仲人前
- TLR4介导氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化作用的研究
- 本研究通过体外细胞培养，并将用定量PCR技术和RNA干扰技术相结合，从正反两方面对。xLDL与TLR4之间的关系进行研究。试验证实，ox-LDL的致AS作用至少部分是由TLR4介导的，调节TLR4的表达，可以减低ox-L...
- 耿红莲屠小卿吴萍赵文静邓燕竺蓓王爱华仲人前
- 关键词：TLR4介导氧化型低密度脂蛋白动脉粥样硬化发病机制
- 文献传递
- 肝功能相关酶学检测指标国产诊断试剂的质量比对研究
- 2011年
- 目的 评价在罗氏MODULAR P-800全自动生化分析仪（简称P-800）上应用国产诊断试剂检测肝功能相关指标的可行性.方法 应用上海复星长征医学科学有限公司和罗氏原装配套试剂,在P-800上同时测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰基转移酶（GGT）和碱性磷酸酶（ALP）.评价国产试剂的批内批间精密度、线性范围、抗干扰能力以及与罗氏原装配套试剂进行相关性分析.结果 精密度试验结果表明,国产试剂检测结果批内、批间变异系数（CV）均〈5%;线性范围验证试验表明国产试剂基本达到说明书声称的线性范围;干扰试验表明国产试剂与原装配套试剂的抗干扰能力无明显差异;方法学比对试验结果表明,应用国产试剂和原装配套罗氏试剂同时检测40份临床样本,其检测结果基本一致（P〉0.05）,相关性较好（r〉0.975,b在1.0±0.05之间）.结论 对于该研究涉及的四项肝功能相关酶学诊断指标,应用国产试剂与罗氏原装配套试剂相比,其相关性较好、精密度较高、线性范围达到说明书规定范围,对胆红素和乳糜有较好地抗干扰能力;肝功能相关国产诊断试剂检验结果与罗氏原装配套试剂具有可比性,可替代进口试剂,实现国产化.
- 耿红莲王淇泓竺蓓盛凤英施巍宇邓燕王爱华仲人前
- 关键词：诊断试剂精密度抗干扰偏倚
