胡频频
- 作品数：11 被引量：25H指数：2
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目重庆市科技攻关计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 依赖利福平结核分枝杆菌相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列研究被引量：11
- 2006年
- 目的研究临床依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)相关蛋白的氨基酸及其编码基因序列。方法以罗氏绝对浓度法药敏实验鉴定临床依R菌株(49株)、耐R菌株(54株)和R敏感菌株(30株),用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳(SDSPAGE)法对不同临床菌株及H37Rv标准株共计134株菌株的菌体蛋白质图谱进行比较分析,通过QTOF2型毛细管液相色谱电喷雾四极杆飞行时间串联质谱仪(LCESIMSMS)对其差异表达蛋白的氨基酸序列进行鉴定,并用对其蛋白的编码基因进行DNA序列分析。结果不同菌株的SDSPAGE菌体蛋白图谱基本相似。49株依R菌有41株(84%)在含R管中的菌体蛋白图谱有一条相同的高表达蛋白带(相对于标准物分子质量43000的下端),约占总菌体蛋白的30%～50%,H37Rv标准株、28株R敏感菌(28/30)及44株耐R菌(44/54)的含R管和对照管的蛋白图谱相似,且无相应的高表达现象;该高表达蛋白经氨基酸序列鉴定为结核分枝杆菌H37Rv假设蛋白Rv0341,相对分子质量为43894,等电点(PI)5.25,得分183。不同菌株的Rv0341编码基因1440bp扩增片段,经DNA测序分析均未发现突变。结论利福平对Rv0341在依R菌中的表达有上调作用,Rv0341与依R菌相关,可视为依R菌的相关蛋白或标志物;Rv0341与依R菌的毒力及细胞壁的合成是否相关有进一步的研究价值。
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- 关键词：分枝杆菌结核利福平蛋白质组
- 结核分枝杆菌Rv0341蛋白编码基因iniB的多态性分析
- 目的：研究结核分枝杆菌假设蛋白Rv0341编码基因iniB的多态性,确认其保守性,分析依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)在利福平(R)培养管中Rv0341高表达的可能原因。方法：用大肠埃希菌做为阴性对照,提取依R菌(14株...
- Wu Yuan吴园Hu Pinpin胡频频Wang Yiwei王易伟Li Xiuquan李秀全Mao Xuhu毛旭虎Zhong Min钟敏
- 关键词：结核分枝杆菌结构蛋白基因测序多态性分析
- 文献传递
- 在临床分枝杆菌L-J培养中增加利福平管的实验观察——从初代培养中筛检临床依赖利福平分枝杆菌
- 依赖利福平分枝杆菌(依R菌)具有在R中成长旺盛的特点。现有常规方法从枝杆菌的分离培养到药敏实验,至少需要1个半月才能了解菌株是否存在药物依赖现象。本文通过在临床痰标本分枝杆菌L-J初代培养中增加R药物管的平行培养,希望从...
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- 文献传递
- 结核分枝杆菌Rv0341蛋白编码基因iniB的多态性分析
- 目的研究结核分枝杆菌假设蛋白Rv0341编码基因iniB的多态性,确认其保守性,分析依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)在利福平(R)培养管中Rv0341高表达的可能原因。方法:用大肠杆菌做为阴性对照,提取依R菌(14株)、...
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- 关键词：结核分枝杆菌限制性片段长度多态性分析
- 文献传递
- rRNA扩增直接检测结核分枝杆菌的临床应用价值探讨被引量：11
- 2005年
- 王易伟钟敏胡频频
- 关键词：结核分枝杆菌抗酸染色结核病培养法
- 重庆地区耐多药和泛耐药结核病耐药性分布十年数据初步分析被引量：2
- 2010年
- 耐多药结核病（multi—drug resistant tuberculosis，MDR-TB）是指至少同时对异烟肼和利福平耐药结核菌感染所致的结核病，是近10多年来全球结核病疫情上升的主要原因之一。2006年以来出现了泛耐药结核病（extensively drug—resistant tuberculosis，XDR—TB）的报道。2006年世界卫生组织（WHO）定义，XDR—TB是指在符合MDR—TB的同时，
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- 关键词：耐多药结核病耐药结核病TUBERCULOSIS耐药性
- rRNA扩增结核分枝杆菌直接检测系统的方法学探讨(摘要)
- MTD方法基本原理:MTD系统的基本原理,是使用间接转录扩增技术,以结核分枝杆菌特异性rRNA为扩增目标,扩增片段被特异性DNA探针结合(杂交),再经杂交保护分析法筛选,最后以化学发光仪检测被标记的rRNA。
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- 文献传递
- 结核分枝杆菌H_(37)Rv株Rv0341编码基因iniB的克隆与表达被引量：2
- 2008年
- 目的克隆并表达编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因。方法利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增iniB基因,克隆于pET-22b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性。结果克隆并表达了iniB基因,表达的蛋白相对分子质量约43000,诱导2h表达量较高,约为25%。目的蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化后蛋白纯度可达98%以上。经Western blot检测,纯化蛋白与依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)肺结核患者血清呈现强阳性反应,而与非依R菌肺结核患者血清不反应。结论已成功克隆并表达了编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因,表达的重组蛋白具有反应原性及特异性,为依R菌结核病临床血清学快速诊断方法的建立及试剂盒的研发奠定了基础。
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- 关键词：结核分枝杆菌克隆
- 依赖利福平结核分枝杆菌Rv0341天然蛋白的诊断价值被引量：2
- 2009年
- 目的探讨依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,诊断依R菌感染肺结核病的价值。方法典型依R菌经SDS-PAGE、转膜后,获得Rv0341天然蛋白带,采用结核分枝杆菌抗体DIGFA诊断试剂检测血清Rv0341抗体,并考察该方法的重复性、特异性及敏感性。结果利用Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,具有良好的批内和批间重复性;血清Rv0341抗体在耐R菌肺结核组和R敏感菌肺结核组的特异性分别为92.3%(24/26)和79.3%(23/29),在依R菌肺结核R治疗组中的敏感性为88.9%(16/18);在培养阴性结核组中,阳性率为23.8%(29/122)。54份阳性结果血清进行重复实验,确认为阳性。结论Rv0341天然蛋白可作为诊断抗原用于依R菌结核病血清学诊断试剂盒的研发,以快速辅助诊断依R菌结核病,特别对菌阴依R菌结核病更有诊断价值。
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- 关键词：DIGFA结核病
- 一线抗痨药物均耐药结核菌体外组合药物作用效果研究
- 2009年
- 目的对临床主要一线抗痨药异烟肼(isoniazidum,H)、利福平(rifampin,R)、链霉素(streptomycin,S)和乙胺丁醇(ethambatal,E)均耐药结核菌株进行体外组合药物作用效果研究,拟探讨结核病主要一线药物均耐药再联合用药时,化疗是否有效的临床耐多药结核病治疗问题。方法采用BacT/ALERT 3D分支杆菌培养系统对10株常规L-J法药敏至少对H、R、S和E(或同时对R)依赖的结核菌株及H37Rv标准敏感菌株,以MIC和平均血药峰浓度分别进行H、R、S及E单一药物和H+E+S及H+S+E+R组合药物药敏平行实验;将3D培养42d结果为阴性的实验瓶混悬液再平行转种于L-J管继续培养,以确定药物作用的效果(观察细菌是否真正被药物杀死)。结果单一药物3D法与L-J法的药敏结果基本一致。3D法单一药物均耐药菌株组合药物MIC和平均血药峰浓度实验结果显示不同程度报告阳性时间延长趋势。3D法单一药物耐药,组合药物未报告阳性的实验瓶,转种于L-J管继续培养均报告阳性。病例追踪10株分离株均为一线正规化疗失败的复治肺结核患者。结论小样本菌株实验研究结果提示:体外3D法H、R、S及E单一药物均耐药的临床结核菌株,组合药物(MIC和平均血药峰浓度)对其细菌可有不同程度的相对抑制作用,但没有最终协同杀灭细菌,其实验结果与患者临床疗效相符合。
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- 关键词：分支杆菌结核耐多药结核病
