蒋留留
- 作品数：10 被引量：13H指数：2
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省高校优秀科技创新团队更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR146b在间质干细胞介导的顺铂诱导急性肾损伤修复中的作用及机制研究
- 祝源张娇叶惠慧蒋留留李里明尹磊王梅钱晖
- 关键词：AKI骨髓间质干细胞
- 人脐带间质干细胞来源的exosomes对肝细胞过氧化损伤的保护作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨人脐带间质干细胞来源的exosomes(hucMSC-Ex)对四氯化碳(CCL4)诱导的肝细胞氧化应激损伤的保护作用。方法将体外培养的人肝细胞系HL7702分为对照组(常规培养)、CCL4损伤组及hucMSC-Ex处理组(CCL4+hucMSC-Ex)。免疫荧光检测CM-Dil染料标记的hucMSC-Ex进入HL7702细胞的情况;免疫组织化学法分析细胞过氧化物8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的表达水平;比色法检测培养上清中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量;western blot分析P38MAPK通路的活化情况。结果免疫荧光结果显示,hucMSC-Ex可转移进入HL7702细胞;比色法结果表明,与对照组相比,CCL4损伤组HL7702细胞培养上清中GSH含量下降,MDA上升(P<0.01),hucMSC-Ex处理组GSH和MDA含量无显著性变化;免疫组化结果显示,与对照组相比,CCL4损伤组8-OHdG表达阳性的HL7702细胞(胞核棕黄色)数量明显增高,而hucMSC-Ex处理组阳性细胞数量无明显变化;western blot结果表明,CCL4损伤组P-P38蛋白表达水平明显上升,而hucMSC-Ex处理组P-P38蛋白表达下降,其P-P38与P38/GAPDH蛋白的灰度值较CCL4损伤组下降约2.4倍。结论 HucMSC-Ex可减轻CCL4诱导的肝细胞过氧化损伤。
- 王冰莹肖宇晴蒋留留李里明李霞贾浩源周颖叶惠慧许文荣严永敏钱晖
- 关键词：脐带间质干细胞四氯化碳肝损伤
- TGF-β1诱导人肝HL7702细胞发生上皮细胞间质转化的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨体外培养的人肝细胞系在重组人转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下是否发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchyme transition,EMT)以及相关标志物的表达变化。方法:人类肝细胞HL7702在含20%小牛血清的1640培养液培养2 d,改用无血清培养并TGF-β1分别诱导24 h,48 h,72 h;观察诱导前后细胞的形态学变化,实时荧光定量RT-PCR及蛋白质免疫印迹技术分析细胞中EMT相关基因和蛋白表达情况。结果:显微镜下观察到TGF-β1诱导前,肝细胞是不规则的六边形,诱导后细胞形态拉长变成纺锤形,细胞间隙变大;实时荧光定量RT-PCR和免疫印迹显示上皮化标志物E-钙黏附蛋白在TGF-β1诱导后的细胞中表达显著下降,而间质化标志物N-钙黏附蛋白、波形蛋白和Twist却显著增加。结论:正常人类肝细胞株HL7702经重组人TGF-β1的诱导发生上皮-间质转化,这为深入研究TGF-β1和肝纤维化之间的关系奠定了基础。
- 李婷芬王冰莹严永敏李里明蒋留留钱晖
- 关键词：转化生长因子Β1上皮-间质转化
- 人脐带间充质干细胞来源的exosomes对脂多糖诱导的肝星状细胞活化的抑制研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人脐带间充质干细胞(hucMSC)来源的外体(exosomes,hucMSC-Ex)对脂多糖(LPS)诱导的人肝星状细胞系LX2活化的抑制作用及其可能机制。方法体外培养LX2细胞,分别设PBS对照组、LPS组(100 ng/mL)及hucMSC-Ex组(LPS+150μg/mL hucMSC-Ex),48 h后收集细胞并提取相应的RNA及蛋白质。western blot检测LX2活化相关指标(α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白)和凋亡指标(Bcl2、Bax及caspase3蛋白)的表达情况;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测α-SMA mRNA表达水平;MTT法分析hucMSC-Ex对LX2细胞活化后增殖的影响。结果 LPS可刺激LX2细胞活化,活化后的LX2细胞形态由不规则形状向成纤维细胞样改变,并高表达α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白,其灰度值分别上升约2.45、2.34、2.77倍(P均<0.05);Bax及caspase3蛋白表达下降而Bcl2蛋白表达增强;LX2增殖能力增强;经hucMSC-Ex处理后,细胞形态由细长向不规则形态转变,α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白表达减弱,高表达Bax及caspase3蛋白而Bcl2蛋白表达下降,且细胞增殖减少(F=23.44,P<0.05)。结论 hucMSC-Ex能够抑制LPS诱导的LX2细胞活化,降低其增殖能力并促进细胞凋亡。
- 李里明蒋留留祝源严永敏叶惠慧贾浩源薛建国朱伟许文荣钱晖
- 关键词：脐带间充质干细胞脂多糖肝星状细胞
- 人肺癌A549细胞系SP细胞分选条件的优化
- 目的 优化人肺癌A549细胞系分选SP细胞的条件.方法 将人肺癌A549细胞分为两组：Hoechst33342组和抑制组(Hoechst33342+ Verapamil),流式细胞仪分选SP细胞.设置Hoechst333...
- 叶惠慧贾浩源张蕾蕾薛建国蒋留留李里明许文荣钱晖
- 关键词：SP细胞流式细胞术人肺癌细胞肿瘤干细胞
- 人脐带间质干细胞来源的EXOSOMES预防顺铂诱导的HK-2细胞损伤的实验研究
- 目的:建立人脐带间质干细胞来源的EXOSOMES(HUCMSC-EX)预防顺铂诱导的HK-2细胞损伤模型，评价其对顺铂诱导的HK-2细胞损伤的预防保护作用。通过对自噬相关分子的分析检测，探讨细胞自噬作用在其中发挥的重要作...
- 蒋留留
- 关键词：人脐带间质干细胞EXOSOMESHK-2细胞顺铂细胞损伤
- 文献传递网络资源链接
- 转移性人小细胞肺癌裸鼠模型的建立被引量：3
- 2012年
- 目的建立转移性人小细胞肺癌(SCLC)的裸鼠模型,探讨其用于人SCLC的治疗研究的可行性。方法 RPMI 1640培养基培养的人SCLC细胞株NCI-H446用无血清培养液重悬成1×107个/mL,取0.1 mL细胞悬液接种于BALB/c-nu裸鼠胫骨结节骨髓腔内,构建裸鼠模型并观察腿部肿瘤生长情况及肺等器官的转移情况。免疫组化染色检测小细胞肺癌标志物CD56及神经上皮干细胞标志物netsin的表达情况。结果经胫骨结节骨髓腔注射的方法注射细胞后裸鼠腿部均形成原位瘤,肺部转移6/6只,肝、脾等脏器未见转移灶。肿瘤组织细胞CD56阳性率>75%,nestin阳性率为4%～12%。结论经胫骨结节骨髓腔注射的方法可以形成弥散性肺部肿瘤,其他各器官则未见肿瘤块,可以为人SCLC实验性治疗的研究提供一种高效的实验模型。
- 丁小青蒋留留张志坚王梅许文荣朱伟钱晖
- 关键词：小细胞肺癌动物模型
- 流式细胞仪分选侧群细胞条件的探索与优化被引量：1
- 2014年
- 目的探讨不同浓度的荧光染料(Hoechst 33342)和抑制剂维拉帕米(verapamil)对流式细胞仪分选侧群(SP)细胞的影响。方法实验分为Hoechst 33342组(Hoechst 33342浓度分别为2.5、5.0和7.5μg/mL)和抑制组(Hoechst 33342+verapamil,verapamil浓度分别为50、100和150μmol/L),用流式细胞仪分选人肺腺癌细胞系A549中SP细胞,摸索Hoechst 33342和verapamil的最佳浓度,并用本实验室构建的一株肿瘤细胞系K1进行验证。结果在verapamil和Hoechst 33342浓度分别为150μmol/L和7.5μg/mL时,A549细胞染色充分,SP细胞亚群与非SP(non-SP)细胞亚群分群明显,SP细胞约为2.2%。K1细胞在verapamil为50μmol/L和Hoechst 33342为5μg/mL时,SP细胞亚群与non-SP细胞亚群分群明显,SP细胞亚群可被verapamil抑制,其比例约为1.3%。分选后的SP细胞和non-SP细胞可进一步扩增培养。结论 Hoechst 33342和verapamil可影响肿瘤细胞中SP细胞分选效率。
- 叶惠慧贾浩源张蕾蕾薛建国祝源蒋留留李里明许文荣钱晖
- 关键词：侧群细胞流式细胞术肿瘤干细胞人肺腺癌细胞
- 人脐带间质干细胞来源的exosomes对体内、外肝星状细胞活化的抑制作用
- 李里明贾浩源蒋留留叶惠慧祝源严永敏钱晖
- 关键词：脐带间质干细胞EXOSOME肝星状细胞
- 脐带间质干细胞来源的外切体对顺铂诱导的人肾小管上皮细胞损伤的修复作用被引量：2
- 2014年
- 目的:研究人脐带间质干细胞来源的外切体(hucMSC-Ex)对顺铂诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的修复作用,并探讨可能的作用机制。方法:体外建立顺铂诱导的HK-2细胞损伤模型,实验组以16μmol/L浓度的顺铂作用HK-2细胞16 h,再加入hucMSC-Ex共培养,同时选择人肺成纤维细胞的外切体(HFL1-Ex)为对照,8 h后采用蛋白质印迹法和FITC-Tunel技术检测hucMSC-Ex对损伤HK-2细胞的抗凋亡和促增殖情况。未经任何处理的HK-2细胞作为正常对照组,单纯顺铂损伤并加等量PBS为PBS对照组。结果:成功建立了顺铂诱导的HK-2细胞损伤体外模型,蛋白质印迹分析显示hucMSC-Ex处理改善了顺铂对HK-2细胞的损伤,凋亡蛋白Bax表达降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达相应升高。FITC-Tunel检测也显示HK-2细胞的凋亡明显减弱。而MTT分析显示hucMSC-Ex处理后,HK-2细胞的增殖能力显著增强。结论:HucMSC-Ex对顺铂诱导的HK-2细胞损伤有一定的修复效果,可能是通过促进HK-2细胞的增殖和抑制其凋亡来实现的。
- 蒋留留贾浩源祝源尹磊李里明叶惠慧薛建国许文荣钱晖
- 关键词：顺铂人肾小管上皮细胞增殖凋亡
