覃青松
- 作品数：12 被引量：101H指数：5
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
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- 猪肺炎支原体P46基因在大肠杆菌中的克隆、表达与ELISA方法研究
- 猪肺炎支原体(Mycoplasma Nyopneumoniae,M.hp)P46蛋白是M.hp的表面膜蛋白,具有种特异性.M.hp兔化弱毒株R659株、济南强毒株、强毒Z株、国际标准株232的P46基因被克隆到pGEM-...
- 覃青松
- 关键词：P46基因蛋白纯化ELISA
- 文献传递
- 一种猪肺炎支原体重组抗原ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种猪肺炎支原体重组抗原ELISA检测试剂盒。试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，该试剂盒的检测板为突变猪肺炎支原体膜蛋白P4...
- 沈青春宁宜宝高和义覃青松
- 文献传递
- 猪喘气病活疫苗及其生产方法
- 本发明涉及一种猪喘气病活疫苗及其生产方法。这种活疫苗是用一株适应在本发明所设计的一种猪肺炎支原体Lps培养基上生长的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneu moniae)RM48株经培养后加入冻干保护剂经真空...
- 宁宜宝沈青春李继庚王桂敏丁庆猷丁芳覃青松
- 文献传递
- 猪肺炎支原体P46基因的原核表达与间接ELISA方法的建立被引量：19
- 2012年
- 猪肺炎支原体是猪喘气病的病原体,本研究选择猪肺炎支原体P46膜蛋白基因亲水区序列进行克隆,并将其内3个编码Trp的TGA突变成TGG,然后再克隆到pET28a(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内实现了高效表达,表达产物相对分子质量约为31ku,约占菌体总蛋白35%,表达形式为包涵体,通过Western blotting证明表达产物与猪肺炎支原体高免血清具有很好的反应原性和特异性。将大肠杆菌表达的猪肺炎支原体P46重组蛋白经过洗涤、过柱纯化后,作为间接ELISA包被抗原用于检测猪血清中猪肺炎支原体抗体,通过对各参数和试剂的优化建立了rP46-ELISA方法,获得了较好的效果,通过与现有ELISA检测方法的比较,结果表明二者间具有较高的符合率。
- 沈青春王芳韩明远覃青松范学政杨汉春宁宜宝
- 关键词：猪肺炎支原体原核表达ELISA
- 猪肺炎支原体膜蛋白P46基因在大肠杆菌中的表达被引量：13
- 2005年
- 把猪肺炎支原体 (Mycoplasmahyopneumoniae) 国际标准株 2 32的P4 6基因克隆进pGEM_T_EASY载体上 ,通过PCR方法把该基因中三个编码Trp的密码子TGA突变为TGG ,然后将该基因亚克隆到载体pMAL_P2X上 ,得到重组表达载体 pMAL_P2X_P4 6。用该重组载体转化大肠杆菌TB1,得到表达重组菌TB1_pMAL_P2XA_P4 6 ,用终浓度为 0 3mM的IPTG在 37℃下诱导表达 ,获得可溶性表达的融合蛋白MBP_P4 6 ,在免疫印迹试验中 ,兔抗MBP高免血清和兔抗猪肺炎支原体高免血清都能与目的蛋白发生阳性反应 ,证明猪肺炎支原体P4 6基因在大肠杆菌里获得了可溶性表达。
- 覃青松宁宜宝沈青春
- 关键词：猪肺炎支原体突变免疫印迹试验
- 猪肺炎支原体的研究进展被引量：64
- 2003年
- 猪支原体肺炎是一直困扰养猪业发展的重要疾病之一。本文综合国内外对其病原—猪肺炎支原体的最新研究情况,从其对猪生长性能的影响、防治动向、检测、主要抗原的研究、基因工程疫苗研制等五个方面进行讨论。
- 沈青春宁宜宝覃青松
- 关键词：猪肺炎支原体猪支原体肺炎抗原基因工程疫苗
- 一种猪肺炎支原体重组抗原ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种猪肺炎支原体重组抗原ELISA检测试剂盒。试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，该试剂盒的检测板为突变猪肺炎支原体膜蛋白P4...
- 沈青春宁宜宝高和义覃青松
- 文献传递
- 猪肺炎支原体表面蛋白P46基因的克隆与序列比较
- 猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)兔化弱毒株R659株、济南强毒株、强毒Z株、国际标准株232,通过A26培养基培养,提取DNA;利用PCR技术从四株猪肺炎支原体中均能扩增出目的条带...
- 覃青松宁宜宝沈青春
- 关键词：猪肺炎支原体P46基因克隆PCR扩增
- 文献传递
- 8种抗菌药对我国部分地区鸡大肠杆菌、沙门氏菌分离株的最小抑菌浓度的测定
- 利用试管法将我国不同年代不同地区分离的52株大肠杆菌和33株沙门氏菌对8种目前我国常用的抗菌药物进行了抑菌实验.结果表明:14株历史性大肠杆菌全部对恩若沙星等喹诺酮类药物非常敏感,而30-50﹪的菌株对常用的5种抗生素有...
- 宁宜宝宋立张秀英沈青春范学政吴好庭覃青松王琴高光吴惠明
- 关键词：大肠杆菌沙门氏菌耐药性最小抑菌浓度
- 文献传递
- 猪肺炎支原体表面蛋白P46基因的克隆与序列比较被引量：7
- 2004年
- 猪肺炎支原体 (MycoplasmaHyopneumoniae ,Mhp)兔化弱毒株R6 5 9株、济南强毒株、强毒Z株、国际标准株2 32 ,通过A2 6培养基培养 ,提取DNA ;利用PCR技术从四株猪肺炎支原体中均能扩增出目的条带。将该序列克隆到pGEM_T_Easy载体上测序。结果表明 ,克隆序列全长 115 2bp ,编码 383个氨基酸和一个终止子 (TAA) ;该序列中含有 3个TGA编码Trp ,而不是终止密码子。比较兔化弱毒株与济南强毒株、国际标准株 2 32及NCBI上发布的J株的P4 6基因序列 ,发现它们的同源性分别为 98 6 %、99 2 %、99 2 % ;比较它们编码的氨基酸发现它们的同源性分别为 98 7%、99 2 %、99 2 %。结果表明猪肺炎支原体的P4 6基因在猪肺炎支原体种内是很保守的 ,因此建立以P4 6蛋白为诊断抗原的ELISA具有潜在的意义。
- 覃青松宁宜宝沈青春
- 关键词：猪肺炎支原体P46基因克隆
