谢立新
- 作品数：30 被引量：111H指数：6
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- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 四种靶向因子与柯萨奇病毒B3 VP1融合基因疫苗免疫效果的比较被引量：2
- 2010年
- 目的:比较巨噬细胞源趋化因子(MDC)、补体片段C3d3、志贺毒素B亚单位(STxB)和小鼠β-防御素2(mBD2)分别与柯萨奇病毒B3(CVB3)VP1构建的融合基因疫苗及VP1基因疫苗对小鼠的免疫效果。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为6组,每组22只,分别于股四头肌注射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/VP1-C3d3、pcD-NA3/STxB-VP1和pcDNA3/mBD2-VP1,接种剂量为每次100μg/只,3周免疫1次,共3次。每次免疫后第14天内眦静脉取血,用微量中和试验滴定血清中和抗体滴度。第3次免疫后第21天,每组随机取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,用CCK-8细胞计数法检测特异性CTL的杀伤活性;每组取3只小鼠以3LDLD50CVB3病毒攻击,第7天取血处死,检测血清病毒滴度;其余小鼠以5LDLD50的CVB3攻击,观察各组的生存情况。结果:除了pcDNA3对照组,其他各组的中和抗体滴度均随免疫次数的增加而提高(P<0.01),第3次免疫后,pcD-NA3/MDC-VP1、pcDNA3/VP1-C3d3和pcDNA3/mBD2-VP1组的抗体滴度明显高于pcDNA3/VP1组(P<0.01);pcDNA3/STxB-VP1和pcDNA3/mBD2-VP1组CTL杀伤活性显著高于其他各组(P<0.01)。致死量病毒攻击后,pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/VP1-C3d3和pcDNA3/mBD2-VP1组小鼠血中病毒滴度显著低于其他组(P<0.01);pcDNA3/MDC-VP1和pcD-NA3/VP1-C3d3组小鼠生存率显著高于其他各组(P<0.05)。结论:pcDNA3/MDC-VP1和pcDNA3/VP1-C3d3能诱导出较强的体液免疫和细胞免疫,能有效降低血中病毒滴度,获得较高的小鼠生存率;整体效果优于其他组。
- 刘贵霞蓝佳明揣侠高志云金玉怀张永红谢立新殷长甫王永祥
- 关键词：基因疫苗
- 头孢羟氨苄与甲氧苄啶联合对葡萄球菌和乙型链球菌的体外抗菌作用被引量：7
- 2005年
- 目的观察头孢羟氨苄与甲氧苄啶以不同比例配伍后对葡萄球菌、乙型链球菌抗菌的作用.方法通过2倍稀释法分别测定出乙型溶血性链球菌ATCC32204、金葡菌ATCC26003及临床分离株对头孢羟氨苄与甲氧苄啶的MIC值;用微量棋盘稀释法测出头孢羟氨苄与甲氧苄啶联用后的分级抑菌浓度(FIC)指数和联合杀菌协同系数(T/E).结果头孢羟氨苄与甲氧苄啶联用后的FIC指数范围为0.2～0.86,联合杀菌协同系数达0.7以上.结论无论从FIC指数还是从杀菌协同系数衡量,头孢羟氨苄与甲氧苄啶联用有协同作用或相加作用,体外抗菌活性明显增强.
- 谢立新金玉怀张永红殷长甫张卫东金世香王志良冷健刘书睿
- 关键词：头孢羟氨苄甲氧苄啶葡萄球菌链球菌
- MIP-1α和Flt3l基因佐剂联合应用对HPV16E7 DNA疫苗的免疫增强作用被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和酪氨酸激酶受体3配体(Flt3ligand,Flt3l)基因佐剂联合应用增强人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus16,HPV16)E7DNA疫苗免疫效果的可能性。方法:构建真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7。C57BL/6小鼠随机分为8组,分别为pcDNA3组、pcDNA3/MIP-1α组、pcDNA3/Flt3l组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/Flt3l混合组、pcDNA3/HPV16E7组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/HPV16E7混合组、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组以及pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组。每组14只,肌肉注射质粒免疫小鼠,每3周免疫1次,共3次;末次免疫后2周每组随机抽取6只小鼠,取脾脏制备淋巴细胞悬液,用CCK-8试剂盒检测其对TC-1靶细胞的特异性杀伤能力。其余小鼠在腹股沟处皮下注射5×104个TC-1细胞,观察肿瘤生长情况。结果:成功构建了真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7;pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的CTL杀伤能力明显高于其它各组(P<0.01);肿瘤细胞攻击后16天,pcDNA3组小鼠全部长出肿瘤,而pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的成瘤率仅为12.5%,明显低于其他组,统计学分析示8组之间成瘤率差异有显著性(P=0.007)。60天后各组成瘤率之间的差异无统计学意义(P=0.229)。结论:联合应用MIP-1α和Flt3l基因佐剂增强了HPV16E7DNA疫苗的免疫效果,一定程度上延缓了肿瘤的发生。
- 蓝佳明高志云耿媛揣侠赵娜韩小艳张永红谢立新金玉怀王永祥
- 关键词：巨噬细胞炎性蛋白1Α基因佐剂DNA疫苗
- 柯萨奇病毒B3 VP1蛋白、rAd/VP1和pcDNA3/VP1的免疫效果比较被引量：2
- 2011年
- 目的 观察柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）衣壳蛋白VP1、表达VP1蛋白的重组腺病毒rAd/VP1和重组质粒pcDNA3/VP1的免疫效果.方法 用原核细胞表达VP1蛋白并纯化、扩增重组腺病毒rAd/VP1,扩增并提取真核表达质粒pcDNA3/VP1.BALB/c小鼠随机分为4组,每组18只,分别在股四头肌注射VP1蛋白、rAd/VP1、pcDNA3/VP1和PBS.VP1蛋白组和pcDNA3/VP1组免疫3次,间隔3周;rAd/VP1组免疫2次,间隔2周.VP1蛋白、pcDNA3/VP1和rAd/VP1每次每只注射剂量分别为50μg、100μg和1.2×107PFU.用ELISA法和微量中和试验法检测各次免疫后血清CVB3特异性IgG抗体和中和抗体滴度;末次免疫后3周,CCK-8法检测脾脏淋巴细胞的CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击小鼠后,检测血中病毒滴度并观察动物的存活情况.结果 VP1蛋白组血清特异性IgG抗体和中和抗体滴度明显高于其他实验组（P＜0.05）,而脾脏淋巴细胞CTL杀伤活性低于rAd/VP1组（P＜0.05）;致死量病毒攻击后,VP1蛋白组血中病毒滴度低于pcDNA3/VP1和rAd/VP1组（P＜0.05）,生存率明显高于这两组（P＜0.05）.结论 VP1蛋白疫苗能诱导较高水平的体液免疫应答,对动物有明显的免疫保护作用,免疫效果优于质粒pcDNA3/VP1和重组腺病毒rAd/VP1.
- 蓝佳明高志云李嘉金玉怀温婵李伟闫立景刘贵霞谢立新王永祥
- 关键词：柯萨奇病毒B3腺病毒载体疫苗蛋白疫苗
- 增强柯萨奇病毒B3 VP1核酸疫苗免疫效果的研究
- 王永祥金玉怀揣侠房文亮王晓凌方艳辉赵娜韩小艳高志云蓝佳明吴淑慧刘贵霞于丹军张永红谢立新
- 该课题应用分子生物学、病毒学、免疫学、医学信息学等各学科的最新发展，深入研究了增强CVB3 VP1 核酸疫苗免疫效果的方法，构建了真核表达质粒pcDNA3/VP1，肌肉注射免疫小鼠后可诱导产生中和抗体，为了提高免疫效果进...
- 关键词：
- 关键词：核酸疫苗免疫效果
- 格氏乳杆菌HMV18及其外泌蛋白和应用
- 本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及格氏乳杆菌HMV18及其外泌蛋白和应用。该格氏乳杆菌HMV18于2019年7月11日保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2019538；保藏地址为中国，武汉...
- 贾娴娴高翔贾苗苗丛斌王子璇李青霞张永红谢立新张君
- 文献传递
- 创新性设计性实验在医学微生物学实验教学中的应用被引量：5
- 2009年
- 刘贵霞李敬玉谢立新殷长甫高志云张永红王永祥
- 关键词：医学微生物学设计性实验
- 抗病毒药物对HCMV感染的人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响
- 2007年
- 目的观察人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell,HUVEC304)细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)基因表达及抗病毒药物对ICAM-1表达的影响。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应技术动态检测HCMV感染的HUVEC304和更昔洛韦(ganciclovir,GCV)与膦甲酸钠(foscarnet sodium,PFA)干预受染的HUVEC304 ICAM-1mRNA的表达。结果常规培养的HUVEC304可表达ICAM-1;HCMV感染后4 h,ICAM-1 mRNA的表达开始增加(P<0.05),6 h达高峰(P<0.01),36 h表达水平开始下降,但仍高于正常细胞;GCV和PFA可抑制HCMV感染诱导的ICAM-1表达的上调(P<0.05)。结论HCMV感染可引起ICAM-1 mRNA的表达增加;应用GCV和PFA可抑制HCMV诱导ICAM-1 mRNA的表达。
- 高志云王晓凌韩小艳谢立新高玉林王永祥
- 关键词：巨细胞病毒脐静脉内皮细胞细胞黏附分子
- PcDNA3/mIL-18对pcDNA3/VP1疫苗免疫效果的影响
- 2007年
- 目的观察pcDNA3/mIL-18对pcDNA3/VP1DNA疫苗免疫效果的影响。方法从烫伤小鼠肺部组织细胞中提取总RNA进行RT-PCR扩增;将扩增产物与pGEM-T载体连接,构建mIL-18原核表达质粒pGEM-T/mIL-18,酶切纯化mIL-18片断,构建真核表达质粒pcDNA3/mIL-18,将其作为基因佐剂和pcDNA3/VP1共免疫BALB/c小鼠。结果3次免疫后,共免疫组中和抗体滴度高于pcDNA3/VP1组;而病毒滴度低于pcDNA3/VP1组。用10LD50CVB3攻击后,共免疫组小鼠生存率为35%,高于pcDNA3/VP1组。结论PcDNA3/mIL-18对pcDNA3/VP1DNA疫苗的免疫效果有一定的增强作用。
- 吴淑慧王晓凌金玉怀王刚王永祥谢立新张永红戴军
- 关键词：白细胞介素18柯萨奇病毒B组3型
- 小鼠IFN-γ基因佐剂对分泌型柯萨奇病毒B3 VP1核酸疫苗免疫作用的影响被引量：4
- 2006年
- 目的构建小鼠IFN-γ真核表达质粒,观察其对分泌型柯萨奇病毒B3(CVB3)核酸疫苗的影响.方法以RT-PCR扩增小鼠IFN-γ基因,构建真核表达重组质粒pcDNA3/mIFN-γ,检测其在cos-7细胞内的表达;将分泌型pcDNA3/sVP1,pcDNA3/sVP1+pcDNA3/mIFN-γ肌注免疫小鼠,每2wk注射1次,共3次,每次免疫后13d取血测血清抗体水平.末次免疫后2wk,以500TCID50的CVB3腹腔内感染,观察小鼠的存活情况.结果成功构建了pcDNA3/mIFN-γ并能有效表达;pcDNA3/sVP1组和pcDNA3/sVP1+pcDNA3/mIFN-γ组均能诱导小鼠产生中和抗体,抗体滴度随免疫次数的增加而提高,但两组小鼠抗体滴度和生存率无显著性差异;混合质粒注射组血清的病毒滴度明显低于pcDNA3/sVP1组,且心肌病理损伤明显减轻.结论IFN-γ作为基因佐剂,在一定程度上增强了分泌型CVB3VP1基因疫苗的免疫保护作用.
- 揣侠高志云房文亮金玉怀张永红谢立新王永祥
- 关键词：小鼠
