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邓小昭

作品数:136 被引量:450H指数:10
供职机构:南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 122篇期刊文章
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领域

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  • 20篇农业科学

主题

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作者

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传媒

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年份

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  • 12篇2001
  • 4篇2000
  • 5篇1999
136 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
吸毒人群中丙型肝炎患者F蛋白抗体检测被引量:4
2010年
目的了解丙型肝炎病毒(HCV)F抗体在南京市吸毒人群HCV感染者中的分布特点,为丙型肝炎防治及制定慢性化预防策略提供依据。方法利用pEGX-4T-2/HCV-F融合载体表达蛋白HCV-F/GST作为抗原,包被酶联反应板,ELISA间接法检测362例HCV感染者及50例正常人血清HCV-F抗体,结合其人口学特征和疾病特征,统计分析HCV-F抗体的分布情况及与HCV感染的关系。结果 362例感染HCV的吸毒者F抗体阳性率为31.5%。通过比较发现F抗体阳性率在性别、吸毒时间、吸毒方式等因素中分布无统计学差异,而F抗体阳性率与年龄、联合感染可能具有一定关联。结论南京市吸毒人群HCV感染者中存在F抗体,其可能与疾病病程相关。
朱萍王昊鹏杨静静邓小昭郑锦锋张云
关键词:肝炎病毒属F蛋白吸毒人群
一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建被引量:13
2000年
用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。
邓小昭朱应刁振宇齐义鹏周宗安
关键词:BMNPVBACHBCAG
血清抗F蛋白抗体与HCV基因分型及丙型肝炎的关系被引量:2
2012年
目的探讨血清抗F蛋白抗体与HCV基因分型及不同临床分型的丙型肝炎的关系。方法收集256例抗HCV抗体阳性患者血清标本,用ELISA法检测血清抗F蛋白抗体,提取HCV RNA并进行逆转录反应,根据5'非编码区(5'NCR)1,2,3,1b型碱基序列,设计保守区通用引物及型特异性引物。用巢式PCR对HCV进行基因分型。结果抗F蛋白抗体阳性率为61.3%(157/256)。男性与女性抗F蛋白抗体率分别为64.3%(110/171)与55.3%(47/85),差异无统计学意义(χ2=1.953,P>0.05)。与急性丙型肝炎抗F蛋白抗体阳性率的36.6%(15/41)相比,慢性丙型肝炎为63.6%(112/176)、丙型肝炎合并肝硬化为76.9%(30/39),差异有统计学意义(χ2分别为10.02和13.21,P均<0.01)。HCV RNA阳性患者抗F蛋白抗体阳性率为62.5%(90/144)与阴性患者的59.8%(67/112)相比无显著性差异(χ2=0.187,P>0.05);基因分型结果表明,1b型抗F蛋白抗体阳性率为62.8%(81/129),2型为60.0%(6/10),1b/2型为60.0%(3/5),各型抗F蛋白抗体阳性率无明显差异(χ2分别为0.109和0.105,P均>0.05)。结论血清抗F蛋白抗体与HCV临床分型有关,与性别、HCV RNA以及HCV基因型分布无关。
丁伟良刘奇黄莺葛志军王洁邓小昭喻荣彬张云
关键词:丙型肝炎基因分型
从狗肺中分离到流行性出血热病毒被引量:2
1989年
1984—1985年,从安徽省EHF疫区收集78只狗肺,用IFAT检测,5只EHF抗原阳性,阳性率为6.4%,并从EHF抗原阳性的狗肺中分离到两株EHFV,从而首次证明狗可自然感染EHFV。狗有捕食鼠类的习性,与人接触密切,其传播EHF的作用需要进一步研究。
张云沈建中张炳根邓小昭赵学忠吴光华
关键词:出血热病毒间接免疫荧光
重组病毒/家蚕细胞系统稳定高效表达HBeAg基因的研究被引量:3
1998年
以 HBe Ag(乙型肝炎病毒 e抗原 )基因置换家蚕核多角体病毒 (Bm NPV)中多角体蛋白基因编码序列 ,获得高效表达 HBe Ag的重组病毒 r Bm HBe。在重组病毒复制过程中 ,家蚕 Bm N细胞的病理变化与野生型病毒的感染相同 ,但不能形成多角体。重组病毒的复制为典型的一步生长曲线 ,感染后 2 4 h~ 36h,病毒效价递增并达到最高。感染后 2 4 h,培养液中可检测到表达产物HBe Ag,72 h达到高峰。病毒感染复数的改变对 HBe Ag表达的影响是时限性的。低感染复数时HBe Ag产量较高。细胞接种密度及病毒接种时间对 HBe Ag的表达有较大的影响 ,最适的细胞接种密度为 3.2~ 6.4× 1 0 5 细胞 /瓶 ,在细胞指数生长前期 (48h~ 60 h)接种重组病毒 ,对于获得较高的重组病毒复制效价和 HBe Ag的产量都是有利的。在采用最佳技术参数组合的条件下 ,ELISA法检测细胞培养液中 HBe Ag滴度可达 1∶ 32 0 0 0。以上研究结果有助于在生产中高效稳定地制备HBe Ag,以满足供应配套乙肝 HBe Ag/抗
邓小昭何亮刁振宇张林元李光富
关键词:核多角体病毒E抗原HBV
丙型肝炎病毒5′utr分型和C区基因分型结果的比较被引量:1
2006年
目的比较丙型肝炎病毒(hepatitis C vims,HCV)不同基因分型方法的一致性。方法采用5′非编码区(NCR)型特异性引物分型法和核心区型特异性引物分型法分别对95例和其中的31例HCV RNA阳性患者的血清样本进行基因分型,分析不同分型方法的灵敏度和稳定性异同。结果两种分型方法的一致性达到93.5%,对于混合感染的发现能力C区分型较强,稳定性无差异。结论C区分型方法更加精确。
丁伟良许可邓小昭喻荣彬杨志贤邵建伟谈永飞张云
关键词:丙型肝炎病毒核心区基因分型
家蚕核多角体病毒载体稳定高效表达HBeAg条件及其初步应用的研究
2001年
利用已构建的含有HBeAg基因的重组家蚕核多角体病毒rBmHBe ,摸索了HBeAg在家蚕细胞中表达的最佳条件组合 ,细胞接种密度 :(3 .2~ 6 .4)× 10 5细胞 /瓶。病毒接种时间 :细胞接种后 48~ 6 0h。感染复数 (MOI)为 0 .0 4~ 0 .4PFU/细胞。细胞上清经硫铵沉淀、分子筛和阴离子交换柱层析纯化获得电泳纯样品。该样品与E .coli表达的HBeAg相比 ,抗原性高出 10 0倍 ,且与抗HBc交叉反应低至 1%倍。利用该样品建立双抗原夹心法测定抗HBe ,灵敏度高于目前的市售抗HBe试剂盒。
高健刁振宇邓小昭周宗安王永山
关键词:乙肝病毒E抗原家蚕核多角体病毒纯化乙型肝炎
携带猪囊虫表位的嵌合蛋白疫苗的构建及其免疫学研究被引量:6
2006年
用PCR法将猪囊虫抗原表位n1、n2插入乙肝病毒核心蛋白(HBc)序列的第78~79位之间,将猪囊虫抗原表位n3接在149位之后,再将该序列克隆入pET28a载体中,构建了重组表达质粒pET28a—△c-3n,在大肠杆菌中表达出融合蛋白。命名为PCCE。将PCCE纯化后免疫小鼠,以ELISA检测小鼠的体液免疫应答,Western blot检测抗体的特异性.Dot ELISA验证所选表位的保护性。另用绦虫卵攻击免疫小鼠,以观察疫苗的保护作用。测序结果表明,重组质粒构建成功;SDS—PAGE显示,融合蛋白表达正确,电镜证实有蛋白颗粒形成。对免疫小鼠应用ELISA检测到高滴度抗体;Western blot结果表明。免疫鼠体内诱导出了3种特异性抗体;Dot ELISA结果表明,所逸表位对宿主可能具有保护性。绦虫卵攻击免疫小鼠试验表明,疫苗PCCE的相对保护率为89%。结论:成功地表达和纯化了以HBc为载体的携带3个猪囊虫表位的融合蛋白(PCCE),以PCCE作为疫苗免疫小鼠,能诱导较强的特异性体液免疫反应,免疫小鼠对绦虫卵攻击具有较好的免疫保护作用。
邓小昭周宗安刁振宇高健王元伦刘玉郑纪山
关键词:猪囊虫疫苗HBCAG免疫反应
HCV-F基因在hepG2细胞中的表达以及对PI3K的影响
2008年
探讨丙型肝炎病毒(HCV)F基因对PI3K表达的影响。应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得HCV-F基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0(-)中。通过酶切、PCR及测序鉴定,HCV-F基因已正确插入到pcDNA3.0(-)中,再利用脂质体转染HepG2细胞。经RT-PCR及Westernblot检测,HCV的F基因在HepG2细胞中获得表达,而且在表达重组HCV-F的转染HepG2细胞中,检测到PI3K蛋白的表达。实验表明HCV-F可在体外激活PI3K及其信号通路。
储春丽邓小昭董莉莉胡学芳喻荣彬张云吴超
关键词:丙型肝炎病毒F蛋白HEPG2细胞磷脂酰肌醇-3激酶
马立克氏病病毒糖蛋白B基因克隆及其在家蚕细胞中的表达
1996年
将马立克氏病病毒(MDV)GA株基因文库中的BamHII3和K3克隆质粒分别用双酶切消化,获得2.8kb的BamHI-SalⅠ片段和1.1kb的BamHI-EcoRI片段,然后将这2个片段定向克隆于载体pUR222中,构建了含MDV糖蛋白B(gB)基因的重组质粒。为了基因操作方便和高效表达,设计了1对带有酶切位点的引物,用PCR扩增了MDVgB基因部分片段,并按正确方向插入去磷酸化的载体质粒中,得到起始密码子前带有EcoRI酶切位点的MDVgB基因克隆,再将该基因插入去磷酸化的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)转移载体pBF14中,DNA序列分析确证了克隆基因及阅读柜架的正确性。以重组转移载体与野生型BmNPV共转染家蚕细胞,用有限稀释法点杂交结合空斑技术纯化重组病毒。用荧光抗体试验检查重组病毒感染的家蚕细胞。
罗满林陈溥言蔡宝祥张林元邓小昭
关键词:马立克氏病病毒分子克隆
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