郑伟
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- pEGFP-N1-亚麻苦甙水解酶重组真核表达载体的构建及亚麻苦甙水解酶在SGC-7901细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:构建携带亚麻苦甙水解酶(lis)基因的重组真核表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,导入SGC-7901细胞中表达。方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该基因全长定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体。用电穿孔法转染体外培养的SGC-7901细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察lis-EGFP融合蛋白在细胞中的表达。用PCR检测lis转录水平的表达,用Western blot法验证lis蛋白水平的表达。结果:酶切和测序证实pEGFP-N1-lis重组质粒构建正确,重组质粒载体在SGC-7901细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有lis和EGFP的双重活性。结论:通过基因克隆方法成功地构建了pEGFP-N1-lis重组质粒载体,并且在SGC-790细胞中稳定表达。
- 马俊陈明浩窦科峰李军郑伟霍斌亮张福琴李海民
- 关键词：基因转染技术自杀基因
- HIFU联合超声造影剂切除兔肝VX2瘤周围不同范围组织的疗效研究
- ＜正＞目的探讨高强度聚焦超声（HIFU）联合超声造影剂（UCA） 治疗肝癌时的最适切除范围。方法构建兔肝 VX2肿瘤模型45只,并随机等分为3组, 每组15只：HIFU+UCA 沿肿瘤边缘切除肿瘤（A 组）、切除肿瘤+周...
- 范志勇宋振顺郑伟黄盛张福琴罗文周晓东
- 文献传递
- 高强度聚焦超声联合超声造影剂消融肝脏VX2移植瘤的实验研究
- 2008年
- 目的探讨高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound，HIFU）联合超声造影剂（ultrasound contrast agents，UCA）治疗肝癌时的最适消融范围。方法构建新西兰兔肝VX2移植肿瘤模型。51只模型兔分为3组：HIFU联合UCA沿肿瘤边缘消融肿瘤（A组）、消融肿瘤及肿瘤周围2mm内的组织（B组）、消融肿瘤及周围4mm内的组织（C组）。比较治疗后靶组织的病理情况、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平、肝内、肺及腹腔的转移情况以及生存期的差异。结果HIFU联合UCA治疗后，各组靶区肿瘤组织均发生凝固性坏死；治疗后3d、5d，C组患者ALT显著升高，组间比较差异有统计学意义（F=12．933、18．37，均P〈0．01），C组最高；治疗后14d，B组、C组ALT降至正常，组间比较差异无统计学意义（F=0．043，P〉0．05），A组ALT水平高于B组和C组（F=17．2，P〈0．05）。治疗后两周肝内、肺及腹腔转移率A组均明显高于B组和C组（分别x^2=9．918、6．300、7．6701，均P〈0．05），B组和C组差异无统计学意义（均P〉0．05），平均生存期A组（29±5．4）与B组（48±13．6）、C组（51±12．1）差异均有统计学意义（P〈0．05），B组和C组差异无统计学意义（P〉0．643）。结论HIFU联合UCA在消融移植瘤周围组织2mm以上时可明显降低治疗后转移率，延长荷瘤兔的生存时间。
- 范志勇宋振顺郑伟黄盛张福琴罗文周晓东
- 关键词：超声疗法造影剂
- 同种异体胰岛及胰腺干细胞来源的胰岛样结构序贯移植治疗糖尿病被引量：2
- 2008年
- 目的观察同种异体大鼠胰岛及胰腺干细胞来源的胰岛样结构序贯移植在糖尿病治疗中的作用。方法分离胰腺组织获得胰岛及胰腺导管上皮细胞，将具有干细胞潜能的胰腺导管上皮细胞在体外培养27d。将新鲜分离的胰岛（200±50）个及诱导分化2周的胰腺干细胞来源的胰岛样结构（2×10^6）个序贯移植到糖尿病大鼠的肾被膜下观察大鼠的血糖及生存情况。结果将胰岛及胰腺干细胞来源的胰岛样结构序贯移植到同一糖尿病大鼠3周后血糖仍在5mmol／L水平，对照组血糖无明显下降。结论胰腺干细胞可诱导分化为分泌胰岛素的胰岛样结构，胰岛及胰腺干细胞来源的胰岛样结构序贯移植对大鼠糖尿病有治疗作用。
- 郑伟范志勇黄盛高琪张福琴宋振顺
- 关键词：胰岛胰腺干细胞糖尿病
- 不同微环境对骨髓间充质干细胞分化为产胰岛素细胞的影响被引量：12
- 2008年
- 目的观察不同的微环境对大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）体外分化成为产胰岛素细胞（IPCs）的影响。方法采用贴壁法分离纯化大鼠MSCs，用不同的微环境进行诱导，对照组诱导剂为含有角朊细胞生长因子、ITS、尼克酰胺的无血清DMEM／F12培养基、实验组在对照组基础上添加胰腺条件培养液；对诱导后细胞进行光、电镜观察，双硫腙和免疫细胞化学进行鉴定，并进行体外葡萄糖刺激实验，测定细胞分泌胰岛素及C-肽功能。结果实验组及对照组均可诱导分化为IPCs，但实验组分化而成的IPCs在数量及功能上均高于对照组。结论大鼠胰腺提取物模拟的微环境能促进大鼠MSCs体外诱导分化为较高质量的IPCs。
- 黄盛郑伟范志勇张福琴窦科峰宋振顺
- 关键词：骨髓间充质干细胞胰岛素分化
- pEGFP-N1-linamarase重组真核表达载体的构建及linamarase在MH-CC97中的表达被引量：7
- 2008年
- 目的:构建携带木薯亚麻苦甙水解酶(lis)基因,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体,并导入人肝癌细胞MHCC97中表达.方法:提取木薯总RNA,PCR扩增lis目的基因,将该全长基因定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒载体.利用电穿孔转染体外培养的MHCC97,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察lis-EGFP融合蛋白在细胞中的表达;PCR检测lis基因转录水平的表达;Western Blot方法验证lis蛋白水平的表达.结果:PCR扩增片段与预期结果相符,酶切和测序证明pEGFP-N1-lis真核表达载体构建成功.pEGFP-N1-lis转染MHCC97细胞后,Western Blot可以检测到lis蛋白在MHCC97细胞表达,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达.结论:成功构建真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1-lis,可为后续lis基因功能的研究奠定实验基础.
- 马俊陈明浩窦科峰李军郑伟霍斌亮张福琴李海民
- 关键词：聚合酶链反应基因转染自杀基因
