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致病菌耐药因子分布及特征分析被引量：1: 2006年; 目的对临床菌株中的整合子分布及其携带耐药基因盒的结构特征进行分析。方法应用多重PCR方法检测55株临床菌株中的3类整合酶基因intI,并对intI阳性菌株耐药基因盒进行测序及序列分析。结果55株临床菌株均为第1类整合酶基因阳性(100%)。耐药基因盒特异PCR扩增发现,27株革兰阳性菌株和22株革兰阴性菌株均得到1 913 bp的扩增产物,携带基因盒为dhfro、rfF和aadA 2;6株革兰阴性菌得到1 664 bp的产物,携带基因盒为aadA 5和dfr 17。aadA 2和aadA 5均为编码对氨基糖苷类抗生素产生耐药的基因盒,dhfr和dfr 17均为编码对磺胺类药物甲氧苄氨嘧啶产生耐药的基因盒;orfF为未知功能的开放阅读框。结论临床致病革兰阳性菌和革兰阴性菌株均广泛存在着整合子结构,应加强对耐药基因在细菌种属间水平转移的监测工作。; 苏健裕石磊杨连生肖增璜邱春嫦付强郑美萍冯洁; 关键词：整合子整合酶耐药基因盒

细菌耐药整合子intI分类的多重PCR方法的建立及应用被引量：15: 2005年; 目的建立快速筛选细菌耐药整合子的分类方法,并对21株来自临床的菌株进行整合子筛选和分类。方法根据G enB ank/EM BL内的第一、第二和第三类的整合酶序列,通过软件C lustalW的多重比对分析设计出各类整合子的特异性引物,用对照菌株建立多重PCR方法并对21株临床菌株进行PCR扩增,通过其PCR扩增产物片段大小的不同进行整合子分类。结果对照菌株实验结果显示,21株临床分离菌株中,15株在565bp处有扩增片段,即为含有第一类整合酶基因;4株在403bp处有扩增片段,即含有第二类整合酶基因;1株在565bp和403bp处均有扩增片段,提示其同时含有第一、二类整合酶基因;1株没有得到任何扩增片段,即不含有这三类整合酶基因;在被测菌株中未发现第三类整合酶基因的阳性菌株。结论本文报道的筛选细菌耐药整合酶基因分类的多重PCR方法效果良好,具有可行性,为更加全面细致研究整合子类型以及整合子介导的细菌耐药机制提供了一种简单易行、快捷有效的方法。; 冯洁石磊肖增璜李琳陈洵苏健裕李心晖郑美萍邱春嫦付强; 关键词：多重PCR 整合子整合酶基因

三类整合酶基因(intⅠ)的简并引物PCR方法建立及应用被引量：20: 2005年; 目的　建立一种筛选第一、二和三类整合酶基因 (intⅠ )的简并引物PCR方法 ,并对临床菌株进行整合子筛选和分类。方法　用梯度PCR方法确定PCR反应的最适退火温度 ,并对 1 6株临床标本进行PCR扩增 ,通过对阳性PCR扩增产物的限制性内切酶分析进行整合子分类。结果　根据梯度PCR结果确定最适退火温度为 4 6℃。应用简并引物PCR法检测 1 6株临床分离株 ,其中 8株阳性 ,经酶切分类后确定其中 4株只含有第一类整合酶基因 ,有 3株含有第二类整合酶基因 ,1株同时含有第一类和第二类整合酶基因。结论　建立了一种同时筛选第一、二和三类整合子的方法 ,实际检测显示其可行性 ,为全面细致研究整合子介导的细菌耐药提供了一种快速、简便的方法。; 李心晖石磊杨维青曹以诚张宏梅尹晓琳郑美萍; 关键词：PCR方法 PCR法检测 PCR反应临床菌株

临床分离革兰阳性菌整合子的研究: 一直以来，在细菌耐药性产生和传播的基因机制中，研究者对耐药性质粒和转座子的研究比较多。近年，整合子一耐药基因盒系统成为研究人员关注的热点，其在革兰阴性菌中对细菌耐药性的介导作用已经得到逐步的确认。而革兰阳性菌作为一类重要...; 郑美萍; 关键词：革兰阳性菌耐药基因盒整合子抗菌药物耐药性二氢叶酸还原酶整合酶; 文献传递

临床致病菌整合子检测及耐药基因盒序列分析被引量：9: 2005年; 目的对临床菌株中的第一类整合子分布及其耐药基因盒的结构特征进行分析。方法应用PCR方法检测33株临床菌株中的第一类整合酶基因intI,并对intI阳性菌株整合的耐药基因进行测序及序列分析。结果33株临床菌株(100%)均为第一类整合酶基因阳性。耐药基因盒特异PCR扩增发现,29株菌得到1913bp的扩增产物,2株得到1664bp的产物,1株得到1009bp的产物,1株得到1913bp和1009bp两种不同产物。序列分析结果表明,1913bp的扩增产物携带基因盒dhfr、orfF和aadA2,1664bp的扩增产物携带基因盒aadA5和dfr17,1009bp的扩增产物携带基因盒aadA2,aadA2和aadA5均为编码对氨基糖苷类抗生素产生耐药的基因盒,dhfr和dfr17均为编码对磺胺类药物甲氧苄氨嘧啶产生耐药的基因盒;orfF为未知功能的开放阅读框。结论第一类整合子介导的耐药基因广泛存在于临床致病细菌中,提示要加强对耐药基因在细菌种属间水平转移的监测工作。; 石磊郑美萍肖增璜李琳邱春嫦付强苏健裕李心晖冯洁; 关键词：整合酶基因序列分析

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郑美萍