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用于克隆高粱可溶性酸性转化酶基因SAI-1的方法: 本发明涉及一种用于克隆高粱可溶性酸性转化酶基因SAI-1的方法，属于分子生物学和遗传学领域。所述方法将SAI-1基因分为不均等的两段，前段分子大小635bp，后段分子大小3232～3412bp，采用两对引物SAIA-F/...; 李桂英钟海丽王智刘洋聂元冬顿宝庆; 文献传递

甜高粱SAI基因的表达与茎秆糖分积累的相关性分析被引量：4: 2013年; 【目的】通过检测不同甜高粱品种在各个生育时期叶片和茎秆中SAI基因的差异表达量与含糖量,探讨二者之间的相关性,为研究甜高粱糖分积累机制提供理论依据。【方法】高效液相色谱(HPLC)测定甜高粱品种不同生育时期茎秆中的含糖量,qRT-PCR分析叶片和茎秆中SAI基因的表达水平。【结果】拔节期蔗糖含量很低,主要是还原性糖,抽穗和开花期蔗糖含量显著增加,灌浆和成熟期持续增加至最高值,成熟后又有所下降。高糖品种整个生育时期叶片中SAI基因的表达水平高于中糖、低糖和髓干型三类品种,茎秆中SAI基因的表达水平则相反。甜高粱成熟期糖分含量与叶片中SAI基因的表达量呈显著正相关关系,相关系数达0.7239,而与茎秆中的表达量呈负相关关系,相关系数为-0.5971。【结论】甜高粱茎秆蔗糖积累与SAI基因在叶片和茎秆中的表达水平具有相关性,叶片中SAI基因的表达与蔗糖积累正相关,茎秆中SAI基因表达与蔗糖积累负相关,叶片的相关系数高于茎秆。; 聂元冬钟海丽顿宝庆叶凯王智朱莉李桂英; 关键词：甜高粱糖分积累

高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI-1)PCR克隆方法: 2016年; 可溶性酸性转化酶(SAI)是蔗糖代谢途径中的关键酶,对植物生长发育起着至关重要的调节作用,研究简捷快速克隆可溶性酸性转化酶基因方法,对于育种材料和品种资源的基因分型具有重要意义。本研究通过已知的高粱可溶性酸性转化酶基因序列及高粱基因组中该基因序列片段,设计引物,比较了分段克隆、基因全长克隆、巢式PCR克隆等方法克隆高粱SAI-1基因的效果,结果表明,直接扩增全长,扩增产物极其不稳定且扩增产物纯化、连接,转化后得不到阳性克隆;采用均等分段克隆,前半段扩增产物纯化、连接转化后得不到阳性克隆,但后半段克隆成功;针对高粱基因组信息中SAI-1基因上游的未知序列部分设计引物,进行单独克隆(635 bp),再单独克隆其其余序列,两段序列拼接后得到SAI-1基因全长。序列分析发现,SAI-1前段635 bp的扩增片段GC含量高达69.6%,而其后GC含量急剧下降至30%以下,所以推测全长克隆、均等片段克隆以及巢式PCR克隆失败的原因可能是SAI-1基因中GC分布不均匀,克隆高粱SAI-1基因较为适宜的方法为利用2对引物进行不均等分段扩增克隆,前段PCR退火温度较后段高1℃。该方法将为其他研究人员提供有益参考。; 钟海丽聂元冬王智顿宝庆李桂英; 关键词：高粱

甜高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI-1)cDNA全长克隆及表达分析被引量：2: 2014年; 可溶性酸性转化酶(SAI)是甜高粱蔗糖代谢关键调控酶。本研究利用RT-PCR的方法,克隆得到了甜高粱SAI-1基因cDNA全长序列(Genbank No.:KF921516),并利用生物信息学方法对其结构以及蛋白功能进行了分析。结果表明:克隆得到的SAI-1 cDNA序列长2 345 bp,包含一个2 025 bp的编码区、210 bp的5'非翻译区和110 bp的3'非翻译区。其编码674个氨基酸蛋白,预测分子量为73.42 kD,等电点为5.76,蛋白序列含有一个完整的糖基水解酶家族32结构域,具有水解蔗糖的作用。甜高粱茎秆中的SAI-1表达水平在拔节和抽穗期较高,而在开花期后的各个时期均处于较低水平,这与甜高粱糖分积累呈负相关。本研究结果为进一步研究SAI-1基因调控甜高粱糖分含量的分子机制奠定了基础。; 聂元冬刘洋刘洋顿宝庆王智钟海丽; 关键词：甜高粱基因克隆

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钟海丽