陆海
- 作品数：95 被引量：527H指数：13
- 供职机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 毛白杨抗坏血酸过氧化物酶启动子克隆与分析
- 2012年
- 【目的】研究毛白杨抗坏血酸过氧化物酶(APX)的基因启动子在转录调控中的作用,为进一步探讨抗坏血酸过氧化物酶启动子在植物抗逆中的应用奠定基础。【方法】依据毛白杨与毛果杨基因的高度同源性,以毛果杨LG-IX染色体上抗坏血酸过氧化物酶启动子序列为模板设计引物,从毛白杨总DNA中克隆一段启动子序列。【结果】克隆出的抗坏血酸过氧化物酶启动子序列长1234bp,与毛果杨同源基因的同源性高达81.96%。该启动子包含多种可能与胁迫相关的顺式作用元件保守序列,这些顺式作用元件参与光调节转录、激素信号和植物防御信号的应答,PpAPX-IX基因在老叶叶肉和老叶叶脉中表达较多,老叶中表达较多,在新叶中表达较少;在生长旺盛的部分比如根和形成层表达量很低或不表达。【结论】该启动子能为组织特异性启动子,受多种逆境胁迫产生的化学信号的诱导在成熟细胞中特异性表达,可以构建该启动子连接PBI101的表达载体。
- 苏万凯管李萍李印军陆海
- 关键词：毛白杨抗坏血酸过氧化物酶启动子表达载体构建
- 西伯利亚沙棘育种
- 2006年
- 本文介绍了西伯利亚沙棘育种、开发利用、沙棘机械采收等方面的研究情况。选育出了40多个沙棘品种。这些新品种产量在7．5～18t／hm^2不等，百果重62～120g，最大的百果重140g，果柄长度3～6mm，含油量4％～8％，类胡萝卜素含量15～48mg／100g，糖含量5％～10％，总酸1％～1．9％，多数属于少刺品种；对于沙棘的开发利用，只有油脂利用最多;并对沙棘的机械采收进行了研究。
- 土小宁陆海Yiry A.Zubarev
- 关键词：沙棘育种
- 丝瓜ACC合成酶的原核表达、分离纯化及性质鉴定被引量：7
- 2004年
- 将构建成功的丝瓜ACC合成酶cDNA的重组质粒,转化为大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后得到特异性高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在.包涵体经洗涤和Zn2+螯合柱层析,得到纯化蛋白.SDS PAGE显示纯化蛋白分子量为55000的单一蛋白带.经活性分析,该酶最适pH值为8.5,米氏常数(Km)为44.2μmol/L.
- 高波曾庆银陆海付学奇
- 关键词：白带原核表达活性分析ACC合成酶丝瓜
- 白刺总RNA提取方法的研究被引量：10
- 2004年
- 以不同西伯利亚白刺组织为材料 ,利用TRIZOL试剂快速提取法、异硫氰酸胍法、苯酚法和CTAB法提取白刺总RNA ,通过RNA的产率、纯度、电泳图谱等分析来确立适用于白刺总RNA分离的方法 研究结果表明 ,CTAB法提取的RNA具有 2 8SrRNA、 18SrRNA和 5SrRNA三条较清晰的条带 ,很少有降解 ,其A2 6 0 /A2 80为 1.893～ 1.90 1,A2 6 0 /A2 30为 1.80 7～ 2 .4 87 具有较高的纯度 其他三种方法获得的RNA纯度较低 ,降解严重 ,有较多小分子和盐存在 ,RNA无明显条带出现 ,而是以小分子RNA弥撒状分布 将CTAB法提取的RNA逆转录成cDNA ,使用随机引物进行PCR扩增 ,PCR条带清晰 ,分布均匀 ,背景小 该结果进一步证明了CTAB法提取的RNA具有很高的质量与纯度 。
- 张建秋陆海杜希华张玉玲苟小军
- 关键词：白刺RNAPCR扩增蒺藜科
- 植物半胱氨酸蛋白酶在植物生长发育中的功能研究被引量：2
- 2021年
- 半胱氨酸蛋白酶(cysteine proteases,CPs)是一类重要的蛋白水解酶,在调控植物生长发育中发挥着重要的功能。根据不同半胱氨酸蛋白酶在不同组织部位的定位表达,对半胱氨酸蛋白酶参与种子萌发,根生长及叶片衰老过程,以及茎中导管分子及花药中绒毡层细胞的细胞程序性死亡过程的功能研究及其进展进行了综述,旨在为进一步研究半胱氨酸蛋白酶的功能提供参考。
- 莫黎杰刘夏瞳李慧陆海
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶种子萌发
- 转录组分析组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对毛白杨悬浮细胞表达谱的影响被引量：1
- 2018年
- 组蛋白去乙酰化酶HDAC具有调节细胞增殖、诱导细胞分化、凋亡的作用,是近年生物学研究热点之一,而在木本植物方面的作用却鲜有报道。【目的】本实验用组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)对杨树悬浮细胞进行处理,通过改变细胞的组蛋白乙酰化水平,来探讨其对基因表达谱变化的影响。【方法】用0.5μmol/L的TSA处理悬浮细胞,10 d后收集材料用于RNA-Seq分析,比较经过TSA处理与对照组的悬浮细胞之间转录组表达差异情况。【结果】通过显微镜观察发现,对照组细胞呈均匀椭圆形,而经过TSA处理后的细胞出现圆形及长条形细胞。通过转录组分析得到4 465个差异表达基因(DEGs),其中2 363个基因上调,2 102个基因下调。差异表达基因主要富集在细胞周期、苯丙素生物合成、细胞壁结构成分和乙酰化相关等途径。【结论】通过分析TSA处理和对照组的悬浮细胞基因表达差异,发现TSA通过影响组蛋白乙酰化水平直接或间接影响细胞生长、细胞壁组分和细胞周期的相关基因,为认识组蛋白乙酰化对植物生长发育的影响提供依据。
- 张永卓刘雅琳陆海李慧
- 关键词：悬浮细胞TSA毛白杨组蛋白去乙酰化
- 烟草4CL蛋白免疫荧光定位研究被引量：2
- 2007年
- 4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)是维管植物木质素生物合成途径的关键酶,应用原核表达系统获得了毛白杨可溶性4CL1融合蛋白,以Ni2+-Agrose亲和柱层析纯化得到的SDS-PAGE电泳纯的毛白杨4CL1融合蛋白为抗原,免疫家兔获得毛白杨4CL1多克隆抗体,Western blotting鉴定表明兔抗毛白杨4CL1多克隆抗体具有高度特异性,免疫荧光定位发现普通烟草4CL1蛋白特异性地在木质部表达.为进一步应用木质部特异表达启动子定向调控木质素生物合成奠定了理论基础.
- 范丙友陆海蒋湘宁
- 关键词：烟草
- 树木木材形成与材性改良及抗旱耐盐性提高机理与基因工程分子基础
- 蒋湘宁尹伟伦王沙生陈雪梅谷瑞升刘群录陆海申晓辉李悦张春晓赵艳玲杨雪萍胡垒
- 该研究为了成功克隆、构建和转化树木并对木材产量、品质和抗旱耐盐特性形成机理的相关基因和启动子进行了研究。研究并建立多种木本植物组织、悬浮细胞和体胚培养转基因体系；获得组织定位表达调控生长和材性的转基因的树木；建立了胡杨细...
- 关键词：
- 关键词：木材形成分子机理
- 北京林业大学生物科学与技术学院专辑简介
- 2020年
- 北京林业大学是教育部直属、教育部与国家林业和草原局共建的全国重点大学.学校办学历史可追溯至1902年的京师大学堂农业科林学目.1952年,全国高校院系调整,北京农业大学森林系与河北农学院森林系合并,成立北京林学院.1956年,北京农业大学造园系和清华大学建筑系部分并入学校.1960年被列为全国重点高等院校,1981年成为首批具有博士、硕士学位授予权的高校.1985年更名为北京林业大学.1996年被国家列为首批"211工程"重点建设的高校.2000年经教育部批准试办研究生院,2004年正式成立研究生院.2005年获得本科自主选拔录取资格.2008年,学校成为国家"优势学科创新平台"建设项目试点高校.
- 林金星陆海
- 关键词：分子机制林木遗传育种学
- 毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析被引量：3
- 2013年
- 以毛白杨总RNA为模板反转录得到cDNA,克隆获得抗坏血酸过氧化物酶基因家族中的一个成员PtAPX2 864bp的编码序列。该基因编码的蛋白包含287个氨基酸,理论分子质量为31.78ku,C末端包含锚定于过氧化物酶体跨膜结构域,推断其为过氧化物酶体定位蛋白。构建了PtAPX2原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了纯化的重组蛋白,并对其进行了酶学性质分析。PtAPX2对抗坏血酸的Km值为(1.37±0.22)mmol/L,Vmax值为(3.95±0.46)mmol/(L·min·mg);对H2O2的Km值为(0.026±0.003)mmol/L,Vmax值为(1.27±0.03)mmol/(L·min·mg);该酶在28℃,pH7.0～7.4时活性最高。实时荧光定量PCR分析表明,PtAPX2在杨树老叶叶肉中表达量最高。对PtAPX2亚细胞定位、底物结合特征、酶学性质及组织特异性表达的分析加深了对木本植物抗氧化机理的认识。
- 潘翔李娜李印军魏弘宜张蕾陆海
- 关键词：毛白杨抗坏血酸过氧化物酶克隆酶学性质
