陈子杨
- 作品数：20 被引量：56H指数：4
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金吉林省产业技术研究与开发项目长春市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 重组戊型肝炎病毒抗原ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2011年
- 目的建立重组戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于HE疫苗中HEV抗原含量的检测。方法以重组HEV病毒样颗粒作为免疫原,免疫母鸡,制备抗HEV-IgY多克隆抗体,纯化后作为包被抗体,HRP标记的抗HEV单克隆抗体作为检测抗体,建立HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行验证。用建立的方法检测3批HE疫苗成品的HEV抗原含量,计算HEV抗原对氢氧化铝的吸附率。结果建立的ELISA方法线性范围为2～128 ng/ml,最低定量限为2 ng/ml;该方法检测冻干甲肝减毒活疫苗、重组人白介素-2(IL-2)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、人血白蛋白、小牛血清及健康人血清均无交叉反应;该方法检测3个浓度的HEV抗原内部参考品的回收率在95.13%～104.50%之间,试验内及试验间变异系数均<15%;包被抗HEV-IgY的酶标板于37℃放置5 d,其检测HEV抗原内部参考品的A450值及敏感性均未发生显著变化;3批HE疫苗成品中HEV抗原对氢氧化铝的吸附率均大于95%,符合相关质控要求。结论已成功建立了HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,可用于HEV抗原含量的检测。
- 陈子杨吴业红张健锋常军亮时成波贾媛郭立君李春晖
- 关键词：肝炎病毒戊型病毒样颗粒IGY酶联免疫吸附测定
- 高效价人巨细胞病毒免疫球蛋白的研制
- 2004年
- 目的 制备人源性高效价人巨细胞病毒免疫球蛋白(HCMV＿IgG)。方法 用ELISA方法从检验合格的献血员血浆中筛选HCMV＿IgG滴度≥1∶5000的血浆,采用低温乙醇法制备HCMV＿IgG。结果 按《中国生物制品规程2000版》肌肉注射人血球蛋白检定标准,各项检定均合格,且HCMV＿IgG滴度为1∶150000。结论 成功地制备出高效价HCMV＿IgG。
- 邵华李凤喜陈子杨杨利民李冰郭立君郭凤云
- 关键词：ELISA
- 毕赤酵母表达铜锌超氧化物歧化酶中试工艺研究被引量：3
- 2012年
- 正交设计优化铜锌超氧化物歧化酶毕赤酵母在摇瓶及30L发酵罐的诱导表达条件,用两步层析法纯化表达的目的蛋白,在不同温度下进行原液稳定性试验。用考马斯亮蓝检测蛋白含量,活性检测试剂盒检测目的蛋白活性。纯化后原液参照中华人民共和国药典三部2005版进行检测,用SDS-PAGE、HPLC检测纯度,免疫印迹法检测rhCu,Zn-SOD特异性,等点聚焦测定该酶等电点,地高辛法检测残余DNA含量,酶联免疫法测定残余蛋白含量。结果显示正交试验的大罐高密度发酵最适条件比摇瓶的最适条所获得的目的蛋白活性高8倍,纯化后,HPLC纯度为99.7%,原液比活性大于6.0×103 U/mg,各项检测指标达到生物制品检定标准。该酶在45、65、85、100℃的半衰期分别为240、120、30、15。具有良好的酶稳定性。本研究建立了发酵、纯化的中试工艺,获得高表达、高纯度及高比活的铜锌超氧化物歧化酶,为规模化生产奠定了基础。
- 迟春萍陈子杨徐军时成波曹玉峰李铮贾媛李雨桐郭立君田海山王小杰孙彪翟东冀长发李校堃
- 关键词：铜锌超氧化物歧化酶毕赤酵母高密度发酵纯化
- 胃蛋白酶对抗狂犬病毒IgY活性的影响被引量：28
- 2002年
- 目的 观察抗狂犬病毒IgY经胃蛋白酶酶解24h后，抗体活性的变化。方法 高效价抗狂犬病毒IgY粗提后，经胃蛋白酶酶解，纯化，用ELISA及小鼠中和实验测其抗体活性。结果 获得单一IgY解片段并能够中和狂犬病毒。结论IeY经胃蛋白酶酶解24h仍保持其中和抗体的活性，为制备口服免疫制剂奠定基础。
- 李春晖郭立君于洪涛陈子杨刘畅郭凤云郭凤云邱爱东赵伟光薛凤波孙世和王玉琪张晶
- 关键词：IGY胃蛋白酶酶解狂犬病毒抗体免疫活性
- 人巨细胞病毒免疫球蛋白的研制及其临床应用被引量：2
- 2004年
- 制备人源性高效价人巨细胞病毒 (HCMV)特异免疫球蛋白 (IgG)。采用ELISA从检定合格的血浆中筛选出滴度≥ 1∶5 0 0 0的血浆 ,合并后按低温乙醇法制备HCMV IgG ,再次检定后应用于临床。结果显示 ,按人免疫球蛋白标准检定 ,所制备的HCMV IgG全部合格 ,HCMV IgG滴度为 1∶15 0 0 0 0。临床应用结果表明 ,2批高效价HCMV IgG均可明显降低先天性HCMV感染率。
- 郭立君邵华陈子杨李冰郭凤云
- 福氏志贺菌IgY的抑菌作用被引量：5
- 2007年
- 目的探讨口服福氏志贺菌IgY在动物体内的抑菌作用。方法以福氏志贺菌制备免疫原,免疫母鸡,收集鸡蛋,提取IgY。以不同剂量的IgY口服免疫6日龄乳鼠,并分别以不同剂量的福氏志贺菌于不同时间攻击,观察体内抑菌作用。结果攻菌前口服特异性IgY的乳鼠,其直肠内分离菌的百分率明显低于攻击后口服IgY的乳鼠。抑菌作用随着口服IgY剂量的减少和攻菌量的增加而降低。口服大于3mg/只的特异性IgY,可使肠内特异菌减少50%以上。口服4mg/只可抵御10亿菌的攻击。结论福氏志贺菌特异性IgY可有效抑制该菌在乳鼠肠内的繁殖。
- 邵华陈子杨张勇王振远黄伟嵩贾媛郭立君郭凤云
- 关键词：福氏志贺菌卵黄抗体抑菌作用
- 重组戊型肝炎疫苗抗原P179表征分析被引量：2
- 2016年
- 目的对重组戊型肝炎疫苗（recombinant hepatitis E virus,rHEV）抗原P179表征进行分析。方法取3批HPLC及电泳纯度均为100%的rHEV抗原P179原液,采用SDS-PAGE法检测相对分子质量及二聚体含量;OPA-FMOC全自动柱前衍生-Amino Quant氨基酸分析法测定氨基酸组分;电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱（electrospray ionizationquadrupole time-of-flight-mass spectrometry,ESI-Q-TOF2-MS）法分析C-末端、Edman降解法测定N-末端氨基酸序列;HPLC法进行肽图分析;毛细管等电聚焦电泳法测定等电点;圆二色光谱仪分析其二级结构;透射电镜负染法观察蛋白颗粒状态;双抗体夹心ELISA法检测抗原活性。结果 3批rHEV抗原P179相对分子质量在17 500-21 300之间;二聚体占总蛋白的85%以上;氨基酸组分、C-末端氨基酸序列、N-末端氨基酸序列、肽图、等电点等均与预期相符;3批rHEV抗原P179二级结构中,α螺旋4.8%-5.6%,β折叠34.8%-36.4%,β转角20.8%-22.2%及无规卷曲37.7%-38.0%;透射电镜观察可见大小均一,粒径约20 nm的蛋白颗粒;抗原活性比值在5.0×10^5-2.0×10^6CCU/mg范围内。结论 3批r HEV抗原P179结构特征均一,与设计相符,为该疫苗的产业化奠定了基础。
- 迟祥李铮贾媛唐剑光宋昊陈子杨常东英迟春萍
- 关键词：戊型肝炎疫苗抗原
- HEV抗原ELISA检测方法的建立及初步应用
- 戊型肝炎(hepatitis E)是由戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)引起的病毒性肝炎,其在亚洲、非洲及中美洲等发展中国家是一种比较严重的传染病,占急性病毒性肝炎的50%,孕妇死亡率高达20%。...
- 吴业红陈子杨张健峰常军亮王莹迟春萍时成波徐军贾媛郭立君郭凤云
- 文献传递
- 重组戊型肝炎疫苗的生殖毒性试验
- 2014年
- 目的探讨重组戊型肝炎疫苗对大鼠的生殖毒性。方法将Wistar雌性大鼠分为4组:低剂量组(每只20μg HEV)、高剂量组(每只40μg HEV)、生理盐水对照组及佐剂对照组,每组30只。雌鼠于交配前给药2次,初次给药后2周进行2次给药,2次给药后1周,进行雌雄鼠合笼交配,于妊娠7和14 d进行3、4次给药。每天观察雌鼠一般临床症状;交配前每周称雌鼠体重1次,交配后每周称体重2次,每周定期测定1次摄食量;于妊娠21 d安乐死孕鼠,分离出胎仔,检测疫苗对雌鼠生殖能力、胎仔发育、胎仔骨化程度、胎仔内脏畸形的影响,取孕鼠和胎仔血液,分离血清,ELISA法检测抗HEV Ig G抗体水平。结果各组大鼠精神状态未见异常,皮毛光亮,灵敏,大小便色正成形,注射局部未见充血、肿胀、溃烂、硬结等;疫苗对孕鼠体重、摄食量均无明显影响(P<0.05);各剂量组窝平均着床数、窝平均黄体数、窝平均活胎数、受孕率、活胎率、吸收胎率、死胎率、畸胎率与生理盐水对照组和佐剂对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);各剂量组胎仔身长、尾长、体重、胎盘重和性别比与生理盐水对照组和佐剂对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);各剂量组胎仔上枕骨的骨化程度均在0级和Ⅰ级正常范围以内,胸骨骨化不全率与生理盐水及佐剂对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);各组胎仔内脏均未见畸形;孕鼠及胎仔血清中均检测到抗HEV Ig G抗体。结论重组戊型肝炎疫苗对孕鼠及胎仔安全、有效。
- 王甲男曹玉锋陈子杨李雨桐刘玉林
- 关键词：戊型病毒性肝炎疫苗生殖毒性
- 破伤风抗体IgG酶联检测试剂盒的研制被引量：7
- 2003年
- 目的 研制检测破伤风IgG的酶联检测试剂盒。方法 以精制破伤风类毒素进一步纯化后作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗人IgG作为抗体制备ELISA试剂盒,并进行敏感性、特异性及重复性检测。结果 试剂盒敏感性可达0.003 9 IU/ml,特异性达95％以上,重复性好,CV<7％,试剂盒置于37℃、7 d敏感性无明显改变。结论 成功地制备了破伤风抗体IgG酶联检测试剂盒。
- 郭立君邵华杨丽华陈子杨左毅李冰孙阳郭凤云
- 关键词：辣根过氧化物酶
