陈文琦
- 作品数：47 被引量：140H指数：8
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- H7N9禽流感病毒重组质粒构建及应用被引量：1
- 2013年
- 目的构建一种含H7N9禽流感病毒全长血凝素/神经氨酸酶/基质蛋白(HA/NA/M)基因的重组质粒,为核酸检测方法提供一种通用的阳性定量标准品。方法设计H7N9禽流感病毒HA、NA及M抗原基因全长开放阅读框的克隆引物,提取H7N9禽流感病毒总RNA后用实时荧光定量PCR获得相应片段,用3次酶切连接方法,依次插入到pGEM-T easy质粒,进行测序确认;线性化后的重组质粒用T7 RNA聚合酶进行体外转录,RNA转录产物纯化后测定浓度,用实时荧光定量PCR构建标准曲线进行验证。结果 HA、NA和M基因扩增片段大小分别约为1.7、1.3、1.1 kb,与预期相符;构建的重组质粒pGEM-HA-NA-M插入片段的测序结果与GenBank公布序列一致;由重组质粒体外转录获得同时含有H7N9禽流感病毒HA、NA、M全长开放阅读框序列的RNA片段质量浓度为399.5 ng/μL,梯度稀释后用3种实时荧光定量PCR方法均获得了良好的标准曲线。结论成功构建重组质粒pGEM-HA-NA-M,由此质粒体外转录获得的RNA片段可作为H7N9禽流感病毒核酸快速检测方法通用的阳性定量标准品。
- 张锦海陈文琦胡丹王平吕恒刘玉陈凤娟任浩王长军
- 关键词：血凝素神经氨酸酶基质蛋白标准品
- UVB照射诱导皮肤成纤维细胞早期衰老的研究被引量：7
- 2010年
- 目的探讨UVB诱导的细胞衰老与肿瘤发生的关系。方法噻唑蓝（MTT）法检测UVB辐射后的细胞增殖情况，筛选诱导衰老适宜的亚毒性剂量和照射次数。染色法检测衰老相关的β-半乳糖苷酶（SA β-gal）活性。RT—PCR检测衰老相关基因纤维结合素（FN）、骨结合素（ON）和平滑肌22（SM22）的表达。结果以10mJ／cm^2的亚毒性剂量连续5次照射人成纤维细胞后，衰老的生物学特征得以明显表现：①MTT法检测显示细胞增生能力的减弱。②照射组具有SAB—gal活性的阳性细胞明显增加，照射组和对照组的阳性率分别为82．0％和33．7％（P〈0．01）。③3种衰老相关基因FN、ON和SM22的表达亦明显增强，分别约为对照组细胞的2．7、2．0、2．3倍（P〈0．05）。结论反复亚毒性剂量UVB照射人成纤维细胞，初步建立一种UVB诱导的应激诱导的早期衰老（SIPS）模型。
- 陈文琦许惠娟毕志刚
- 关键词：紫外线成纤维细胞细胞衰老
- UVB应激性衰老成纤维细胞分泌细胞外基质对HaCaT细胞ERK信号的影响
- 2010年
- 目的探讨UVB诱导的衰老（UVB—SIPS）成纤维细胞分泌的细胞外基质（ECM）对HaCaT细胞增殖的影响以及细胞外信号调节激酶（ERK）信号途径的作用。方法采用辐射诱导人皮肤成纤维细胞衰老，分别制备由未衰老和衰老成纤维细胞分泌的ECM包被的培养皿（分别定为PRE—ECM组、SCIP—ECM组）。以空白培养皿（NON—ECM组）为参照，在HaCaT细胞接种于培养皿后，采用MTF法和流式细胞法检测其细胞增殖、细胞周期等指标的变化；免疫印迹法分析ERK活化水平。干预性研究ERK信号通路对上述功能的影响。结果三组中，SCIP—ECM组可诱导最强烈的ERK1／2的活化。采用U0126抑制ERK信号活化可完全抑制衰老成纤维细胞来源的ECM的促细胞增殖效应。阻断HaCaT细胞的ERK活化，NON—ECM组、PRE—ECM组和SCIP—ECM组S＋G2／M期细胞的比例明显下降，分别由处理前37．40％、41．34％和43．31％减少至29．41％、36．48％到39．96％。结论UVB—SCIP成纤维细胞分泌的ECM通过刺激ERK磷酸化促进HaCaT细胞增殖。
- 康健陈文琦夏济平李燕华杨波纪超宋秀祖相文忠万寅生毕志刚
- 关键词：细胞衰老细胞外基质
- 利多卡因凝胶贴膏联合普瑞巴林治疗带状疱疹后神经痛临床疗效被引量：11
- 2021年
- 带状疱疹由水痘-带状疱疹病毒感染引起,其典型的临床表现为神经病理性疼痛且沿神经单侧带状分布的簇集性红斑水疱。而该病最常见的并发症就是带状疱疹后神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)[1]。PHN是在带状疱疹皮损好转消退1个月后仍有疼痛,其发病率随着年龄的增加而增加。在中国人群中,有29.8%的带状疱疹病人可能会出现带状疱疹后神经痛[2],国外有研究报道带状疱疹发生PHN的平均概率为10%~20%[3]。
- 姜媛陈文琦徐雨婷潘敏张晓荣戴洁
- 关键词：带状疱疹后神经痛利多卡因凝胶贴膏普瑞巴林临床疗效
- p53相关的细胞周期调控在UVB诱导的皮肤成纤维细胞早衰中的作用被引量：2
- 2009年
- 目的探讨中波紫外线(UVB)诱导皮肤成纤维细胞(HSF)应激诱导的早衰(SIPS)后细胞周期调控的变化。探讨p53相关的生长停滞、细胞凋亡相关基因表达在UVB诱导的SIPS中的变化情况。方法对UVB诱导发生SIPS的HSF,流式细胞仪检测细胞周期;Western blot法检测衰老信号通路中p53,p21,p16的表达;实时荧光定量PCR芯片检测与p53相关的生长停滞(p53,p21,p16,p19)、凋亡(bax,bcl-2)基因的mRNA表达水平。结果流式细胞仪对UVB诱导的SIPS模型进行细胞周期检测发现,大部分细胞发生了G1期阻滞;衰老通路中p53,p21和p16的表达都明显增加;实时荧光定量PCR芯片检测发现,与生长停滞相关的抑癌基因p53,p21,p16,p19的表达均上调;p53下游的凋亡相关基因中的抑凋亡基因bcl-2表达稍上调,而凋亡基因bax表达下调。结论G1期阻滞和衰老信号通路蛋白表达增加进一步印证了UVB诱导HSF发生的SIPS。p53信号通路相关基因的表达变化提示UVB诱导的SIPS可能具有与p53相关的抗凋亡作用,但其中p53信号通路所起的作用还需更进一步的实验探索。
- 陈文琦许惠娟毕志刚
- 关键词：中波紫外线P53
- 外泌体在特应性皮炎中作用的研究进展
- 2024年
- 外泌体是含有核酸、蛋白质、脂质、细胞因子、转录因子受体等生物活性分子的细胞外囊泡,几乎所有的细胞都可以分泌外泌体。外泌体在免疫应答、神经元之间的信号传导、生殖和发育等多方面发挥重要作用。近年来,关于外泌体在特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)、银屑病、玫瑰痤疮等非感染性炎症性皮肤病方面的研究也取得了一定的进展。文章就外泌体在AD病情进展、诊断和临床治疗领域的研究结果进行综述,以期为AD临床诊断和治疗提供依据。
- 万昊悦陈文琦
- 关键词：外泌体特应性皮炎
- 亚毒性剂量UVB照射和过表达p53对皮肤细胞光致癌相关基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨亚毒性剂量的中波紫外线(UVB)照射和过表达p53对人皮肤成纤维细胞(HSF)在光致癌相关基因表达的影响。方法以反复多次的亚毒性剂量UVB照射正常HSF细胞株和已构建成功的p53稳定过表达HSF细胞株,定制实时定量PCR芯片,检测光致癌发生相关基因的表达。结果 UVB照射和过表达p53在促进衰老基因表达方面,UVB照射的作用更为显著;过表达p53使抑凋亡基因bcl-2下调,促凋亡基因bax上调,UVB照射则可加强过表达p53的诱导凋亡作用;过表达p53可下调癌基因HIF-1α,VEGF和hdm2的表达,UVB照射可促进p53的肿瘤抑制作用。结论过表达p53可使p53依赖的细胞凋亡和抑制肿瘤作用明显增强,亚毒性剂量的UVB还可加强这种作用,从而有助于抑制皮肤肿瘤发生。在UVB作用下,过表达p53可能更倾向于诱导凋亡,而非衰老。
- 陈文琦毕志刚许惠娟
- 关键词：P53UVB人皮肤成纤维细胞
- 播散性黄瘤1例被引量：5
- 2005年
- 陈文琦张美华胡佳董正邦葛以信
- 关键词：尿崩症组织细胞增生症
- 金葡菌肠毒素A和B诱导BALB/c鼠皮肤炎症的实验研究
- 2007年
- 目的:探讨金葡菌肠毒素A(SEA)和金葡菌肠毒素B(SEB)在特应性皮炎发病机制中的作用。方法:使用100μg/mL浓度的SEA或SEB溶液分别斑贴致敏BALB/c鼠,以生理盐水为阴性对照,ELISA测定血清总IgE水平,观察和比较各组小鼠皮肤组织病理改变,半定量RT-PCR法测定致敏局部皮肤中白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5),干扰素-γ(IFN-γ)mRNA表达水平。结果:SEA组及SEB组小鼠组织病理未见明显炎症性变化,各组小鼠间血清IgE水平无明显差异,IL-4、IL-5、IFN-γmRNA表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论:100μg/L的SEA或SEB用斑贴致敏的方法不能在BALB/c鼠诱发具有特应性皮炎特征的皮损。
- 胡佳张美华毕志刚陈文琦董正邦方晶
- 关键词：金葡菌肠毒素B特应性皮炎皮肤炎症
- 毛囊黏蛋白病被引量：1
- 2006年
- 报告1例毛囊黏蛋白病。患者男,33岁。全身泛发红斑伴瘙痒13年余,加重近半年,并出现眉毛脱落。皮损组织病理检查示:真皮毛囊周围炎性细胞浸润。阿新蓝染色阳性,毛囊内可见黏蛋白沉积。诊断为毛囊黏蛋白病。
- 胡佳张美华董正邦陈文琦范志莘
- 关键词：毛囊黏蛋白病
