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马维骏: 作品数：12 被引量：16H指数：3; 供职机构：上海交通大学医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中国科学院知识创新工程上海市基础研究重大（重点）项目更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

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利用噬菌体展示技术定量检测融合蛋白或融合蛋白的亲和物质的方法: 本发明涉及一种定量检测外源蛋白数量或定量检测与外源蛋白结合的亲和物质的方法。本发明克服了以往只将噬菌体展示技术用于外源蛋白的表达定性检测的技术局限，实现了利用噬菌体展示技术进行外源蛋白的定量检测或对能与其结合的亲和物质进...; 马维骏孔波; 文献传递

GAL4/UAS系统在果蝇Tis11基因RNA干扰中的应用被引量：3: 2012年; TTP在哺乳动物许多关键基因表达的转录后水平上起调控作用,Tis11是TTP蛋白在果蝇中的同源物.目前还没有现成的可用于研究Tis11功能的基因敲除或敲低的果蝇.为了获得肌动蛋白启动子或者热激蛋白启动子驱动表达Tis11 mRNA干扰序列的具有较高干扰效率的Tis11基因干扰果蝇,将肌动蛋白启动子或者热激启动子驱动表达的GAL4果蝇品系与融合有Tis11 mRNA干扰序列的UAS品系杂交,收集同时带有GAL4基因和UAS序列的子一代果蝇.提取所收集果蝇的总RNA,将其中的mRNA逆转录成cDNA,并设计检测Tis11基因的特异性引物,然后通过Real-time PCR检测Tis11 mRNA的表达情况.结果显示所收集的能表达Tis11基因干扰序列的子一代果蝇与不能表达Tis11基因干扰序列的对照果蝇相比,其体内Tis11 mRNA的表达水平下降明显.收集的果蝇其体内所表达的干扰序列对Tis11 mRNA干扰效果显著,我们成功获得了Tis11基因的RNA干扰果蝇.; 刘勇张梅超韦有恒马维骏; 关键词：RNA干扰果蝇

核受体配体结合区蛋白融合表达在噬菌体表面的方法: 本发明公开了一种噬菌体，由衣壳和位于衣壳内的噬菌体核酸构成，所述噬菌体的衣壳表面融合有外源的核受体或核受体的配体结合区。本发明的噬菌体能够用于筛选与核受体或核受体的配体结合区结合的物质，具有筛选灵敏度高和筛选效率高的特点...; 马维骏孔波; 文献传递

核受体配体结合区蛋白融合表达在噬菌体表面的方法: 本发明公开了一种噬菌体，由衣壳和位于衣壳内的噬菌体核酸构成，所述噬菌体的衣壳表面融合有外源的核受体或核受体的配体结合区。本发明的噬菌体能够用于筛选与核受体或核受体的配体结合区结合的物质，具有筛选灵敏度高和筛选效率高的特点...; 马维骏孔波; 文献传递

利用合适的启动子提高外源基因在Jurkat细胞中的表达: 2012年; 目的通过选择合适的启动子来实现外源基因在Jurkat细胞中的高效表达。方法以pGL3-MCS质粒为基础构建不同启动子(SV40、CMV、EF1α和UbC)驱动萤火虫荧光素酶Fluc报告基因表达的重组质粒,并将其与作为内参的表达海肾荧光素酶Rluc报告基因的质粒共转Jurkat细胞,检测Jurkat细胞中这两种荧光素酶与相应底物反应所产生的荧光强度,计算Fluc与Rluc荧光强度的比值即Fluc的相对酶活,通过比较Fluc相对酶活的大小来选取在Jurkat细胞中具有高表达活性的启动子。结果以pGL3-MCS质粒为基础成功构建了不同启动子驱动Fluc报告基因表达的重组质粒pGL3-CMV、pGL3-EF1α和pGL3-UbC。在Jurkat细胞中,不同启动了驱动的Fluc报告基因的相对酶活的强弱关系为pGL3-UbC>pGL3-EF1α>pGL3-CMV>pGL3-MCS。结论可以选择高活性的人源泛素C启动子实现外源基因在Jurkat细胞中的高效表达,以利于Jurkat细胞系在哺乳动物T淋巴细胞以及免疫相关功能研究中的应用。; 袁娟牟宗春游佳马维骏; 关键词：JURKAT细胞

利用果蝇细胞研究基因表达转录后调控的双报告基因系统的建立: 2010年; 目的构建能够在果蝇S2＊细胞中检测转录后调控元件对基因表达调控影响的双报告基因系统.方法首先利用pAc5.1/V5-His c,pGL3-basic和pRL-SV40载体,构建能在果蝇体系中表达萤火虫荧光素酶的报告基因质粒pAc-Fluc,以及用作内参照表达海洋腔肠荧光素酶的质粒pAc-Rluc.将TNF-α基因mRNA的3＇UTR连接至pAc-Fluc的Luc编码区下游构建pAc-Fluc-TNF-α质粒,并与pAc-Rluc共转至果蝇S2＊细胞,检测两种荧光素酶的相对活性.结果成功构建了能够在果蝇S2＊细胞中组成型表达的双报告基因系统;在TNF-α mRNA 3＇UTR控制下表达的荧光素酶活性比对照有显著下降.结论可以利用该双报告基因系统在果蝇细胞中研究转录后调控元件对基因的表达调控.; 张婷肖强海韦有恒刘勇马维骏; 关键词：荧光素酶

规范和完善我国干细胞研究与临床应用的伦理审查和过程监管机制势在必行被引量：7: 2012年; 干细胞研究涉及伦理问题,在将相关研究成果转化为临床应用的过程中,还会使患者面临一系列的风险。为规范干细胞研究和应用,世界各国的相应机构推出了一系列的伦理审查规范和监管法规,对相关行为进行严格的控制,从而在不影响干细胞研究和应用发展的前提下,最大限度地保护各方权益。本文旨在为规范和完善我国干细胞研究和临床应用的伦理审查和监管体系提供参考。在对主要国家的干细胞的伦理审查和监管情况进行调研的基础上,重点选取美国和英国的干细胞监管体系进行深入剖析,总结这两个国家在干细胞监管体系中的做法,并对我国干细胞研究和应用的监管情况进行分析,针对存在的问题提出建议。; 赵心刚徐萍马维骏沈毅王丽萍; 关键词：干细胞研究伦理审查

结合GAL4/UAS系统与CyO-GFP平衡子获取表达RNA干扰序列果蝇幼虫并有效干扰Tis11表达被引量：2: 2014年; TIS11是转录后调控因子TTP在果蝇中的同源物,在果蝇幼虫免疫、发育和代谢等多种生理过程中都发挥重要作用.为研究TIS11的功能,需要利用GAL4/UAS系统获得整体高干扰效率的Tis11 RNAi果蝇幼虫.为平衡GAL4转基因果蝇高活性启动子的致死效应,需要使用带有成蝇卷翅标记CyO的第二染色体的平衡子,但CyO标记在幼虫中无可见表型,因此无法区分杂交幼虫的基因型.为解决这一问题,引入了带有CyO-GFP标记的平衡子.携带CyO-GFP平衡子的G-Actin果蝇与携带Tis11 RNAi序列的101765果蝇杂交,杂交幼虫可以通过GFP标记进行区分,剔除带有CyOGFP平衡子的幼虫,从而挑选出表达Tis11 RNAi序列的幼虫,最后经real-time PCR检测所得幼虫具有整体高干扰效率.; 张梅超刘勇韦有恒马维骏; 关键词：果蝇幼虫 RNA干扰