丁芳霞
- 作品数：6 被引量：25H指数：4
- 供职机构：西北师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项甘肃省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 高山离子芥磷脂酶D活性测定及酶动力学分析被引量：7
- 2014年
- 高山离子芥(Chorispora bungean)是一种高抗逆的多年生高山草本植物,具有特殊的分子及生理抗逆响应机制。磷脂水解酶磷脂酶D(PLD)是重要的跨膜信号转导酶。以高山离子芥愈伤组织为试材,利用酶联免疫分光光度计法,优化磷脂酶D活性测定体系,建立了在25℃反应温度条件下,200弘L反应体系中,膜蛋白的含量35μg、反应时间30 min、pH为7.0的缓冲液系统最适合高山离子芥愈伤组织磷脂酶D活性测定体系,分析表明不同膜结合态磷脂酶D的酶动力学特征存在差异,为进一步探讨磷脂酶D在高山离子芥响应逆境胁迫中的作用奠定基础。
- 杨宁王程亮陈霞丁芳霞李宜珅赵聪聪安黎哲
- 关键词：高山离子芥磷脂酶D活性
- 扁桃砧木Nemaguard的微繁研究被引量：2
- 2013年
- 以单芽茎段为材料,对扁桃砧木品种Nemaguard进行微繁研究.结果表明,正交试验确定了Nemaguard的最优增殖培养基组合为MS+2.5mg.L-1 6-BA+0.25mg.L-1 IAA,在该增殖培养基上试管苗丛生芽的增殖和生长达到最佳的状态,增殖倍数达到4.15倍;以MS+2.0mg.L-1 6-BA+0.2mg.L-1 IAA+0.2mg.L-1 GA3作为壮苗培养基,有效新梢率为46.2%;多因素筛选试验确定了以1/2MS+0.5mg.L-1 IBA作为生根培养基诱导生根,生根率高达51.6%.
- 杨宁陈锡莲丁芳霞郭桂丽石建业
- 关键词：扁桃砧木微繁试管苗正交试验增殖
- 低温胁迫对高山离子芥试管苗渗透调节物质及保护酶系的影响被引量：5
- 2014年
- 本研究以高山离子芥试管苗为材料,研究了渗透调节物质和保护酶系对其低温胁迫的响应机制.结果表明:渗透调节物质脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白分别以各自不同的响应方式在冷冻胁迫下增强高山离子芥的抗寒性.保护酶系中,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)在减轻低温胁迫下高山离子芥试管苗膜脂过氧化伤害作用中协同互补作用;过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化酶(APX)在低温胁迫下高山离子芥试管苗清除过氧化氢机制中发挥主要作用,且CAT对低温胁迫的响应强度远高于APX,说明保护酶系在抵制低温胁迫和保护高山离子芥免受低温伤害方面具有重要的生物学功能.
- 杨宁丁芳霞王程亮马娟石建业安黎哲
- 关键词：低温胁迫渗透调节物质保护酶
- 高山离子芥磷脂酶Dα编码区基因序列克隆与表达载体构建被引量：3
- 2014年
- 磷脂酶D(PLD)是重要的细胞磷脂代谢酶,在植物的生长及对不良环境胁迫的抵御反应中起重要作用.本试验以高山离子芥(Chorispora Bungeana)为材料,取幼叶分离mRNA,反转录合成cDNA,PCR扩增加XbaΙ和SacΙ酶切位点的高山离子芥磷脂酶Dα(PLDα)编码区序列、测序.结果表明插入片段为PLDα目的基因片段,全长约1 600bp,blast比对发现该序列与Genbank中报道的拟南芥PLDα基因相比同源率为94.6%.回收纯化PCR产物,克隆至pTG19-T载体双酶切后将目的基因片段定向克隆至pBI-121载体,构建高山离子芥PLDα基因编码区片段的表达载体pBI121-PLDα,双酶切及PCR鉴定结果显示表达载体构建成功,为下一步进行抗逆转基因作物选育奠定了基础.
- 杨宁强治全陈霞丁芳霞王程亮
- 关键词：高山离子芥表达载体构建
- 低温胁迫对高山离子芥试管苗膜脂过氧化及AsA-GSH循环系统的影响被引量：7
- 2014年
- 通过研究高山离子芥细胞在不同低温胁迫中活性氧代谢及AsA-GSH循环中生理指标的动态变化,揭示其响应低温胁迫的部分生理机制.以天然抗寒性植物高山离子芥试管苗为材料,研究了脂质过氧化产物,活性氧和抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环系统对其冷冻低温胁迫(4℃、0℃和-4℃)的反应.结果显示低温胁迫下,高山离子芥细胞中相对电导率、丙二醛(MDA)、H2O2含量和GSH不同程度的提高;抗坏血酸过氧化酶(APX)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)及谷胱甘肽还原酶(GR)活性在4℃和0℃胁迫下呈波动性变化,在-4℃胁迫下,APX和MDHAR活性处于抑制状态,显著低于对照(P<0.05),而GR活性则呈现出先升高后降低的变化趋势.结果表明低温胁迫下,高山离子芥试管苗发生不同程度的膜脂过氧化,并可能通过增加细胞内H2O2含量来促进其抗氧化保护能力;同时AsA-GSH循环代谢中抗氧化酶(APX,MDHAR,GR)与抗氧化剂(GSH)共同协调作用,以减轻低温所造成的伤害.
- 杨宁丁芳霞李宜珅王程亮
- 关键词：低温胁迫活性氧
- 对映-贝壳杉烷型二萜化合物Leukamenin E对拟南芥愈伤组织磷脂酶D及抗氧化物酶活性的影响被引量：4
- 2013年
- 以拟南芥愈伤组织为材料,研究磷脂酶D和抗氧化酶系对具有化感潜能的二萜化合物Leukamenin E的响应机制.结果表明:100μmol/LLeukamenin E处理36 h时线粒体膜结合态PLD活性最高,200μmol/L Leukamenin E处理24 h时微粒体膜结合态PLD活性最高.PLD基因实时荧光定量PCR分析表明该基因的表达受Leukamenin E诱导.随着Leukamenin E作用时间的延长,H2O2浓度逐渐升高,SOD,POD,CAT,APX活性总体呈先升高后降低的趋势.说明Leukamenin E能够影响与膜稳定性密切相关的PLD和抗氧化酶活性,这二者都积极响应了Leukamenin E的胁迫.
- 杨宁丁芳霞陈锡莲王程亮王丽佩丁兰安黎哲
- 关键词：拟南芥磷脂酶DRT-PCR
