丛晓燕
- 作品数：93 被引量：78H指数：5
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 副猪嗜血杆菌ompP2基因在猪肺泡巨噬细胞中的表达
- 2016年
- 为了进一步研究副猪嗜血杆菌(HPS)ompP2基因的功能,根据已发表的副猪嗜血杆菌核苷酸序列,设计并合成1对引物,PCR扩增HPS LZ株外膜蛋白ompP2基因,获得大小为1 158bp的核苷酸片段,该片段纯化后克隆至pEASY-Blunt载体,转化后鉴定,再与真核表达质粒pCI-neo经过酶切和连接反应,转化感受态大肠杆菌Trans-T1,双酶切鉴定,筛选阳性重组质粒并测序。通过脂质体法将pCI-neoompP2转染猪肺泡巨噬细胞,通过RT-PCR和Western blot方法检测重组质粒是否表达。结果显示,成功构建了含ompP2基因的副猪嗜血杆菌真核表达载体pCI-neo-ompP2,提取转染该质粒的猪肺泡巨噬细胞的mRNA,进行RT-PCR扩增,在1 000bp^2 000bp之间可见1条明显的条带。Western blot发现在42ku处出现目的条带。试验结果为后期研究副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞的机理奠定了基础。
- 于江杜以军李俊丛晓燕孙文博时建立陈智陈蕾吴家强王金宝
- 关键词：副猪嗜血杆菌真核表达载体猪肺泡巨噬细胞
- 副猪嗜血杆菌血清5型分离株生长曲线与致病力研究被引量：5
- 2011年
- 本文对副猪嗜血杆菌血清5型生长曲线进行了研究。结果表明:种子液接种后6 h开始进入对数生长期,培养24 h后活菌数达到最高峰,20～30 h活菌数维持在同一个水平,进入稳定期,30 h后活菌数呈现下降趋势,进入衰退期。该曲线提供了副猪嗜血杆菌生长规律,为疫苗研制提供了理论基础。
- 王大鹏吴家强于江丛晓燕杜以军孙文博张玉玉时建立李俊周顺王金宝
- 关键词：副猪嗜血杆菌致病力
- 一种实验室用高压水流清洗器
- 本实用新型属于实验室用清洗仪器的技术领域，具体为一种实验室用高压水流清洗器。采用包括供水软管，在供水软管的一端连接柱状出水装置，该柱状出水装置的喷嘴部位为圆台状，该圆台的顶面设有两列出水口，该两列出水口呈十字交叉，该圆台...
- 黄保华彭喆李俊刘俊珍时建立徐绍建丛晓燕朱荣生刘畅韩红
- 文献传递
- 环二鸟苷酸(c-di-GMP)作为潜在免疫佐剂的研究进展
- 环二鸟苷酸(cyclic diguanylate,c-di-GMP)是在细菌中普遍存在的第二信使分子,参与调节多种生理功能,近年来研究发现环二鸟苷酸作为免疫调节剂作用于真核细胞可产生很好的免疫调节作用,一系列的体内、体外...
- 丛晓燕陈智王金宝孙文博时建立于江赵鹏伟李俊杜以军吴家强陈蕾
- 关键词：动物疾病免疫调节剂疗效评价
- 文献传递
- PCV2Rep蛋白N-糖基化位点突变及其真核表达载体的构建被引量：3
- 2014年
- 根据GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)基因序列设计并合成引物,通过点突变的方法对其进行单点、两点和3点突变,成功获得含单点、两点和3点的突变体。设计引物扩增突变体的ORF1片段,将目的片段分别经KpnI和XbaI双酶切进而将其连接到真核表达载体pVAX1中,成功构建PCV2-pVAX1-Rep真核表达载体。此重组表达载体的成功构建为进一步研究PCV2 ORF1编码蛋白的生物学活性打下了基础。
- 王鹏张熙艳时建立徐绍建丛晓燕刘畅彭喆孙文博杜以军吴家强王金宝李俊
- 关键词：猪圆环病毒2型突变
- 猪内脏组织活体采样并进行核酸提取的装置
- 本发明公开了一种猪内脏组织活体采样并进行核酸提取的装置，其活体采样针包括作用于体内组织的针体和用于支承针体的支撑体，针体包括均为细长中空结构的内采样针和外切割针，内采样针的长度大于外切割针的长度，内采样针穿过外切割针的内...
- 孙文博吴家强陈智郑乾坤李敏邱宪波张璐璐刘国宪杜以军丛晓燕陈蕾于江李俊时建立郭立辉任素芳
- 表达猪pCD163的细胞系、其制备方法及应用
- 本发明涉及生物技术中基因表达领域，特别涉及一种表达猪pCD163的细胞系，通过RT-PCR扩增获得pCD163受体基因，将其插入真核表达载体pCI-neo中，构建真核表达质粒pCI-pCD163，将真核表达质粒pCI-p...
- 杜以军王金宝丛晓燕陈蕾齐静孙文博吴家强陈智于江郭立辉任素芳
- 猪核糖核酸酶L基因真核表达载体的构建与表达
- 2016年
- 为了研究猪核糖核酸酶L(sRNase L)的抗病毒能力,利用pXJ41载体构建猪RNase L基因真核表达载体pXJ41-sRNase L,采用poly(I∶C)转染PK-15细胞刺激诱导sRNase L基因转录mRNA;根据Gen Bank上sRNase L基因编码区序列设计引物并加入真核表达增强序列Kozak序列,通过RT-PCR扩增sRNase L编码基因序列,并将其克隆至真核表达载体pXJ41,通过双酶切和测序鉴定重组质粒;将重组表达载体pXJ41-sRNase L转染Marc-145细胞,Western blot检测sRNase L在Marc-145细胞中表达。结果显示:成功扩增得到sRNase L基因全长;成功克隆至真核表达载体pXJ41并能够在Marc-145细胞中成功表达。结果表明:成功构建了真核表达载体pXJ41-sRNase L并在Marc-145细胞中实现了sRNase L的表达,为进一步研究sRNase L在猪体内先天性免疫中抗病毒能力及其机制提供了条件。
- 周明明王加才姜宁朋丛晓燕陈蕾吴家强李俊杜以军王金宝
- 关键词：抗病毒先天性免疫
- 一种流猪行性腹泻病毒MY01株及其应用
- 本发明涉及一种流猪行性腹泻病毒MY01株及其应用，属于猪流行性腹泻病毒疫苗试剂领域。本发明的猪流行性腹泻病毒MY01株，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号为：CGMCC？No.11495。本发明的猪流行性腹...
- 吴家强陈智刘少宁杜以军郭立辉陈蕾孙文博丛晓燕任素芳张玉玉于江李加飞王淞
- 文献传递
- HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
- 2013年
- 本试验旨在建立一种用SYBR GreenⅠ荧光染料检测HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR mRNA表达水平的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路中进行初步应用。利用TRIzol法提取总RNA,经Oligo d(T)15进行反转录,利用PCR扩增各段目的基因,并克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经鉴定为阳性的重组质粒作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和熔解曲线,并进行灵敏性、特异性和重复性试验。根据建立的实时荧光定量RT-PCR方法,检测FMDV L蛋白对Ⅰ型IFN效应因子的抑制效果。HeLa细胞在转染FMDV L蛋白真核表达质粒,并受到Ⅰ型IFN刺激后ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR的相对表达量较转染空载体或表达GST的真核表达质粒明显降低。本试验建立了HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的实时荧光定量RT-PCR检测方法,为在mRNA水平上对HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的定量分析奠定了基础,并成功地初步应用于FMDV L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路的研究中。
- 刘纪玉杜以军刘星吴家强李俊丛晓燕赵新华徐绍建孙文博时建立单虎王金宝
- 关键词：实时荧光定量RT-PCRSYBRL蛋白干扰素
